贵州省科技厅社会发展攻关项目(SY[2011]3006)
- 作品数：12 被引量：44H指数：4
- 相关作者：于燕妮邓超男陈锡山谢莹万良斌更多>>
- 相关机构：贵阳医学院贵州省人民医院更多>>
- 发文基金：贵州省科技厅社会发展攻关项目国际科技合作与交流专项项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 氟中毒大鼠骨组织细胞核转录因子-KB相关基因mRNA和蛋白表达改变被引量：2
- 2012年
- 目的探讨氟对骨组织中细胞核转录因子-KB（NF-KB）相关基因mRNA和蛋白表达的影响。方法健康SD大鼠36只，体质量100～120g，按体质量随机分为3组，每组12只。对照组饮用自来水（含氟量〈lmg／L），低氟组和高氟组分别饮用含5、50mg／L氟化钠的自来水。大鼠饲养8个月，建立慢性氟中毒模型，股动脉放血处死。取大鼠股骨干骺端，光镜观察骨组织形态学改变；采用灰化-氟离子选择电极法检测骨氟；采用酶联免疫吸附法检测血清抗酒石酸酸性磷酸酶5b（TRACP5b）水平；采用ReM-timePCR和免疫组织化学方法检测骨组织中p50、p65、IKBamRNA和蛋白表达水平。结果染氟大鼠股骨干骺端呈骨质硬化表现。低氟组、高氟组骨氟[（6．32±1．23）、（10．89±1．56）mg／kg]显著高于对照组[（3．06±1．01）mg／kg，P均〈0．05]，且高氟组显著高于低氟组（P〈0．05）。低氟组血清TRACP5b水平[（3．45±1．85）U／L]显著高于对照组[（1．26±0．23）U／L，P〈0．05]，高氟组[（2．74±1．85）U／L]较低氟组降低（P〈0．05）。低氟组p50、IKBamRNA表达水平（4．41±0．44、1．15±0．25）显著高于对照组（1．46±0．10、0．26±0．07，P均〈0．05），高氟组（0．69±0．09、0．14±0．03）较低氟组降低（P均〈0．05）。低氟组p50、IkBα蛋白表达水平（152．96±7．87、156．20±9．75）显著高于对照组（125．63土9．85、118．97±6．94，P均〈0．05），高氟组（120．56±9．57、114．50±7．61）较低氟组降低（P均〈0．05）。结论氟可致NF-KB通路相关基因表达改变，后者可能参与氟致骨骼损伤的发生机制。
- 邓超男于燕妮杨丹朱海振
- 关键词：氟化物中毒NF-ΚB破骨细胞
- 氟对大鼠成骨细胞Wnt3α、β-链蛋白mRNA和蛋白表达的影响被引量：10
- 2013年
- 目的观察氟中毒大鼠成骨细胞Wnt3α、β-链蛋白（catenin）mRNA和蛋白表达，探讨氟骨症发生与Wnt通路的关系。方法健康SD大鼠36只，体质量100—120g，按体质量将大鼠随机分为3组，每组12只。对照组大鼠饮用自来水（含氟量〈1mg／L），低氟组、高氟组大鼠分别饮用含5、50mg／L氟化钠的自来水。大鼠饲养8个月，建立慢性氟中毒模型。饲养期间检查大鼠氟斑牙发生情况，股动脉放血处死大鼠前收集大鼠24h尿样，处死后取股骨组织。采用氟离子选择电极法测定尿氟和骨氟含量；固相夹心酶联免疫吸附（ELISA）法测定血清骨碱性磷酸酶（BALP）和抗酒石酸酸性磷酸酶一5b（TRACP一5b）含量；光镜下观察骨组织的形态学变化，测量骨皮质厚度、骨小梁宽度及密度变化；原位杂交技术和免疫组化方法检测成骨细胞Wnt3α、β-cateninmRNA和蛋白表达。结果大鼠氟斑牙检出率低氟组为66．7％（8／12），高氟组为91．7％（11／12），对照组为0．O％（0／12），组间比较差异有统计学意义（x。：21．6，P〈0．05）。尿氟和骨氟组问比较差异有统计学意义（F=36．57、467．02，P均〈0．05），其中低氟组[（2．06±0．64）mg／L、（632．33±123．