国家自然科学基金(30672434)
- 作品数:2 被引量:5H指数:2
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- 短发夹RNA干扰表达质粒逆转人乳腺癌细胞MCF-7/ADR多药耐药的研究被引量:3
- 2008年
- 目的构建靶向多药耐药基因(MDR-1)的短发夹RNA(short hairpin loop RNA shRNA)干扰表达质粒,并探讨其逆转人乳腺癌细胞MCF-7/ADR多药耐药的作用效果。方法根据MDR-1基因表达序列设计有效的RNA干扰片断,构建并获得MDR-1基因特异的shRNA质粒表达载体pRNAT-U6.1/Neo-mdr1,采用lipofectin2000分别转染人乳腺癌耐药细胞MCF-7/ADR,利用G418筛选稳定表达的细胞克隆。利用RT-PCR检测MDR-1-RNA的表达,WesternBlotting检测MDR-1蛋白质的表达,MTT法检测耐药逆转效果,罗丹明123外排实验检测p-gp的转运功能。结果成功构建表达siRNA的质粒载体pRNAT-U6.1/Neo-mdr1,转染人乳腺癌耐药细胞MCF-7/ADR后48 h及G418筛选后1、2月,mdr1-RNA及蛋白质表达均呈明显下降,p-gp的转运功能明显提高,对阿霉素的敏感性增强,与耐药细胞及转入空白载体的细胞比较,差异有统计学意义(P均<0.05)。筛选后1、2月与转入48 h比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论shRNA干扰表达质粒pRNAT-U6.1/Neo-mdr1能够稳定、持久的抑制MDR-1基因,逆转乳腺癌细胞MCF-7/ADR对阿霉素的耐药性。
- 魏军民侯明李丽珍孔峰卞继峰
- 关键词:MDR-1MCF-7/ADR
- Hedgehog信号通路与乳腺癌干细胞被引量:2
- 2013年
- Hedgehog(HH)信号通路是经典的控制胚胎发育的信号传导途径,最近研究发现,该通路在肿瘤的发生和发展过程中发挥重要作用。HH信号对乳腺癌干细胞(BCSC)的干细胞特性的维持,及乳腺癌的复发、转移、耐药有密切的关系,有望成为针对BCSC治疗的新靶点。
- 孙莹魏军民王秀问
- 关键词:信号传导乳腺肿瘤肿瘤干细胞HEDGEHOG