国家自然科学基金(81060199)
- 作品数：5 被引量：13H指数：1
- 相关作者：秦雪李山隋靖喆刘银坤翟励敏更多>>
- 相关机构：广西医科大学第一附属医院复旦大学哈尔滨医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广西壮族自治区自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- SELDI-TOF-MS蛋白芯片技术在原发性肝癌诊断中的应用研究被引量：1
- 2011年
- 目的:筛选AFP阴性原发性肝癌(肝癌)患者与健康人血清中的差异蛋白,构建能与血清AFP联合使用的疾病诊断模型。方法:应用表面增强激光解析—电离飞行时间—质谱(SELDI-TOF-MS)技术和CM10芯片检测33例AFP阴性肝癌患者与35例健康人的血清,获得差异蛋白峰并建立疾病诊断模型。结果:32个蛋白峰差异具有统计学意义(P<0.05),在AFP阴性肝癌组血清中有6个上调,26个下调;诊断模型的准确度为80.9%,灵敏度为81.8%,特异度为80.0%。结论:应用SELDI-TOF-MS蛋白芯片技术建立的疾病诊断模型有望与血清AFP联合使用从而提高肝癌的诊断效率。
- 徐明辉李若林何亚妮邓燕秦雪
- 关键词：原发性肝癌甲胎蛋白蛋白质芯片
- 膜联蛋白A4对肝癌细胞株MHCC97H黏附能力及黏附相关基因表达的影响被引量：1
- 2013年
- 目的探讨人膜联蛋白A4(AnnexinA4,ANXA4)对肝癌细胞株MHCC97H黏附能力的影响及其相关机制。方法化学合成针对ANXA4序列特异性小干扰RNA,用脂质体LipofectamineTM2000转染人肝癌细胞株MHCC97H;RT-PCR和western blot检测RNA干扰后ANXA4 mRNA和蛋白质的表达水平;黏附实验检测ANXA4表达下降对细胞黏附能力的影响;荧光定量RT-PCR检测RNA干扰后黏附相关基因表达的变化。结果荧光定量RT-PCR及western blot结果表明,经siRNA干扰后,ANXA4 mRNA和蛋白质表达水平明显降低;细胞黏附实验结果显示,与空白对照组的0.293±0.019和Mock组的0.305±0.018相比,实验组为0.234±0.013,差异有统计学意义(P<0.05)。荧光定量RT-PCR结果显示,与阴性对照组相比,实验组ITGA5、ITGB1、E-cadherin mRNA表达水平下调,ICAM1、CD44、OPN mRNA表达水平上调,差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论 ANXA4可能通过调节黏附相关基因的表达水平影响细胞的黏附能力,参与肝癌的发生和发展进程。
- 李泰阶郭坤李山秦雪刘银坤
- 关键词：肝细胞癌RNA干扰
- 肝细胞生长因子(HGF)诱导肝癌Huh7细胞发生上皮间质转化(EMT)后细胞膜表面糖蛋白糖谱的变化被引量：11
- 2014年
- 目的应用凝集素芯片技术寻找肝癌细胞表面转移相关的特征性糖谱。方法应用肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)诱导建立肝癌上皮间质转化(epithelial mesenchymal transition,EMT)细胞模型。通过凝集素芯片比较诱导前后细胞膜的糖谱改变,采用凝集素印迹和荧光细胞凝集素免疫组化方法验证芯片结果。结果诱导后细胞对凝集素ACL、BPL、JAC、MPL、PHA-E、SBA和SNA的亲和作用减弱,而对凝集素AAL、ConA、DBA、GSLⅡ、ECL、HAL、LCA、LTL、NML、NPL、PHA-L、PTLⅡ和WFL的亲和作用增强。提示诱导后肝癌细胞表面出现了黏蛋白T/Tn抗原、平分型N-乙酰葡萄糖胺、α2,6唾液酸和末端α或β连接的N-乙酰半乳糖胺结构减少;而末端和核心岩藻糖、高甘露糖、N-乙酰葡萄糖胺β1,6分支和复杂型寡糖分支结构增多。结论肝癌细胞发生EMT过程中细胞膜表面糖链结构改变,提示糖链结构与肝癌的转移密切相关,为有效控制肝癌转移、改善预后提供了新思路。
- 莫翠菊秦雪康晓楠彭契六江凯卢宇隋靖喆翟励敏刘银坤李山
- 慢病毒介导的TSPY1对肝癌SMMC7721和Huh7细胞系增殖的影响
- 2014年
- 目的观察转染睾丸特异性蛋白1(TSPY1)慢病毒表达载体对肝癌细胞SMMC7721和Huh7细胞系增殖能力的影响。方法构建特异性的TSPY1慢病毒过表达载体稳定转染至SMMC7721和Huh7肝癌细胞系,采用荧光定量PCR和蛋白印迹技术检测TSPY1 mRNA和蛋白的表达情况,Cell Counting Kit-8(CCK-8)实验检测转染后细胞的增殖情况。结果在转染过表达TSPY1慢病毒的SMMC7721和Huh7细胞中,TSPY1 mRNA和蛋白的表达均明显上调(P<0.01)。CCK-8细胞增殖实验发现,过表达TSPY1组SMMC7721和Huh7细胞的增殖能力比对照组增强。结论 TSPY1慢病毒表达载体可明显上调TSPY1 mRNA和蛋白表达,并能够促进肝癌SMMC7721和Huh7细胞的增殖。
- 翟励敏莫翠菊隋靖喆秦雪李山
- 关键词：肝癌慢病毒
- 腺病毒过表达及siRNA干扰人肝癌HepG2细胞对11β-羟基类固醇脱氢酶I表达的影响
- 2014年
- 目的观察腺病毒(Ad-11β-HSD1)过表达系统及特异性siRNA(siRNA-11β-HSD1)干扰人肝癌HepG2细胞对11β-羟基类固醇脱氢酶I(11β-HSD1)表达的影响。方法应用Ad-11β-HSD1以及siRNA-11β-HSD1转染人肝癌HepG2细胞,用实时荧光定量PCR及Western Blot检测11β-HSD1表达。结果转染72 h后,对照组及腺病毒过表达组细胞中均可见明显GFP荧光,且转染48 h后蛋白水平明显升高;siRNA干扰48 h后,mRNA及蛋白水平均明显降低。结论腺病毒转染可有效过表达11β-HSD1,而siRNA干扰可有效抑制11β-HSD1表达。
- 隋靖喆李国平李山
- 关键词：HEPG2腺病毒SIRNA干扰
