国家自然科学基金(21207084)
- 作品数：6 被引量：8H指数：2
- 相关作者：宋莉李卓玉董宁宁肖虹刘建新更多>>
- 相关机构：山西大学山西医科大学第一医院浙江大学更多>>
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- Gli1与β-catenin相互作用促进二者在结肠癌细胞中的协同核输入（英文）被引量：1
- 2014年
- Wnt信号通路和Hedgehog(Hh)信号通路在胚胎和干细胞的发育中发挥重要作用.此外,这两条信号途径在结肠癌复发和浸润的过程也至关重要.然而,Wnt信号通路、Hedgehog信号通路二者之间具体的交互作用机制目前仍不清楚.本文发现,这两条途径的关键分子Gli1和β-联蛋白之间存在蛋白质相互作用.Gli1与β-联蛋白之间的分子相互作用有助于二者的核输入.同时发现,在肠癌细胞系中,Gli1与β-联蛋白协同上调表达.Li Cl激活细胞Wnt信号通路使Gli1表达水平增加,RNA干扰抑制Wnt信号通路,Gli1的表达水平下降.同时,Gli1的过表达也提高了细胞内β-联蛋白的表达水平,并且用Hedgehog信号通路抑制剂GANT61处理细胞,降低Gli1的表达后细胞内β-联蛋白的表达相应下降.本研究揭示了Gli1和β-联蛋白的相互作用及二者协助核输入在Wnt、Hedgehog信号通路交互调节中发挥重要作用,Wnt、Hedgehog信号通路交互作用为大肠癌发生发展研究提供了细胞水平交互调控机制.
- 李文玲任桦宋莉李卓玉朱镭郭素堂祝文思
- 关键词：相互作用GLI1WNT信号通路HEDGEHOG信号通路结肠癌
- 五氯联苯PCB118对人肝癌细胞BEL-7402细胞黏附的影响被引量：1
- 2016年
- 目的探讨五氯联苯PCB118对人肝癌细胞细胞-基质间和细胞-细胞间黏附的影响和机制。方法人肝癌细胞BEL-7402用PCB118 0.1,1.0和10.0 nmol·L^(-1)分别处理4和6 d后,采用细胞-基质间黏附实验检测细胞-基质间黏附,细胞聚集实验检测细胞间黏附,实时荧光定量PCR法和Western蛋白印迹法检测细胞黏附关键因子CD29、E-钙黏着蛋白和N-钙黏着蛋白的表达。结果与细胞对照组相比,人肝癌细胞BEL-7402在PCB118 0.1,1.0和10.0 nmol·L^(-1)处理6 d后,细胞-基质间黏附能力明显提高(P<0.05),细胞-细胞间黏附明显降低(P<0.05)。实时荧光定量PCR结果显示,PCB118明显提高黏附关键因子CD29和N-钙黏着蛋白m RNA水平(P<0.05),显著降低E-钙黏着蛋白m RNA水平(P<0.05)。Western蛋白印迹结果表明,PCB118处理后,CD29和N-钙黏着蛋白的蛋白表达显著升高(P<0.01),E-钙黏着蛋白的蛋白表达显著降低(P<0.01)。结论 PCB118影响肝癌细胞黏附并改变黏附因子CD29、E-钙黏着蛋白和N-钙黏着蛋白的表达,这可能与PCB118促进肝癌的发展有关。
- 梁文丽宋莉李卓玉
- 关键词：多氯联苯肝癌
- 滴滴涕对人大肠癌DLD1细胞上皮间充质转化的影响被引量：3
- 2017年
- 目的探究滴滴涕(DDT)对人结直肠腺癌上皮细胞(DLD1)上皮间充质转化的影响及机制。方法DLD1细胞用DDT 0.01,0.1,1.0,10.0和100.0 nmol·L^(-1)处理48 h后,倒置显微镜下观察细胞形态;实时荧光定量PCR法检测E-钙黏着蛋白、N-钙黏着蛋白、波形蛋白和锌指转录因子Snail1的mRNA表达。Western蛋白质印迹法检测信号转导和转录激活因子3(STAT3)信号通路主要蛋白STAT3和p-STAT3的蛋白水平。用STAT3抑制剂WP1066(5μmol·L^(-1))处理,通过Western印迹法和实时荧光定量PCR法检测其对DDT诱导的STAT3/Snail1信号通路中p-STAT3、STAT3的蛋白水平和上皮间充质转化关键因子E-钙黏着蛋白、N-钙黏着蛋白、波形蛋白和锌指转录因子Snail1的mRNA水平的影响。