国家自然科学基金(30830117)
- 作品数：9 被引量：50H指数：4
- 相关作者：郭顺星邢咏梅王春兰陈晓梅王云强更多>>
- 相关机构：中国医学科学院北京协和医学院山西大学中国医学科学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国际科技合作与交流专项项目创新药物研究开发技术平台建设项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 中国西南7种石斛植物活性内生真菌及其遗传关系(英文)被引量：2
- 2012年
- 目的:对中国西南地区7种石斛植物的内生真菌进行抗菌活性筛选,考察活性菌株之间的遗传关系。方法:采用组织块法分离真菌,琼脂扩散法进行抑菌活性筛选,通过rDNA的ITS序列为基础鉴定活性真菌,用邻接法(NJ)和最大简约法(MP)进行遗传关系考察。结果:从7种石斛属植物分离到98株真菌,它们对Escherichia coli,Bacillus subtilis,Staphylococcus aureus,Candida albicans,Cryptococcus neoformans和Aspergillus fumigatus的抑制率分别是1.02%,102%,184%,1.02%,1.02%,10.2%,其中DL-3,DL-18,DL-21,DM-2,DG-10和DN-1显示出了对B.subtilis,S.aureus和A.fumigatus较强的生长抑制性。24株活性真菌隶属于7个目,11个属,14个种,NJ和MP系统树阐明活性菌之间的亲缘关系。结论:本研究对于考察珍惜濒危石斛属植物的内生真菌的生物活性以及它们之间的遗传关系具有重要的生态价值,为石斛根茎部活性真菌的研究提供参考。
- 崔晋龙王云强邢咏梅郭顺星肖培根王梦亮
- 关键词：抑菌活性琼脂扩散法内生真菌ITS序列分析石斛
- 药用真菌猪苓2种氧化应激相关基因的克隆和序列分析
- 2015年
- 【目的】克隆药用真菌猪苓NADPH氧化酶及乙二醛氧化酶基因并进行生物信息学分析。【方法】利用RACE技术取得基因c DNA全长;利用生物信息学在线工具预测蛋白的理化性质、结构域等分子特征;用Bioeditor和MEGA 5.0分别对氨基酸进行多序列比对和进化关系分析。【结果】克隆到Pu NOX(JX035912)及Pu GLOX(JX035913)。它们c DNA全长分别为1674 bp、1723 bp;分别编码557、515个氨基酸,相对分子质量分别为63.845 k Da、55.891 k Da,等电点分别为5.58、4.82。Pu NOX与真菌NADH蛋白的一致性为74%-80%,系统进化树分析结果显示猪苓Pu NOX与糙皮侧耳(Pleurotus ostreatus)亲缘关系较近;Pu GLOX与真菌乙二醛氧化酶同源性较高,均大于50%;其系统进化树分析表明猪苓Pu GLOX与黄孢原毛平革菌(Phanerochaete chrysosporium)进化上最保守。【结论】药用真菌猪苓NADPH基因Pu NOX以及乙二醛氧化酶基因Pu GLOX的分子特征为进一步研究其在猪苓菌核生长发育过程中的作用奠定理论基础。
- 刘蒙蒙宋超邢咏梅郭顺星
- 关键词：猪苓氧化应激基因克隆
- 药用真菌猪苓遗传多样性及进化的研究
- 猪苓为名贵药用真菌，其菌核具有利水、渗湿之功效为我国药典所收录。猪苓广泛分布于中国、日本、韩国及北半球的温带地区。不同地域的猪苓其遗传背景是否有差异当前并不明确。本文欲对不同产地的猪苓进行遗传背景分析，明确猪苓种内遗传多...
- 邢晓科郭顺星
- 关键词：多孔菌属系统进化真菌多样性
- 液体深层培养猪苓多糖脱色技术的研究被引量：4
- 2009年
- 目的研究液体深层培养猪苓菌丝体水提部位粗多糖脱色的最佳工艺条件。方法采用单因素试验和正交试验分别考察双氧水、活性炭、DEAE纤维素等3种脱色剂对菌丝体粗多糖的脱色效果,用光谱扫描法检测光吸收强度的变化。结果活性炭作为脱色剂,效果优于其他2种,脱色最佳工艺条件为:温度60℃,时间40min,活性炭添加量3g·100mL-1。结论实验中优化后的脱色方法简便、易行,也为猪苓菌丝体多糖的工业化提取中脱色工序的操作提供理论依据。
- 沈晶晶郭顺星王春兰陈晓梅
- 关键词：脱色菌丝体多糖猪苓
- 猪苓菌丝形成菌核差异蛋白质组学研究被引量：5
- 2017年
