国家重点基础研究发展计划(2012CB517506)
- 作品数：7 被引量：17H指数：3
- 相关作者：凌文华徐芬翁建平沈天然梁华更多>>
- 相关机构：中山大学中山大学附属第三医院韶关学院更多>>
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- SIRT1敲除对C57BL／6J小鼠脂肪细胞分化的影响和机制探讨被引量：4
- 2013年
- 目的探讨沉默信息调节因子1（SIRT1）在脂肪分化和发育中的作用及相关机制。方法建立以C57BL／6J为基因背景的SIRTl全敲除小鼠（简称SIRT1^-/-小鼠），以同窝的野生型小鼠作为正常对照。28周龄小鼠测体重和体内脂肪含量，留取附睾脂肪垫。用BODIPY558／568和isolectinAlexaFluor488分别对离体后新鲜的附睾脂肪尖端的脂肪细胞和毛细血管进行荧光染色，在共聚焦显微镜下成像后用Imafis图像分析处理软件重建为三维图像。将固定后的附睾脂肪进行组织切片，行HE染色；用免疫组化的方法测血管内皮细胞标志物CD31蛋白的表达。体外实验取怀孕小鼠第13～14天的胚胎，制备小鼠胚胎成纤维（MEF）细胞，诱导分化为成熟的脂肪细胞，进行油红O染色。结果与野生型小鼠相比，SIRT1^-/-小鼠的体重显著低[（42．1±1．6）比（25．4±1．0）g，P〈0．05]，体内脂肪含量明显少[（13．4±1．0）比（7．8±0．5）g，P〈0．05]，附睾脂肪组织明显发育不良，组织切片HE染色显示SIRT1^-/-小鼠的脂肪细胞显著小、细胞外基质少；而体外实验中SIRT1^-/-小鼠MEF细胞的成脂能力反而强于野生型小鼠[油红O定量测吸光度（A）值：1．93±0．09比0．71±0．04，P〈0．05]。进一步实验发现，与野生型小鼠相比，SIRTl1^-/-小鼠附睾脂肪组织中血管生成显著少（毛细血管所占体积百分比：2．92％±0．03％比1．34％±0．02％，P〈0．05），表现为三维成像中毛细血管网较野生型对照组少近1／2，且SIRT1^-/-小鼠附睾脂肪组织中血管内皮细胞标志物CD31的表达受损。结论SIRT1全敲除导致C57BL／6J基因背景的SIRT1^-/-小鼠脂肪组织发育不良，其机制并非由于成脂能力减弱，而可能与脂肪组织中血管生成受损使得脂肪细胞的分化成熟受阻有关。
- 徐芬严晋华梁华许雯叶建平翁建平
- 关键词：脂肪细胞细胞分化血管生成
- SIRTl：非酒精性脂肪性肝病治疗的新靶点被引量：1
- 2014年
- 近年来，随着生活方式的改变，代谢相关的非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）正迅速发展为全世界范围内最常见的慢性肝脏疾病，严重威胁人类的健康。然而，目前NAFLD的治疗以生活方式干预为主，尚无理想的特异治疗药物。沉默信息调节因子1（SIRTl）是在哺乳动物细胞中发现的一种蛋白去乙酰化酶，研究发现其可通过改善外周胰岛素抵抗、调节肝脏脂肪代谢、改善氧化应激及线粒体功能障碍和减轻炎症反应等发挥改善NAFLD肝脏病变的作用，有望成为NAFLD治疗药物开发的新靶点。本文就SIRTl在NAFLD领域中的研究进展综述如下。
- 郑晓彬徐芬翁建平
- 关键词：新靶点慢性肝脏疾病生活方式干预线粒体功能障碍
- 非酒精性脂肪性肝病患者血清溶血卵磷脂水平的研究被引量：4
- 2014年