结果与正常对照组相比,DLD1细胞在DDT处理48 h后,细胞形态由卵圆形逐渐变为长梭形,E-钙黏着蛋白mRNA相对表达显著降低(P<0.01),为正常对照组的(42.4±2.8)%。N-钙黏着蛋白和波形蛋白mRNA相对表达显著提高(P<0.01),为正常对照组的1.91±0.1倍和(1.5±0.2)倍。STAT3信号通路蛋白STAT3和p-STAT3蛋白表达均升高(P<0.01),为正常对照组的2.1和1.8倍。锌指转录因子Snail1的mRNA相对表达显著升高(P<0.01),是正常对照组的(1.5±0.1)倍。STAT3抑制剂WP1066 5μmol·L^(-1)处理后,锌指转录因子Snail1 mRNA的表达明显下调(P<0.01),为DDT 1.0 nmol·L^(-1)处理组的(56.3±0.9)%,同时抑制DDT诱导的E-钙黏着蛋白mRNA表达升高(P<0.01),为DDT 1.0 nmol·L^(-1)处理组的2.5±0.1倍,N-钙黏着蛋白和波形蛋白mRNA表达降低(P<0.01),分别为DDT 1.0 nmol·L^(-1)处理组的(50.2±2.9)%和(61.6±6.1)%。结论 DDT可能通过STAT3/Snail1信号通路改变上皮间充质转化子E-钙黏着蛋白、N-钙黏着蛋白和波形蛋白的表达,进而促进大肠癌细胞上皮间充质转化。
- 董宁宁宋莉李卓玉肖虹
- 关键词：大肠癌上皮间充质转化信号转导和转录激活因子3
- 低浓度p,p'-滴滴涕对大肠腺癌SW620细胞增殖和凋亡的影响被引量：2
- 2015年
- 目的探讨低浓度p,p＇-滴滴涕暴露对大肠癌SW620细胞增殖和凋亡的影响及作用机制。方法用p,p＇-滴滴涕1×10-12~1×10-6mol·L-1作用于SW620细胞48和96 h后,采用MTT实验检测细胞存活率。用p,p＇-滴滴涕1×10-10,1×10-9和1×10-8mol·L-1处理SW620细胞96 h后,用流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡率。Western蛋白质印迹法检测Wnt/β-连环蛋白信号通路成员β-连环蛋白、磷酸化β连环蛋白和磷酸化糖原合成酶激酶3β,下游靶蛋白c-Myc和细胞周期蛋白D1,以及凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、胱天蛋白酶原8和胱天蛋白酶原3表达水平。结果 p,p＇-滴滴涕1×10-12~1×10-7mol·L-1作用96 h,明显促进SW620细胞存活（P〈0.01）;p,p＇-滴滴涕1×10-10,1×10-9和1×10-8mol·L-1处理SW620细胞96 h,与对照组相比,G1期细胞百分率显著减少（P〈0.01）,S期细胞百分率显著增加（P〈0.01）,细胞凋亡率显著降低（P〈0.01）;Wnt/β-连环蛋白信号通路成员β-连环蛋白和磷酸化糖原合成酶激酶3β以及下游靶蛋白c-Myc和细胞周期蛋白D1水平显著升高（P〈0.01）,磷酸化β连环蛋白水平显著降低（P〈0.01）;凋亡相关蛋白Bcl-2、胱天蛋白酶原8和胱天蛋白酶原3表达显著升高（P〈0.01）,Bax表达和胱天蛋白酶3活性显著降低（P〈0.01）。结论低浓度p,p＇-滴滴涕可能通过激活Wnt/β-连环蛋白信号通路及影响凋亡相关蛋白表达,进而促进SW620细胞增殖,抑制SW620细胞凋亡。
- 刘建新赵君宇晋小婷李卓玉宋莉
- 关键词：Β-连环蛋白
- 栝楼抗肿瘤活性蛋白抑制大肠癌细胞迁移和侵袭的机制研究
- 大肠癌(Colorectal cancer，CRC)是在环境或遗传等致癌因素作用下导致大肠黏膜上皮发生的恶性病变，是我国常见恶性肿瘤，具有较高的死亡率。目前大肠癌的治疗方式通常采用综合治疗方式，包括手术治疗、放疗、化疗和...