- 药用真菌猪苓菌丝形成菌核分子机制一直是人们关注的热点问题。本研究首次对猪苓进行了系统的蛋白质组学研究。基于液质联用技术并在数据依赖性采集模式下,成功鉴定了猪苓菌丝形成菌核的初始期、菌核生长期和成熟期的蛋白质组,共鉴定蛋白1 391个(global FDR 1%)。采用先进的SWATH MSALL的非标记定量方式对初始期菌丝和菌核进行了差异蛋白质组学研究,从中定量蛋白1 234个,占鉴定蛋白数量的88.7%。猪苓菌丝形成菌核过程中有378个蛋白差异表达。差异蛋白GO注释结果表明,在猪苓菌丝形成菌核过程中,差异蛋白参与的蛋白功能和生物学过程多样,以催化和结合为主,还参与感知环境刺激、信号转导、电子转移、过氧化活性、菌丝生长及胞壁合成等功能。进一步推测分析表明,猪苓菌丝形成菌核可能是由于缺氧或温差等多种环境胁迫诱导所致,生成活性氧并形成氧化应激状态。信号通过丝裂原活化蛋白激酶通路(MAPK通路)途径向下游传递,可能调控了胞壁蛋白糖基化修饰,进而促进猪苓菌丝极性生长和菌丝形态学变化而形成菌核。KEGG代谢通路分析表明,差异蛋白还主要参与了糖、脂质和氨基酸等初级产物以及甾醇、多聚乙酰等次级代谢物的合成与代谢。因此,对差异蛋白质组的深入解析和研究有利于揭示猪苓菌丝形成菌核的蛋白分子机制,具有较强的理论和现实意义。
- 李兵王春兰邢咏梅曾旭田丽霞郭顺星
- 关键词：猪苓环境胁迫丝裂原活化蛋白激酶通路细胞极性
- 环境因子对猪苓菌丝体生长发育的影响被引量：17
- 2011年
- 目的为系统地探讨不同环境因素对猪苓菌丝生长发育的影响,对pH,温度,不同光照条件等环境因素影响猪苓菌丝生长、菌丝多糖含量及是否能够诱导猪苓菌核形成进行了研究。方法用改良的PDA培养基以平皿培养真菌的传统方法对猪苓在不同环境因素作用下菌丝的生长状况进行了分析,用菌落直径来判断猪苓菌丝的生长速度。以苯酚-硫酸法测定不同pH及温度条件下培养的猪苓菌丝的多糖含量。结果初始pH为8时最适于猪苓菌丝生长;同时在这一条件下成功诱导了猪苓菌核形成;25℃是猪苓生长的最适温度;光照不利于猪苓菌丝生长。不同pH值的改良PDA培养基培养的猪苓菌丝多糖含量以pH 8,pH 9和pH 10组多糖含量最高;其次是pH 5组和pH 6组;多糖含量最低的是pH 4和pH 7组。不同温度条件下培养的猪苓菌丝以5℃组多糖含量最高,其次是15℃,10℃及25℃3个组多糖含量较高,多糖含量最低的是30℃组。结论环境因子对猪苓菌丝生长发育有着重要的影响,为深入研究猪苓菌丝形成菌核的人工培养提供了参考。
- 邢咏梅郭顺星
- 关键词：环境因子猪苓菌丝菌核
- 正交设计法优化培养基中美拉德反应条件以提高猪苓菌核产量的研究被引量：3
- 2011年
- 目的用正交设计法优化培养基中美拉德反应的条件,以提高猪苓菌核产量。方法以果糖和精氨酸作为美拉德反应的原料,经过调节pH后在一定温度下独立灭菌一定时间,之后与含蛋白胨和无机盐的培养基混合均匀并用于诱导猪苓菌核。以菌核干重为指标,对灭菌前pH值,果糖与精氨酸浓度比,灭菌时间(min),灭菌温度(℃)4个因素进行了L9(34)正交实验。结果极差分析结合方差分析表明,灭菌前pH值对菌核产量具有显著影响。优化后反应条件为:灭菌前pH为10;浓度比为200∶1;灭菌时间为80 min;灭菌温度为121℃。菌核产率提高了75%,菌核干重提高到每皿(0.225±0.16)g。结论相比优化前菌核产率为30%～50%,菌核干重为每皿0.1～0.15 g,新的反应条件显著提高了菌核产量。
- 尹婉嫱郭顺星
- 关键词：猪苓菌核美拉德反应正交设计法
- 3株诱导白木香结香真菌基本特性的评价被引量：4
- 2013年
- 目的研究诱导白木香产生沉香的3株活性真菌的基本特性、3株真菌之间以及它们与宿主之间的相互关系,为它们的应用与研究提供基础性数据。方法采用光学显微镜观察其菌落形态和显微特征,采用琼脂扩散法研究其相互关系。结果得到了3株活性真菌的基本特征数据,基本阐明了体外条件下活性真菌之间以及它们与宿主之间的关系。结论本研究结果对活性菌的应用和推广、诱导白木香生产沉香机制研究有重要意义。
- 崔晋龙肖培根郭顺星王梦亮
- 关键词：真菌诱导活性琼脂扩散法
- 药用真菌猪苓溶血素基因克隆和序列分析被引量：7
- 2013年
- 利用3'-RACE-PCR方法首次从药用真菌猪苓中克隆得到与真菌形态发育相关的溶血素基因。结果表明,猪苓溶血素基因的全长cDNA为744bp,其中编码区占447bp,共编码148个氨基酸,推测其分子量约为15.79kDa,理论等电点为4.89。推定的猪苓溶血素蛋白具有与杨树菇溶血素类蛋白家族相同的结构域和功能位点,两者同源性为60%。系统进化树结果显示猪苓溶血素隶属于担子菌类群。实时荧光定量PCR分析结果表明在菌核形成初期猪苓溶血素基因表达量较高,且显著高于菌丝体中猪苓溶血素基因的转录水平,说明溶血素基因参与了猪苓菌核的形态发育。
- 宋超郭顺星
- 关键词：猪苓溶血素实时荧光定量PCR菌核
- 环境因子对猪苓生长发育的影响
- 目的为系统地探讨不同环境因素对猪苓生长发育的影响,本研究对pH值,温度,不同光照条件等环境因素影响猪苓菌丝生长及菌核形成进行了研究。方法以平皿培养真菌的传统方法用改良的PDA培养基对猪苓菌丝在不同环境因素下的猪苓菌丝的生...
- 邢咏梅郭顺星
- 关键词：环境因子猪苓菌丝菌核
- 文献传递
