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国家自然科学基金(31270915)

作品数:2 被引量:2H指数:1
相关作者:王应张扬马靖李美娜李中杰更多>>
相关机构:北京大学药物分析教研室更多>>
发文基金:国家教育部博士点基金国家自然科学基金国家科技重大专项更多>>
相关领域:医药卫生更多>>

文献类型

  • 2篇中文期刊文章

领域

  • 2篇医药卫生

主题

  • 1篇重组蛋白
  • 1篇微量蛋白
  • 1篇分泌
  • 1篇PC3
  • 1篇THE_IN...
  • 1篇BETWEE...
  • 1篇CC
  • 1篇CCR4
  • 1篇CHO细胞
  • 1篇COMPOU...
  • 1篇CZE
  • 1篇纯化

机构

  • 2篇北京大学
  • 1篇药物分析教研...

作者

  • 2篇王应
  • 1篇凌笑梅
  • 1篇杨璐
  • 1篇李中杰
  • 1篇李美娜
  • 1篇马靖
  • 1篇张扬

传媒

  • 1篇北京大学学报...
  • 1篇Journa...

年份

  • 2篇2014
2 条 记 录,以下是 1-2
排序方式:
人PSMP重组蛋白在CHO细胞中表达、纯化及功能鉴定被引量:2
2014年
目的:构建新的具有趋化作用的人类细胞因子PSMP的真核表达载体,在仓鼠卵巢细胞(Chinese hamster ovary,CHO)中表达并纯化,为PSMP的功能机制研究奠定基础。方法:从pcDNA3.1-PSMP-myc/His中切下PSMPmyc/His片段,插入pMH3表达载体。利用电穿孔法将该表达载体转染CHO细胞,G418抗性筛选稳定克隆株。以Dot blot及Western blot法检测上清液中PSMP蛋白的表达,利用有限稀释法对抗性筛选出的混合克隆单克隆化,悬浮无血清大批培养工程细胞,通过镍亲和层析法纯化蛋白,SDS-PAGE电泳分析蛋白纯度,Boyden小室体外趋化实验分析蛋白功能活性。结果:PSMP-myc/His基因插入pMH3载体后成功构建真核表达载体pMH3-PSMP,转染CHO细胞后经2次克隆化获得稳定表达PSMP的基因工程细胞株。镍亲和层析纯化的重组蛋白PSMP纯度达95%以上且具有生物学活性。结论:成功构建了PSMP蛋白的真核表达载体,并获得其稳定表达的CHO细胞株,获得了较高纯度的、具有生物学活性的重组蛋白,为下一步PSMP功能和机制研究提供有用工具。
马靖裴晓磊张扬王应
关键词:CHO细胞
Study of the interactions between compound S009 and the extracellular loops of CC chemokine receptor 4 by capillary zone electrophoresis
2014年
CC chemokine receptor 4(CCR4) is a G-protein-coupled receptor which plays a pivotal role in allergic inflammation. In the present study, three extracellular loops(EL1-3) of CCR4 were synthesized, and the interactions between the extracellular loops and compound S009 were investigated using capillary zone electrophoresis(CZE). Both qualitative and quantitative characterizations of the compound-peptide binding were carried out. The experimental data indicated that compound S009 exhibited interactions with EL3, and a binding constant of(12.5±0.19)×10^4 M^-1 was determined using the Scatchard plot. Our study identified the specific domains of CCR4 that could be targeted by small molecules and provided insights for the discovery of novel CCR4 antagonists.
杨璐帕子来提.亚库甫李美娜凌笑梅李中杰王应
关键词:CCR4CZE
共1页<1>
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