- 目的探讨非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)患者血清溶血卵磷脂(LPC)水平变化以及其与非酒精性脂肪性肝病的关系。方法选取符合纳入标准的非酒精性脂肪性肝病和正常对照人群各33例。收集并分析两组人群人口学特征以及临床资料,萃取分析血清所含脂质,比较组间血清溶血卵磷脂的相对含量,并对溶血卵磷脂进行多因素非条件Logistic回归分析。结果 NAFLD组LPC 18∶2、LPC 20∶5相对含量均低于正常对照组[(23.99±4.86)μmol/L vs(28.50±6.91)μmol/L,(3.88±0.89)μmol/L vs(4.68±1.33)μmol/L],差异有统计学意义(P<0.01)。多因素Logistic回归分析发现,校正年龄、性别混杂因素,并纳入腰臀比、谷丙转氨酶、甘油三酯以及空腹血糖危险因素后,LPC 18∶2、LPC 20∶5的OR值分别为0.86、0.47,表明血清溶血卵磷脂与NAFLD呈负相关。结论血清溶血卵磷脂与NAFLD呈负相关,LPC可能成为有意义的生物标志物,用于诊断并预测NAFLD的发生。
- 李真沈天然王泽兰郭红辉凌文华
- 关键词：非酒精性脂肪肝溶血卵磷脂脂质代谢
- 血清白介素-33对非酒精性脂肪性肝病的诊断价值分析被引量：2
- 2014年
- 目的探讨IL-33对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)的预测诊断价值及其相关影响因素。方法选取2012年10月至2013年1月间在中山大学第三附属医院体检中心体检人群,将符合NAFLD诊断标准的140例患者纳入病例组;同时将明确排除NAFLD,不饮酒且无心血管疾病及其他慢性病,性别、年龄匹配的140名健康体检人群纳入对照组。分别对两组人群进行身高、体重、腰围、臀围、血压进行测量,对空腹静脉血的谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、空腹血糖、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、血尿酸和血清IL-33等指标进行检测。采用多因素非条件logistic回归分析以及ROC曲线的绘制,探索IL-33与非酒精性脂肪性肝病的关系。结果共研究NAFLD患者140例,其中男性87例,女性53例,平均年龄为(54.51±9.08)岁。对照组140人,男性76人,女性64人,平均年龄为(52.69±9.22)岁。两组平均年龄、性别构成差异均无统计学意义(均P>0.05)。NAFLD组收缩压、舒张压、体质指数(BMI)、腰围、臀围、腰臀比、ALT、TG及血尿酸均高于对照组(P<0.01);NAFLD组HDL-C胆固醇低于对照组(均P<0.01)。NAFLD组超重或肥胖、高血压、血脂异常、代谢综合征以及高尿酸血症的患病率均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01);NAFLD组、对照组的血清IL-33水平分别为(3.92±1.96)、(1.92±1.31)pg/mL,NAFLD组高于对照组(P<0.01)。高IL-33、高ALT、高TG、超重或肥胖、高血压是NAFLD的危险因素(OR=3.678、1.091、2.557、6.437、2.383);高HDL-C是NAFLD的保护因素(OR=0.069)。IL-33预测诊断NAFLD的曲线下面积为0.819,ALT为0.665,TG为0.749,HDL-C为0.720,BMI为0.776,均具有统计学意义(均P<0.01)。结论 IL-33作为NAFLD的独立危险因素,在NAFLD的发生发展中起着重要作用,并对其具有一定的诊断价值。
- 王泽兰沈天然李真凌文华
- 关键词：非酒精性脂肪性肝病白介素-33统计学
- SIRT1基因缺陷对肥胖小鼠棕色脂肪功能的影响被引量：5
- 2016年
