首都医学发展科研基金(2007-2040) 作品数:15 被引量:58 H指数:3 相关作者: 于力 王莉莉 李红华 高春记 高丽 更多>> 相关机构: 中国人民解放军总医院 中国人民解放军总医院第一附属医院 南开大学 更多>> 发文基金: 首都医学发展科研基金 国家自然科学基金 国家重点基础研究发展计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
ID4、ZO—1基因甲基化定量检测在急性白血病诊断中的意义 被引量:1 2012年 目的探讨ID4、ZO-1基因甲基化定量检测作为基因标志在急性白血病(acute leukemia,AL)中的意义。方法采用硫化测序PCR(bisulfite sequencing PCR,BSP)法及甲基化特异性PCR(methylightion specific PCR,MSP)法检测AL中NB4细胞和健康供者骨髓(normal bone marrow,NBM)细胞的ID4、ZO-1基因的甲基化状况并进行分析。结果BSP法检测ID4基因在ALNB4细胞中甲基化阳性率为86.0%,显著高于NBM细胞甲基化阳性率(4.8%),差异有统计学意义(P〈0.05);ZO-1基因在ALNB4细胞系中甲基化阳性率为88.4%,显著高于NBM细胞甲基化阳性率(1.9%),差异有统计学意义(PP〈0.05)。采用MsP法检测9种AL细胞系,ID4、ZO-1基因甲基化水平在淋系来源的细胞系高于髓系来源的细胞系。结论ID4、ZO-1基因甲基化水平检测可作为新的AL基因标志物。 康慧媛 王新荣 高丽 李绵洋 王成彬 于力关键词:甲基化 急性白血病 ID4 ZO-1 甲基化特异性PCR CD4^+ T淋巴细胞功能研究新进展 被引量:34 2010年 细胞免疫是人体免疫系统的重要组成部分,在清除癌变组织和病原菌入侵中发挥重大作用。T细胞在细胞免疫中居中心地位。长期以来,T细胞免疫的研究重点主要集中于CD8+细胞毒T细胞,而关于CD4+T细胞功能的研究多限于CD8+细胞毒T细胞的"辅助"功能,或作为调节细胞抑制免疫反应的研究上,而其杀伤和清除肿瘤细胞的作用似乎被忽视。新近的研究表明,特异性CD8+细胞毒T细胞效应在动物实验或临床研究上均未见理想的效果,CD4+T细胞不是功能单一的一类细胞,而是功能复杂的细胞群。CD4+T细胞的功能不仅限于辅助细胞毒T细胞,而且可以协助NK细胞清除和杀灭肿瘤,甚至还具有不依赖于CD8+CTL的肿瘤杀伤作用。CD4+T细胞在机体抗肿瘤免疫中具有重大意义。本文就CD4+T细胞的分类,分化;CD4+T细胞的功能和分泌的细胞因子;CD4+T细胞与肿瘤免疫;CD4+T细胞的肿瘤免疫调节作用及CD4+T细胞的临床研究进行了综述。 孙君重 肖文华 于力关键词:细胞免疫 CD4+T淋巴细胞 免疫功能 恶性血液病患者侵袭性曲霉菌感染的临床特征及治疗分析 被引量:3 2011年 本研究旨在分析恶性血液病化疗或造血干细胞移植(hematopoietic stem cell transplantation,HSCT)患者合并侵袭性曲霉菌感染(invasive aspergillosis,IA)的临床特征及不同抗霉菌治疗的效果和安全性。通过回顾性分析恶性血液病化疗或HSCT病例,根据IA的诊断标准进行评估,分析其临床特征、诊断依据,并按接受的不同治疗分组评价抗霉菌治疗效果及安全性,并分析影响疗效的因素。结果表明,回顾性诊断IA 30例,其中确诊2例,临床诊断19例,拟诊9例。HSCT后IA 19例,主要发生在晚期(>40天)。