广东省社会发展领域科技计划项目(2006B35530001)
- 作品数：4 被引量：8H指数：2
- 相关作者：肖焕擎李书华徐波朱光辉古立诚更多>>
- 相关机构：广州市第一人民医院广州医学院广州市第十二人民医院更多>>
- 发文基金：广东省社会发展领域科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- VEGF-C短发夹RNA对人乳腺癌细胞的体内外抑制作用的实验研究被引量：1
- 2008年
- 目的:探讨靶向血管内皮生长因子-C(VEGF-C)的短发夹RNA(shRNA)质粒载体在体内外对乳腺癌细胞株MCF-7生物学活性的抑制作用。方法:倒置荧光显微镜及流式细胞术检测细胞的转染率,RT-PCR及免疫印迹法检测转染细胞内VEGF-C mRNA及蛋白的表达变化,MTT法检测细胞增殖抑制率,人工基底膜侵袭实验检测细胞侵袭能力。MCF-7裸鼠皮下尾静脉注射VEGF-C shRNA表达载体,观察其对乳腺癌生长的抑制作用。ELISA方法检测VEGF-C在肿瘤组织中的蛋白浓度,免疫组织化学分析肿瘤组织VEGFR-3阳性脉管密度。结果:VEGF-C shRNA能高效转染入MCF-7细胞中,细胞VEGF-C mRNA及蛋白表达水平显著下降,生长增殖受抑(F24 h=515.51,F48 h=859.97,F72 h=992.91,P均=0.000 1)。体外侵袭人工基底膜能力减弱(F=133.36,P=0.000 1)。全身系统性给予VEGF-C shRNA后,VEGF-C shRNA组肿瘤体积缩小(F=498.05,P=0.000 1);瘤组织VEGF-C浓度降低(t=30.75,P=0.001);免疫组化分析VEGF-C shRNA组肿瘤组织中VEGFR-3阳性脉管生成减少(F=265.49,P=0.000 1)。结论:VEGF-C在乳腺癌增殖、侵袭转移和VEGFR-3阳性脉管形成中发挥重要作用,通过RNA干扰技术实现VEGF-C沉默在乳腺癌的基因治疗中具有较好的应用前景。
- 肖焕擎徐波陈熙文朱光辉李书华
- 关键词：RNA干扰
- VEGF-C短发夹RNA抑制乳腺癌细胞增殖及侵袭能力的实验研究被引量：3
- 2008年
- 目的探讨应用靶向VEGF-C的短发夹RNA(shRNA)质粒载体在体外抑制乳腺癌细胞株MCF-7生物学活性的影响。方法制备携带有绿色荧光蛋白(GFP)报告基因的VEGF-C-shRNA质粒载体,脂质体转染方法转入乳腺癌细胞株MCF-7,通过倒置荧光显微镜及流式细胞术检测细胞的转染效率,RT-PCR及Western blot检测转染细胞内VEGF-C mRNA及蛋白的表达变化,MTT法检测细胞增殖抑制率,重组基底膜侵袭实验检测细胞侵袭能力。结果高效转染入VEGF-C-shRNA的MCF-7细胞VEGF-C mRNA及蛋白表达水平显著下降;VEGF-C ShRNA对MCF-7细胞具有明显的增殖抑制作用,其抑增殖效应呈时间依赖性;VEGF-C-shRNA可抑制乳腺癌细胞MCF-7体外侵袭重组基底膜的能力,与阴性shRNA转染组、空载体组及空白组比较,差异有统计学意义(P<0.05);结论VEGF-C在乳腺癌增殖、侵袭转移中发挥重要作用,通过RNA干扰技术实现VEGF-C沉默在乳腺癌的基因治疗中具有可行性。
- 古立诚肖焕擎徐波朱光辉李书华
- 关键词：血管内皮生长因子-C乳腺癌短发夹RNAWESTERNBLOT
- 靶向血管内皮生长因子-C的RNA干扰对裸鼠乳腺癌影响作用的实验观察被引量：3
- 2008年
- 目的检测血管内皮生长因子-C（VEGF-C）的RNA干扰技术对裸鼠乳腺癌的影响作用，探讨RNA干扰对乳腺癌基因治疗中的有效性和相关机制。方法36只NOD-SCID小鼠随机分为空载体组12只，阴性短发夹RNA（ShRNA）对照组12只及VEGF-C ShRNA转染组12只。构建携带有绿色荧光蛋白报告基因的VEGF-C ShRNA质粒载体，并导入乳腺癌细胞MCF-7裸鼠皮下移植瘤，尾静脉注射VEGF-C ShRNA表达载体，观察其对乳腺癌生长的影响作用；酶联免疫吸附剂测定（ELISA）方法检测VEGF-C在肿瘤组织中的蛋白浓度；免疫组织化学分析肿瘤组织VEGFR-3阳性脉管密度。结果全身系统性给予VEGF-C ShRNA后，空载体组、阴性ShRNA对照组及VEGF-C ShRNA转染组肿瘤体积分别为（250±4）mm^3、（230±26）mm^3（P=0．2）、（97±25）mm^3（P〈0．05）；瘤组织中VEGF-C浓度在空载体组、阴性ShRNA对照组及VEGF-C ShRNA转染组分别为（496±7）pg／mg、（362±95）pg／mg（P=0．2）和（115±55）pg／mg（P〈0．05）；免疫组化分析VEGF-C ShRNA转染组肿瘤组织中VEGFR-3阳性脉管生成减少（P〈0．05）。结论VEGF-C的RNA干扰明显抑制了VEGFR-3阳性脉管的形成，抑制肿瘤的生长，有望通过RNA干扰技术实现乳腺癌的基因治疗。
- 徐波肖焕擎蔡文松朱光辉李书华
- 关键词：乳腺癌血管内皮生长因子-C短发夹RNA
- VEGF-C反义多肽对乳腺癌裸鼠移植瘤影响的实验研究被引量：2
- 2008年
- 目的观察血管内皮生长因子C(VEGF-C)反义多肽对乳腺癌裸鼠皮下移植瘤的影响,探讨以VEGF-C反义多肽用于乳腺癌基因治疗的应用前景。方法制备靶向VEGF-C的反义多肽,构建乳腺癌细胞MCF-7裸鼠皮下移植瘤模型,瘤体内注射VEGF-C反义多肽,观察其对乳腺癌细胞的抑制作用;免疫印迹(Western Blot)检测VEGF-C在瘤组织的表达情况。结果VEGF-C反义多肽具有较强的生物学活性,瘤组织内给予VEGF-C反义多肽后,Westernblot分析VEGF-C在瘤组织中的表达降低,肿瘤生长受制,抑瘤率为52%(P<0.05)。结论制备出的VEGF-C具有良好的生物学活性,有抗乳腺癌作用。
- 余传华肖焕擎
- 关键词：血管内皮生长因子-C乳腺癌