21）mg／kS]和高氟组[（7．69±1．96）mg／L、（1088．75±156．16）mg／kg]高于对照组[（1．26±0．17）mg／L、（305．58±91．26）mg／kg，P均〈0．05]，高氟组高于低氟组（P均〈0．05）。血清BALP和TRACP-5b组间比较差异有统计学意义（F=89．57、7．68，P均〈0．05）。其中低氟组[（31．47±5．30）U／L]和高氟组[（54．61±2．27）U／L]，血清BALP明显高于对照组[（16．24±1．57）U／L，P均〈0．05]，高氟组高于低氟组（P〈0．05）；血清TRACP-5b，低氟组[（3．45±1．85）U／L）明显高于对照组[（1．264±0．23）U／L]和高氟组[（2．744±1．8）]U／L，P均〈0．05]。光镜下，高
- 陈锡山于燕妮易韦万良斌谢莹
- 关键词：氟中毒成骨细胞WNT3AΒ-链蛋白
- Notch信号通路与地方性氟中毒骨损害
- 2012年
- 地方性氟中毒是长期摄入过量氟而引起的一种慢性全身性疾病,我国是地方性氟中毒流行最为严重的国家之一。Notch信号通路是参与调节骨重建的重要分子系统,与氟中毒引起的骨损害有着密切联系,因此进一步探讨该信号通路及其相关信号分子在地方性氟中毒骨组织中的变化规律,将为深入研究地方性氟中毒的发病机制提供重要依据,并可能为预防和早期治疗地方性氟中毒提供有效方法。
- 万雯于燕妮
- 关键词：NOTCH信号通路氟骨症地方性氟中毒
- 慢性氟中毒大鼠睾丸组织中钙调神经磷酸酶和活化T细胞核因子1的表达被引量：3
- 2013年
- 目的 探讨钙调神经磷酸酶（CaN）和活化T细胞核因子1（NFATc1）在慢性氟中毒大鼠睾丸损伤机制中的意义.方法 18只6周龄清洁级雄性SD大鼠按体重用随机数字表法分为3组（每组6只）,对照组饮用自来水（含氟量＜1 mg/L）,低氟组和高氟组分别饮用含5、50 mg/L氟化钠的自来水.饲养8个月后,观察氟斑牙发生情况,氟离子选择电极法检测尿氟含量情况;称量各组大鼠体重及睾丸质量;光镜观察各组大鼠睾丸组织形态学变化;免疫组化和原位杂交检测睾丸组织CaN和NFATc1的蛋白及mRNA表达情况.结果 大鼠氟斑牙检出只数为对照组0只,低氟组4只（4/6）,高氟组5只（5/6）,差异有统计学意义（x2=10.60,P＜0.05）.在对照、低氟组、高氟组尿氟含量依次升高,分别为（1.26 ±0.17）、（2.06±0.64）、（7.69±1.96） mg/L（F=36.57,P＜0.05）;体重分别为（629.00±16.00）、（585.17±17.27）、（560.50±16.07）g,差异有统计学意义（F=26.67,P＜0.05）;睾丸质量分别为（2.58 ±0.17）、（2.43±0.31）、（2.35 ±0.38）g,差异无统计学意义（F=0.91,P＞0.05）.与对照组比较,各染氟组大鼠各级生精小管结构出现不同程度破坏,高氟组破坏程度最大.对照组、低氟组、高氟组睾丸组织中CaN蛋白表达灰度值依次增加,分别为59.10±5.62、77.93±4.16、101.69 ±6.31 （F=74.18,P＜0.05）;NFATc1蛋白表达灰度值分别为76.11 ±4.41、93.42±3.85、120.42±9.31,随染氟增加而逐渐增加（F =92.4,P＜0.05）.CaN的mRNA表达量分别为58.76±7.70、82.01±6.88、99.47±8.33（F=42.65,P＜0.05）,NFATc1分别为59.39±4.74、90.02±5.37、121.15±7.69（F=155.47,P＜0.05）.CaN和NFATc1蛋白及mRNA表达水平呈正相关（r分别为0.899、0.908）.结论 CaN依赖的信号通路表达变化可能参与到慢性氟中毒大鼠睾丸组织的损伤机制中.