伏立康唑单药治疗8例,卡泊芬净单药治疗6例,两药联合7例,有效率及开始治疗到有效的时间(time interval from treatment to successful response,TTR)分别为87.5%、50%、85.7%和38、20、36天。联合用药有效率好于单药(p<0.05),TTR差异无显著性(p>0.05)。影响疗效的因素有年龄、HSCT、GVHD和CMV及既往侵袭性真菌感染(invasive fungal infection,IFI)病史等(p<0.05)。各药物均引起不同程度的肝肾损伤,但不同药物之间、联合用药与单药之间对肝肾的损伤程度无显著性差异(p>0.05)。结论:IA仍然是恶性血液病化疗或HSCT患者严重的并发症,抗霉菌治疗联合用药疗效可能好于单药,且不增加肝肾副作用,安全性好;年龄、HSCT、既往IFI病史等可影响疗效。 李艳 高丽 王莉莉 王全顺 李红华 于力关键词:侵袭性曲霉菌感染 恶性血液病 伏立康唑 卡泊芬净 多重PCR快速检测弥漫性大B细胞淋巴瘤患者骨髓BCL2/IGH与BCL6/IGH融合基因的临床意义 被引量:2 2012年 弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)是最常见的侵袭性非霍奇金淋巴瘤,其临床表现、分子生物学特点都有显著的异质性。本研究旨在探讨多重PCR技术在DLBCL患者骨髓BCL2/IGH及BCL6/IGH等融合基因检测中的临床意义。利用多重巢式PCR技术对80例初治DLBCL患者的骨髓标本进行BCL2/IGH及BCL6/IGH融合基因检测。结果表明,80例患者骨髓标本中携带目的融合基因共12例,阳性率为15%;其中BCL2-IGH阳性患者为6例,BCL6-IGH阳性患者为6例。DLBCL患者携带不同的融合基因具有不同的临床特点。结论:运用多重PCR方法对DLBCL患者进行分子生物学检测具有快速、准确的优点。但需进一步深入研究改善方法,使之对融合基因能做定量或半定量分析,这对于DLBCL患者的诊断、协助分期、预后评估、微小残留病变的估测,指导临床治疗DLBCL有重要意义。 郭玥潞 董丽丽 高丽 徐媛媛 丁一 王莉莉 靖彧 薄剑 周敏航 曹婷婷 于力关键词:弥漫性大B细胞淋巴瘤 多重PCR BCL2 BCL6 Notch信号传导在淋巴细胞发育中的作用 被引量:1 2010年 Notch信号旁路在调节造血系统的发育选择、分化和功能方面起着关键性的作用,尤其在胚胎发育时期,其调节造血干细胞的产生并影响造血祖细胞的发育。本文就Notch信号对于T细胞系的定性和早期胸腺细胞的发育的作用作一综述。 杜宏 于力关键词:信号传导 T淋巴细胞 单倍体相合外周血造血干细胞移植治疗恶性血液病 被引量:4 2009年 为了探讨单倍体相合外周血造血干细胞移植(hi-PBSCT)治疗恶性血液病的疗效和相关并发症,对15例高危患者进行体外不去除T细胞的hi-PBSCT。预处理采用改良的Bu/Cy或TBI/Cy方案,用抗胸腺细胞球蛋白(ATG)、环孢素A(CsA)、霉酚酸酯(MMF)和短程甲氨蝶呤(MTX)预防移植物抗宿主病(GVHD),4例加用抗CD25单克隆抗体。回输G-CSF动员的外周血干细胞,输注MNC中位数为8.16(3.92-10.86)×108/kg,CD34+细胞中位数为4.51(1.27-5.95)×106/kg。结果显示:所有患者均植入成功,ANC≥0.5×109/L的中位时间为14(11-19)天,Plt≥20×109/L的中位时间为22(11-52)天。Ⅰ-Ⅱ度急性GVHD6例,慢性GVHD2例。移植后100天内均出现感染,病原学确诊为细菌感染8例,CMV感染6例。5例患者出现复发。中位随访213(42-589)天,死亡8例,存活7例。