国家自然科学基金(31071498)
- 作品数：8 被引量：53H指数：4
- 相关作者：汪少芸饶平凡赵珺吴金鸿李晓坤更多>>
- 相关机构：福州大学上海交通大学中国农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金教育部“新世纪优秀人才支持计划”福建省高等学校新世纪优秀人才支持计划更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程生物学化学工程更多>>
- 抗冻蛋白的研究进展及其在食品工业中的应用被引量：22
- 2011年
- 抗冻蛋白是一类具有热滞效应、冰晶形态效应和重结晶抑制效应的蛋白质,因其特殊的结构和功能,抗冻蛋白引起了研究人员的极大兴趣.探讨了近年来抗冻蛋白的研究进展,介绍了目前已知的抗冻蛋白的来源、特性、测定方法、基因结构及在食品工业中的应用.抗冻蛋白对冷冻食品有显著的品质改良功能,是未来冷冻食品工业中极具潜力的抗冻添加剂.
- 汪少芸赵珺吴金鸿陈琳
- 关键词：抗冻蛋白热滞活性食品添加剂
- 天然抗冻多肽的制备、分离及细菌低温保护活性研究被引量：7
- 2013年
- 利用热水抽提法提取鲨鱼皮明胶,控制酶法水解条件制备天然抗冻多肽.以细菌低温保护活性为指标,筛选蛋白水解酶种类及酶解时间,利用Sephadex G-50凝胶过滤色谱、SP-Sephadex C-25强阳离子交换色谱等分离手段进行分离,得到细菌低温保护高活性组分.结果表明,酶解鲨鱼皮明胶得到高活性抗冻多肽的最适蛋白水解酶为酸性蛋白酶,酶解温度50℃、pH 3.0、酶/底物3 000 U·g-1、底物浓度3%、酶解时间1 h;经过Sephadex G-50凝胶过滤色谱、SP-Sephadex C-25强阳离子交换色谱等分离手段得到阳离子的P2组分,经过细菌低温保护测试,当浓度为500μg·mL-1时,大肠杆菌的存活率达到80.8%.分离得到的抗冻多肽具有较高的抗冻活性,可望应用于食品、医药等产业中.
- 赵珺汪少芸李晓坤
- 黑豆种子中一种耐热型胰蛋白酶抑制剂的分离及性质表征被引量：4
- 2011年
- 应用硫酸铵分级沉降、弱阳交换色谱CM-Sephadex C-50、凝胶过滤色谱Sephacryl S-200HR、强阳离子高效液相色谱POROS HS-20,从黑豆种子中分离纯化一种耐热型蛋白酶抑制剂,命名为TSTI.该蛋白的N末端序列为DEYSKPCCDLCMCTRRCPPQ,与豆科植物Bowman-Birk型胰蛋白酶抑制剂具有高度同源性,推测其属于Bowman-Birk型胰蛋白酶抑制剂.SDS-PAGE和IEF测出TSTI分子量和等电点分别为23.9 kD和6.2.TSTI对胰蛋白酶有很强的抑制作用,当二者摩尔比达到1时,胰蛋白酶活力被完全抑制.此外,该蛋白酶抑制剂具有很强的热稳定性和pH稳定性,在高达100℃温度及pH2-12范围内处理,其活性均不会受到太大影响.TSTI对植物致病菌苹果轮纹病菌、瓜果腐霉病菌、白菜黑斑病菌、甜瓜枯萎病菌和葡萄灰霉病菌具有抑制作用.
- 邵彪汪少芸饶平凡
- 关键词：黑豆胰蛋白酶抑制剂耐热型分离纯化
- 从大白芸豆种子中分离与表征一种新型凝集素WKBL被引量：3
- 2012年
- 从大白芸豆种子中,经过缓冲液抽提、硫酸铵沉降、蓝胶亲和色谱(AF-Blue HC-650M)、离子交换色谱(CM-Sephadex C-25)、凝胶过滤色谱(Sephadex G-50)等步骤,分离纯化了一种具有一定抗真菌活性和抗肿瘤活性的凝集素,命名为WKBL.经SDS-PAGE显示,WKBL分子量为25 kD,N端序列为DAVLYRGPGDLHTGS,过碘酸-雪夫染色(PAS)呈红色.凝血活性实验显示,WKBL凝血效果明显,但只有在60℃以下才具有凝血活性,而pH对其活性影响并不大.D-半乳糖、D-果糖、D-葡萄糖、甘露醇能抑制WKBL的活性.WKBL为金属依赖型凝集素,LiCl、SnCl2和K2Cr2O7能抑制WKBL活性,但CaCl2、BaCl2、ZnCl2、CuCl2、FeCl3和MgCl2对WKBL活性却无影响.WKBL对白血病细胞K562的生长显示出较强的抑制作用,其IC50为15μmol/L,对HeLa细胞呈现抑制作用,对HepG2细胞的抑制作用不明显.抑菌实验显示,WKBL对瓜果腐霉病菌(Pythiumaphanidermatum)、苹果轮纹病菌(Physalospora piricola)、甜瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporum f.sp.nelonis)和葡萄灰霉病菌(Botrytis cinerea)呈现出一定的抑制,但是其抑制率对浓度的依赖性并不高.