- 邓超男于燕妮谢莹赵丽娜
- 关键词：氟化物睾丸钙调神经磷酸酶活化T细胞核因子
- 慢性氟中毒对大鼠骨组织破骨细胞中基质金属蛋白酶9表达的影响被引量：3
- 2014年
- 目的观察慢性氟中毒对大鼠骨组织破骨细胞中基质金属蛋白酶9（MMP-9）蛋白、mRNA表达及骨细胞分化成熟过程的影响。方法36只健康SD大鼠，体质量100～120g，雌雄各半，按体质量采用随机数字表法分为3组（每组12只，雌雄各半）。对照组饮用自来水（含氟量〈1mg／L）：低氟组、高氟组分别饮用含5、50mg／L氟化钠的自来水。饲养8个月后，收集24h尿液，股动脉放血处死大鼠并取股骨。氟离子选择电极法检测各组大鼠尿氟、骨氟含量；酶联免疫吸附法（ELISA）检测大鼠血清抗酒石酸酸性磷酸酶5b（TRACP5b）含量；苏木精-伊红（HE）染色法观察大鼠股骨下段骨组织的病理学改变，应用图像分析系统进行形态计量学测量；免疫组织化学方法和原位杂交技术分别检测大鼠骨组织破骨细胞中MMP．9蛋白、mRNA的表达。结果大鼠尿氟、骨氟含量组间比较差异有统计学意义（F值分别为400．612、48．229，P均〈0．05）。其中低氟组、高氟组大鼠尿氟[（6．09±0．56）、（7．69±0．64）mg／L]和骨氟[（12．65±3．07）、（26．53±5．88）mg／kg]均高于对照组[（1．36±0．51）mg／L，（0．67±0．16）mg／kg，P均〈0．05]，且随染氟剂量的增加而逐渐升高（P均〈0．05）。大鼠血清TRACP5b含量组间比较差异有统计学意义（F=9．607，P〈0．05）。其中低氟组、高氟组大鼠血清TRACP5b含量[（1．86±0．13）、（1．92±0．22）U／L]均高于对照组[（1．57±0．20）U／L，P均〈0．05]。HE染色光镜下观察，染氟组大鼠表现为骨质硬化。大鼠破骨细胞中MMP-9蛋白、mRNA表达组间比较差异有统计学意义（F值分别为365．727、331．382，P均〈0．05）。其中低氟组、高氟组大鼠MMP-9蛋白（108．18±1．97、119．28±1．76）和mRNA（89．44±2．86、102．14±2．39）表达均高于对照组（97．22±2．24，78．51±1．16，P均〈0．05），�
- 贾志红于燕妮杨小蓉万雯徐文兴
- 关键词：基质金属蛋白酶9原位杂交
- NFATc1在氟中毒大鼠破骨细胞中表达意义被引量：3
- 2013年
