宁夏回族自治区自然科学基金(NZ11164)
- 作品数:2 被引量:2H指数:1
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- 兔软骨细胞复合小肠黏膜下层体外培养的实验研究
- 2013年
- 目的探讨脱细胞小肠黏膜下层(SIS)作为软骨组织工程支架的可行性。方法将培养扩增的兔第三代软骨细胞接种于SIS上,接种后制成细胞支架复合体在体外培养48~72 h通过石蜡组织切片HE染色、透射电镜观察,Ⅱ型胶原蛋白免疫组化等方法,观察软骨细胞在SIS支架上的黏附扩增及生长。结果兔软骨细胞在SIS支架上生长良好,在支架材料中可以观察到多层细胞形成的复合结构,在细胞与SIS支架之间有许多细胞外基质,通过免疫组织化学染色,在其中有Ⅱ型胶原出现连续性阳性表达。通过透射电镜可观察到细胞之间连接紧密,细胞与细胞之间桥粒连接,软骨细胞内有张力微丝,同时软骨细胞与支架材料间有基底膜形成。结论在兔软骨细胞体外培养中,SIS是良好的细胞黏附支架,可以作为组织工程化软骨的支架材料。
- 杨晓宇马涛温鹏王庆锋王真
- 关键词:软骨细胞
- 胶原酶消化分离兔关节软骨细胞及体外聚集培养的观察被引量:2
- 2014年
- 目的通过观察采用单一胶原酶消化分离、体外聚集培养获得的兔关节软骨细胞的生物学性状,证实这种获得方法的可靠性。方法取活体成年兔关节软骨,体外采用Ⅱ型胶原酶一次性消化,高密度聚集培养后用倒置显微镜观察细胞形态及生长情况,常规染色及Ⅱ型胶原免疫组化染色法观察软骨细胞表型变化。结果 (1)收集细胞总量为(1.2~2.6)×105个·g-1。台盼兰检测细胞活性率平均为96.7%。(2)前三代细胞生长迅速,形态呈短梭形、三角形、多边形等,融合时呈卵圆形。(3)经过聚集扩增培养后Mallory及甲苯胺兰异染反应均为阳性,Ⅱ型胶原免疫组化结果为阳性。结论单一胶原酶消化分离、体外聚集培养这一方法可以获取大量优良的软骨细胞。
- 马涛杨晓宇温鹏万钧罗小军
- 关键词:软骨细胞胶原酶关节软骨