北京市教育委员会科技发展计划面上项目(02KJ090)
- 作品数：1 被引量：0H指数：0
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- 小鼠胎盘间充质干细胞的生物学特性
- 2007年
- 目的:胎盘中包含大量能够自我更新、具有多向分化潜能的细胞,其低免疫原性几乎不引起移植物抗宿主反应疾病。观察体外培养的小鼠胎盘来源间充质干细胞的生物学特性。方法:实验于2006-01/11在首都医科大学组织胚胎学教研室实验室(国家中医药管理局三级实验室)完成。①实验方法:孕10dICR小鼠100只,取出子宫收集胎盘实体组织,经0.1%IV型胶原酶消化获得细胞,以3×106接种于25cm2培养瓶中,加入含体积分数0.1胎牛血清、200U/mL青链霉素的高糖DMEM培养基进行体外培养。②实验评估:每天在倒置显微镜下观察细胞形态;MTT检测细胞生长状况,记录生长曲线;流式细胞术分析细胞周期;免疫细胞化学方法分析胎盘间充质干细胞的免疫表型表达。结果:①小鼠胎盘间充质干细胞的形态学特征:原代培养初期仅有少量细胞贴壁,3d后贴壁细胞逐渐增多,培养过程中细胞呈梭形,散在、集落式分布,细胞集落随着增殖而逐渐融合。②小鼠胎盘间充质干细胞的生长特性:接种3d后细胞增殖速度加快,随后保持稳定增殖速度,第9天速度大幅增长达峰值,10d后进入平台期。G0/G1期、S期、G2期的比例分别为64.4%,25.2%,10.4%。③小鼠胎盘间充质干细胞免疫表型检测:原代培养的小鼠胎盘间充质干细胞CD105、CD44、波形蛋白均呈阳性表达。结论:小鼠胎盘来源的间充质干细胞可成功在体外培养并大量扩增,生物学性状稳定,是组织工程优良的种子细胞来源之一。
- 王萍瓦龙美
- 关键词：细胞培养干细胞