- 目的探讨活化T细胞核因子(NFAT)在慢性氟中毒大鼠氟骨症破骨细胞中的作用。方法将36只SD大鼠按体重随机分为3组(每组12只,雌雄各半):对照组(饮水含氟<0.5 mg/L)、低氟组(5.0 mg/L)、高氟组(50.0 mg/L),实验8个月后股动脉放血处死大鼠,取大鼠股骨下端,抗酒石酸酸性磷酸酶染色(TRAP)法进行破骨细胞分化鉴定;免疫组织化学法和原位杂交检测各组大鼠股骨组织中NFATc1蛋白及其mRNA表达。结果NFATc1在破骨细胞中表达阳性,与对照组[(135.90±1.03),(110.45±1.55)]比较,低氟组大鼠破骨细胞中NFATc1蛋白及mRNA[(156.81±1.26),(132.50±1.58)]表达均升高(P<0.05),高氟组大鼠破骨细胞中NFATc1蛋白及mRNA[(135.46±1.19),(110.26±1.37)]均呈下降趋势,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论NFATc1可能是氟中毒氟骨症破骨细胞分化调节的重要环节。
- 谢莹于燕妮陈锡山万良斌
- 关键词：氟骨症破骨细胞
- 染氟大鼠骨组织转化生长因子β1与白细胞介素6 mRNA和蛋白表达水平观察被引量：1
- 2014年
- 目的 探讨转化生长因子β1 （transforming growth factor-β1,TGF-β1）、白细胞介素6（interleukin,IL-6）在慢性氟中毒大鼠骨组织表达变化的意义.方法 采用随机数字表法,按体质量将36只健康SD大鼠分为3组,每组12只,雌雄各半.对照组饮用自来水（含氟量＜1 mg/L）,低氟组和高氟组分别饮用含5、50 mg/L氟化钠的自来水.大鼠饲养6个月,建立慢性氟中毒模型,股动脉放血处死.取大鼠股骨干骺端,灰化-氟离子选择电极法检测骨氟含量;光镜观察骨组织形态学改变;酶联免疫吸附法检测血清骨碱性磷酸酶（BALP）水平;原位杂交和免疫组织化学检测骨组织中TGF-β1和IL-6 mRNA和蛋白表达水平.结果 对照组、低氟组和高氟组的骨氟含量[（306.04±12.57）、（652.91±51.83）、（1 094.11±91.41）mg/kg]依次增加（F=31.14,P＜0.05）,低氟组和高氟组大鼠股骨干骺端呈骨质硬化表现.对照组、低氟组和高氟组血清BALP水平[（27.78±4.09）、（46.59±5.75）、（57.45±3.99） U/L]、骨组织TGF-β1 mRNA表达水平（111.84±4.62、123.86±7.46、140.83±5.21）和蛋白表达水平（118.60±7.09、133.17±7.33、145.67±9.61）均依次增加（F值分别为30.29、73.28、33.65,P均＜0.05）;低氟组和高氟组骨组织IL-6的mRNA表达水平（117.78±7.01、119.90±5.10）和蛋白表达水平（122.79±6.49、123.81±7.99）均高于对照组（106.49±6.76,112.11±5.80,F值分别为15.47、10.83,P均＜.0.05）.结论 TGF-β1、IL-6在染氟大鼠骨组织上表达改变,提示氟可通过调节骨骼微环境来影响骨形成增强.