- 孙晓梅
- 关键词：大肠癌细胞侵袭
- 文献传递
- 结肠腺瘤息肉蛋白突变经PI3K/AKT信号通路影响犬肾细胞MDCK的细胞粘附(英文)
- 2014年
- 结肠腺瘤息肉蛋白(APC)是一个肿瘤抑制因子,它不仅参与Wnt信号通路的传导,而且对细胞粘附、细胞骨架的组织和迁移等都有影响.APC突变发生于大多数结肠癌中.为了探讨APC突变对细胞粘附的影响及机制,本研究利用细胞粘附实验分析了MDCK-APC-N1和对照MDCK-GFP稳定表达细胞株系的细胞粘附情况.实验结果显示,在MDCK细胞中过表达APC-N1导致细胞-细胞间的粘附减少,细胞-基质间的粘附增加.荧光定量PCR和Western印迹实验表明,在MDCKAPC-N1细胞中,E-cadherin表达水平降低,CD29、P-FAK(Y397)、β-catenin和P-AKT(T308)表达水平升高.在MDCK-APC-N1细胞中,敲减β-catenin导致E-cadherin表达量升高,而CD29表达没有明显变化.进一步利用PI3K抑制剂LY294002处理MDCK-APC-N1细胞,结果发现,E-cadherin表达量明显升高,CD29表达量明显降低.这些结果揭示,APC-N1可活化PI3K/AKT信号通路,进而改变粘附蛋白E-cadherin和CD29影响细胞粘附.
- 宋莉尉文霞常姣李卓玉
- 关键词：P13KAKT信号通路
- 五氯联苯PCB126对人肝癌细胞SMMC-7721有氧糖酵解的影响被引量：1
- 2017年
- 目的探讨五氯联苯PCB126对人肝癌细胞有氧糖酵解的影响和机制。方法取人肝癌细胞SMMC-7721,用浓度分别为10^(-11)、10^(-10)、10^(-9)、10^(-8)、10^(-7) mol/L PCB126分别处理24、48 h,并以0.1%DMSO作为对照组。用试剂盒检测培养基中葡萄糖含量和乳酸生成量,以实时荧光定量PCR法检测丙酮酸激酶M2(PKM2)和有氧糖酵解通路中关键因子葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)、乳酸脱氢酶(LDHA)、丙酮酸脱氢酶激酶(PDK)的表达。用RNA干扰技术敲减PKM2,检测其对培养基中葡萄糖含量、乳酸生成量和有氧糖酵解关键因子表达的影响。结果与对照组相比,人肝癌细胞SMMC-7721经10^(-10)、10^(-9)、10^(-8)mol/L PCB126处理48 h后,培养基中葡萄糖含量明显下降,乳酸生成量明显增加,差异有统计学意义(P<0.05);与对照组相比,处理48 h后对细胞存活率无明显影响,72 h时细胞存活率明显升高。PCB126暴露可明显升高PKM2、GLUT1、LDHA和PDK mRNA水平,差异有统计学意义(P<0.05)。用PKM2 shRNA敲减PKM2后,与10^(-9) mol/L PCB126处理组相比,培养基中葡萄糖含量升高,乳酸生成量下降,GLUT1、LDHA和PDK mRNA水平明显降低,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论 PCB126可通过PKM2上调肝癌细胞GLUT1、LDHA和PDK的表达,从而促进有氧糖酵解,这可能与PCB126促进肝癌的发展有关。
- 郭琳琳宋莉李卓玉
- 关键词：多氯联苯肝癌有氧糖酵解