- 王军洪永祥蔡茜茜李巧玲汪少芸饶平凡
- 关键词：凝集素分离纯化凝血抗真菌
- 食品源抗冻多肽的制备及冰晶抑制作用研究被引量：9
- 2013年
- 目的:因抗冻蛋白具有控制冰晶生长,减少细胞损伤及保持产品原有组织结构、质地和品质的特点和突出意义而成为研究的热点。方法:以食品源的食用明胶为原材料,通过控制木瓜蛋白酶的切割条件,将活性多肽切割为具有特定的肽链长度和结构组成,从而使抗冻活性得以高效实现。结果:酶切多肽抗冻活性的实现受酶/底物比、酶解时间、酶解温度等条件的影响。优化的酶解条件为:pH7.0,酶/底物配比1∶10;酶解时间30min;酶解温度37℃。通过Sephadex G-50和Sephadex C-25色谱分离以及MALDI-TOF质谱鉴定,分子质量在700～1318u的亲水多肽表现显著的抗冻活性。结论:多肽酶解液在经cold-heat-stage循环后冰晶的生长和抗冻活性表现出特定的规律。控制优化酶解条件是实现多肽抗冻活性的关键所在。抗冻多肽与冰结构分子的作用机制服从表面亲水-互补作用模式。
- 洪晶汪少芸吴金鸿饶平凡
- 关键词：酶解明胶
- 鲨鱼皮明胶多肽的纯化与生物活性研究被引量：3
- 2013年
- 目的:利用酸性蛋白酶水解鲨鱼皮明胶,制备活性多肽,并对其生物活性进行表征。方法:应用超滤、SP-Sephadex C-25强阳离子交换色谱、Sephadex G-50凝胶过滤色谱和C18高效液相色谱分离酶解产物,测定其抗氧化活性和细菌低温保护活性。结论:从鲨鱼皮明胶酶解产物中分离得到3个抗氧化多肽,分别命名为B-Ⅲa、B-Ⅲc和B-Ⅲd。它们清除DPPH自由基的IC50分别为63.56、98.70和100.27g/mL,清除ABTS自由基的IC50分别为82.34、90.97和84.58g/mL,而它们抑制脂质过氧化反应的活性相对弱些。细菌低温保护试验结果表明,3种多肽均能提高大肠杆菌在冷冻状态下的存活率,其中B-Ⅲc和B-Ⅲd的作用效果最强,大肠杆菌存活率能达到81.88%和87.50%。
- 江勇汪少芸赵珺饶平凡
- 关键词：明胶多肽抗氧化
- 猪皮明胶抗冻多肽的制备及其低温保护活性研究被引量：4
- 2013年
- 以食品源猪皮明胶为原料,用碱性蛋白酶水解,制备抗冻多肽,并对影响碱性蛋白酶水解的各个因素进行研究.以水解制备的多肽对过氧化氢酶的低温保护活性为指标,在单因素实验的基础上,通过正交实验确定碱性蛋白酶水解猪皮明胶的最适pH为9.0,最适温度是37℃,酶和底物比例为1∶50,酶解时间3 h.在此条件下制备的抗冻多肽对过氧化氢酶的低温保护活性为88.2%.与牛血清蛋白和商业抗冻剂(4%蔗糖+4%山梨醇)比较,抗冻多肽表现出更优越的抗冻活性,且其抗冻活性和浓度成正相关关系.
- 李晓坤洪燕婷王文龙汪少芸
- 关键词：碱性蛋白酶
- 食源性明胶多肽的制备、分离及其抗冻活性被引量：19
- 2013年
- 用碱性蛋白酶水解食源性明胶以制备抗冻多肽,通过控制酶解条件获得具有抗冻活性的明胶多肽酶解液,并对其进行色谱分离、质谱鉴定及氨基酸全序列测定。结果表明:当酶与底物比1:15、酶解时间30min、酶解温度45℃时,所获得的明胶多肽酶解液的抗冻活性最高;酶解制备的明胶多肽液经过冷-热循环(cold-heat-stage)后抑制冰晶生长和抗冻活性表现出特定的规律,说明酶解条件的控制优化是实现明胶多肽液抗冻活性的关键。通过Sephadex G-50、SP Sephadex C-25、C18-RPLC色谱分离和MALDI-TOF质谱鉴定,确定分子质量为2107D的特异性多肽表现出显著的抗冻活性。通过Edman降解法测得其氨基酸全序列为GERGFPGERGSPGAQGLQGPR。
- 汪少芸赵立娜周焱富饶平凡
- 关键词：水解明胶