- 邓超男于燕妮张颖
- 关键词：氟中毒
- 氟致骨组织中细胞核转录因子-κB相关基因表达改变与破骨细胞凋亡的关系被引量：6
- 2012年
- 目的探讨慢性氟中毒大鼠骨骼损伤时细胞核转录因子-κB（NF-κB）相关基因表边改变与破骨细胞凋亡的关系，深入研究氟骨症的发病机制。方法健康SD大鼠36只，体质量100～120g，按体质量随机分为3组，每组12只。对照组饮用自来水（含氟量〈1mg／L），低氟组和高氟组分别饮用含5、50mg／L氟化钠的自来水。大鼠饲养8个月，建立慢性氟中毒模型，股动脉放血处死。取大鼠股骨干骺端，光镜观察骨组织形态学改变；采用酶联免疫吸附法检测血清抗酒石酸酸性磷酸酶5b（TRACP5b）水平：采用抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色鉴定破骨细胞并计数；采用Real—timePCR和免疫组织化学方法检测骨组织中p50、IKBa和凋亡相关基因Bcl-2、Bax的mRNA和蛋白表达水平。结果染氟大鼠股骨干骺端呈骨质硬化表现。低氟组血清TRACP5b水平、破骨细胞数[（3．45±1．85）U／L、（6．75±1．29）个／切片]显著高于对照组．[（1．26±0．23）U／L、（3．92±1．38）个／切片，P均〈0．05]，高氟组[（2．74±1．85）U／L、（3．33±1．07）个／切片]较低氟组降低（P均〈0．05）。低氟组p50、IκBBα、Bcl-2、BaxmRNA表达水平（4．41±0．44、1．15±0．25、2．02±0．11、1．25±0．22）显著高于对照组（1．46±0．10、0．26士0．07、1．00±0．06、0．74±0．09，P均〈0．05），高氟组（0．69±0．09、0．14±0．03、0．95±0．08、0．62±O．08）较低氟组降低（P均〈0．05）。低氟组p50、IκBα蛋白表达水平（152．96±7．87、156．20±9．75）显著高于对照组（125．63±9．85、118．97±6．94，P均〈0．05），高氟组（120．56±9．57、114．50±7．61）较低氟组降低（P均〈0．05）；低氟组Bcl-2、Bax蛋白表达水平（170．61±6．60、160．77±7．66）和Bcl-2／Bax比值（1．07±0．08）较对照组（110．73±5．27、114．64±5．83、0．96±0．04）升高（P均〈0．05�
- 邓超男于燕妮杨丹朱海振
- 关键词：氟化物中毒NF-ΚB破骨细胞细胞凋亡
- 慢性氟中毒对大鼠骨组织Dlx5蛋白及其mRNA表达的影响被引量：7
- 2012年
- 目的观察慢性氟中毒对大鼠骨组织中转录因子Dlx5蛋白和mRNA表达水平的影响,探讨Dlx5在氟骨症发病机制中的可能作用。方法本研究用36只SD大鼠按性别随机分成3组,对照组(饮自来水,含氟<0.5mg/L)、低氟组(饮含氟5.0mg/L的自来水)、高氟组(饮含氟50mg/L的自来水),6个月后用氟离子选择电极法测定大鼠尿氟及骨氟含量,HE染色观察骨组织病理学改变,并采用原位杂交技术、免疫组织化学方法,对大鼠骨组织进行Dlx5蛋白及mRNA水平的定量分析。结果 HE染色显示染氟大鼠骨组织骨小梁增宽、骨皮质增厚等骨硬化表现;染氟大鼠骨组织Dlx5蛋白及mRNA表达水平显著高于对照组,差异有统计学意义(F低-蛋白=28.381,F高-蛋白=343.515,F低-mRNA=27.767,F高-mRNA=353.987,P均<0.05)。结论过量的氟可上调Dlx5蛋白及mRNA水平的表达,促进成骨细胞的增殖与分化,从而出现骨质硬化。
- 万良斌于燕妮万昌武谢莹陈锡山
- 关键词：氟中毒原位杂交技术免疫组化技术
- 刺猬蛋白信号通路在氟对骨骼损伤中的作用被引量：3
- 2014年
- 生理剂量的氟对全身骨骼生长发育和维持骨骼生理结构功能具有重要作用。地方性氟中毒（地氟病）是在特定的地理环境中发生的一种生物地球化学性疾病。它是指在自然条件下，人们长期生活在高氟环境中，通过饮水、空气或食物等介质，摄入过量的氟而导致的全身慢性蓄积性中毒。地氟病在我国分布较广，主要损伤牙齿和骨骼，轻者形成氟斑牙影响牙齿美观、引起氟骨症导致关节功能障碍，严重者丧失劳动能力乃至瘫痪。其发病机制仍不清楚，并且尚无特效疗法，尽快了解地氟病的发生机制以及研发治疗该病的药物，具有重大的科学意义和实用价值。
- 邓超男于燕妮
- 关键词：骨骼损伤地氟病信号通路骨骼生长发育地方性氟中毒关节功能障碍