- 目的探讨沉默信息调节因子2相关酶1（SIRTl）基因缺陷对高脂饮食诱导的肥胖小鼠棕色脂肪功能的影响。方法雄性12周龄SIRT1基因敲除杂合子小鼠和同窝的野生型对照小鼠（每组6只），分别给予高脂饮食饲养16周以构建肥胖模型。能量代谢笼测定氧耗量和产热量，冷刺激试验评估适应性产热功能。干预结束后留取棕色脂肪组织，HE染色观察形态学改变，免疫组化染色和Western印迹法检测解偶联蛋白1（UCP1）的表达水平，实时定量PCR检测线粒体DNA相对含量。结果与对照组相比，SIRTl基因敲除杂合子小鼠的氧耗量和产热量均明显降低[（2681±297）比（3017±313）ml·kg^-1·h^-1、（19．05±2．40）比（21．15±2．49）kcal·kg^-1·h^-1，均P〈0．05l，冷刺激时维持体温的能力受损。HE染色显示SIRT1杂合子小鼠棕色脂肪组织内的脂滴空泡较对照组更大，免疫组化染色及Western印迹检测结果表明其UCPl的表达水平显著降低（P〈0．05）。实时定量PCR结果显示，SIRT1杂合子小鼠棕色脂肪组织的线粒体DNA相对含量明显减少（0．38±0．10比1．00±0．40，P〈0．05）。结论SIRT1基因缺陷加剧高脂饮食诱导的肥胖小鼠的棕色脂肪功能障碍，即加重棕色脂肪白色化。
- 郑晓彬艾鹤英袁淑华曹欢易梁华翁建平徐芬
- 关键词：棕色杂合子小鼠肥胖
- 非酒精性脂肪性肝病进展中血清溶血卵磷脂水平降低被引量：1
- 2016年
- 目的研究血清溶血卵磷脂(LPC)水平在非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)进展中的变化及机制。方法雄性C57/BL6小鼠60只,分为高脂模型组(HFD)和正常对照组,分别给予高脂纯化饲料和低脂纯化饲料。高效液相色谱-蒸发光散射检测法(HPLC-ELSD)于饲养第4、8、12、16、20周分批测定两组小鼠血清中几种LPC的含量变化。Milliplex多因子检测法测定血清白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平。重组白细胞介素-6(IL-6)体外干预小鼠肝原代细胞,实时荧光定量PCR测溶血卵磷脂酰基转移酶1-4(LPCAT1-4)的基因表达。结果高脂模型组血清LPC16∶0、LPC18∶0和LPC18∶1水平从16周开始出现明显降低,第20周LPC16∶0和LPC18∶1的水平均显著低于正常对照组。高脂模型组血清IL-6水平在第16周和20周显著高于正常对照组;TNF-α水平在第16周显著高于正常对照组。此外,IL-6可诱导LPCAT1-4基因表达升高。结论在NAFLD进展中血清溶血卵磷脂(LPC)水平下降,可能与肝脏内激活的炎症信号通路有关。
- 郑苑竹沈天然李燕平陈旭凌文华
- 关键词：非酒精性脂肪性肝病溶血卵磷脂C57BL/6J小鼠白细胞介素-6肿瘤坏死因子-Α
- 视黄醇结合蛋白4调节肝脏脂质合成及其分子机制
- 2013年
- 目的探索视黄醇结合蛋白4（RBP4）在肝脏脂质异常合成中的作用及其分子机制。方法以HepG2细胞系、c57BL／6J小鼠及PGC-1β基因敲除小鼠为研究模型展开体外、体内研究。结果细胞水平的实验显示，不论是视黄醇结合的RBP4，还是无视黄醇的RBP4均可显著诱导HepG2细胞内甘油三酯的合成，说明此效应与视黄醇本身无关。RBP4干预能够促进SREBP-1前体由内质网向高尔基体的转位，经蛋白水解活化，成为具有转录活性的成熟SREBP-1形式，从而上调脂质合成相关基因的表达，例如：脂肪酸合酶（FAS）、乙酰辅酶A羧化酶1（ACC-1）以及甘油二脂O-酰基转移酶2（DAGT2）。RBP4干预能够显著提高转录辅因子PGC—113在信使RNA和蛋白水平的表达，并且PGC．113活性的提高对于RBP4所诱导的SREBP-l转录活性的增强是必不可缺的。RBP4通过磷酸化环磷酸腺苷反应元件结合蛋白（CREB）Serl33位点激活CREB，从而诱导靶基因PGC-1β转录活性的增强。在体内实验中，注射了RBP4的C57BL／6J正常小鼠肝脏SREBP-1c的表达升高，进而导致肝脏脂质合成的增加及血中TAG水平的升高，但这一现象在PGC-1β基因敲除的小鼠中并不存在。结论RBP4通过PGC-1p依赖的方式上调SREBP-1的表达、促进肝脏脂质合成，揭示了RBP4水平的调控在改善肝脏异常脂质合成与蓄积方面的巨大潜力。
- 夏敏柳雁郭红辉王端凌文华
