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国家自然科学基金(81071902)
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陈荣新
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血管内皮细胞培养上清对肝癌细胞Hep3B增殖、侵袭影响
2014年
目的 观察血管内皮细胞培养上清对肝癌细胞Hep3B增殖及侵袭转移能力的影响,探讨肿瘤微环境中内皮细胞在肝癌发生、发展中的作用.方法 以人脐静脉内皮细胞(HUVEC)培养上清为条件培养液(CM),以内皮细胞培养液(EBM)为对照组,分别对Hep3B细胞进行干预.观察其对肝癌细胞Hep3B增殖、迁移和侵袭能力的影响,并检测相关信号通路分子.结果 与对照细胞比较,细胞计数试剂盒-8(CCK-8)实验结果显示CM促进肝癌细胞的增殖(P<0.01);细胞划痕实验和迁移实验也分别显示CM明显促进肝癌细胞迁移能力[(33.65±1.22)%比(57.85±2.20)%,P <0.01;(51.2±3.1)个比(28.4±4.6)个,P<0.01];侵袭实验显示CM明显诱导肝癌细胞侵袭能力[(16.2±2.3)个比(5.4±1.5)个];同时CM干预的肝癌细胞侵袭转移相关基因,如基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、骨桥蛋白(OPN)和簇分化抗原44(CD44)表达及丝氨酸/酪氨酸激酶(Akt)和细胞外信号调节激酶(ERK)蛋白磷酸化水平均被明显上调.结论 血管内皮细胞培养上清体外促进肝癌细胞增殖、迁移和侵袭转移,提示血管内皮细胞可通过旁分泌机制参与肝癌侵袭转移过程.
王耀辉
董银英
许立超
李国栋
何新红
谢晓莺
陈荣新
李文涛
崔杰峰
关键词:
肝细胞肝癌
内皮细胞
旁分泌
肝癌体外培养三维模型的建立
2011年
目的构建能模拟癌细胞从黏附、侵袭到肝内癌巢形成过程的肝癌肝侵袭转移体外实验模型。方法将肝癌细胞MHCC97H与肝组织片层置乇RwV生物反应器进行三维混合培养,收集不同培养时间的混合类组织标本,检测其病理改变及侵袭转移关联基因表达。结果转移关联基因的表达随病理侵袭进程的不同(癌细胞黏附、侵袭、癌巢形成)而呈不同模式[初期:基质金属蛋白酶(MMP)-9,t=-5.847,P〈0.01;钙黏蛋白(CDH1),t=3.199,P〈0.05;,MMP-7和CIM4,相对表达均〉2。中期:MMP-2,t=-10.295,P〈0.01;趋化因子受体(CXCR4)和骨桥蛋白(SPP1),相对表达〉2和〉1.7。后期:CXCL12,t=-4.412,P〈0.05]。结论该模型较好地模拟了肝癌肝侵袭转移的病理全过程,有助于侵袭转移病理阶段的认识及“过程”关键蛋白筛查。
崔杰峰
陈荣新
唐建华
郭坤
高东梅
陈洁
陈军
刘银坤
关键词:
生物反应器
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