结论:hi-PBSCT治疗无HLA相合供者的恶性血液病患者是可行而且有效的,进一步降低移植相关并发症是主要问题。 肖娟 高春记 李红华 赵瑜 薄剑 靖彧 王书红 朱海燕 金香淑 于力关键词:单倍体相合造血干细胞移植 移植物抗宿主病 恶性血液病 miR-196a靶向调控HOXA9基因的实验研究 被引量:2 2011年 目的:研究HOXA9基因的表观遗传学调控机制,筛选靶向调控HOXA9基因的microRNA。方法:利用Tar-getscan在线分析软件预测特异性靶向HOXA9基因3'端非编码区域(3’UTR)的microRNA,采用PCR方法从1例健康供者DNA中扩增HOXA9基因3’UTR序列,插入经XbaI和PstI双酶切的荧光素酶报告载体pGL3-M,采用脂质体SuperFect包裹荧光素酶重组质粒及microRNA表达质粒转染293T细胞,应用双荧光素酶检测试剂盒测定荧光素酶活性。构建miR-196a结合位点突变的HOXA9基因3’端非编码区域突变型荧光素酶报告载体,采用脂质体SuperFect包裹荧光素酶突变型重组质粒及miR-196a表达质粒转染293T细胞,应用双荧光素酶检测试剂盒测定荧光素酶活性。miR-196amimics以脂质体Hiperfect转染至MV4-11细胞,实时定量PCR及Westernblot检测HOXA9mRNA及蛋白的表达。结果:成功构建了含有1628bp的HOXA9基因3’UTR序列的荧光素酶报告重组质粒pGL3-HOXA9-3’UTR,并通过酶切及基因测序方法的鉴定;荧光素酶报告实验提示miR-196a组荧光素酶活性明显低于对照组。成功构建了miR-196a的2个结合位点突变的HOXA9基因3’UTR序列的突变型荧光素酶报告重组质粒pGL3-HOXA9-mut3’UTR,并通过基因测序方法的鉴定。miR-196a可以下调野生型质粒的荧光素酶活性,不影响突变型质粒的荧光素酶活性。MV4-11细胞中过表达miR-196a,可以明显下调HOXA9mRNA及蛋白表达。结论:miR-196a通过靶向结合HOXA9基因3’UTR的结合位点特异调控HOXA9基因。 窦立萍 李永辉 王莉莉 于力关键词:MICRORNA 白血病 8p11骨髓增殖综合征的临床病理学特征 被引量:3 2010年 本研究旨在提高对罕见的8p11骨髓增殖综合征(eight p11myeloproliferative syndrome,EMS)的临床病理特征、诊断与治疗的认识。应用骨髓细胞涂片、骨髓活检观察细胞形态学改变,流式细胞术检测骨髓细胞的免疫表型,细胞遗传学方法分析骨髓细胞核型,分子生物学检测bcr/abl融合基因。结果表明:EMS是一组具有独特临床和生物学特点的疾病,以bcr/abl阴性的骨髓增殖性肿瘤合并淋巴母细胞淋巴瘤(lymphoblastic lymphoma,LBL)为主要特征。骨髓细胞形态学提示粒系细胞高度增生、嗜酸粒细胞增多;免疫表型分析显示髓系抗原表达增高;细胞遗传学分析表明存在8p11易位;RT-PCR检测bcr/abl融合基因呈阴性。在分子学水平,患者染色体异常均累及8p11上的成纤维细胞生长因子受体-1(FGFR1),目前共发现11种与FGFR1重排相关的伙伴基因,其中最常见的是位于13q11-12上的ZNF-198。EMS预后不良,患者常在短期内进展为急性髓系白血病,常规化疗效果差,除异基因造血干细胞移植外无有效的治疗方法。结论:EMS是伴有FGFR1重排的骨髓和淋巴肿瘤,易误诊为T-LBL、不典型慢性粒细胞白血病(aCML)及慢性粒-单核细胞白血病(CMML),对该病应及时进行细胞遗传学及分子生物学检测,以避免误诊、误治。 闫真 杨波 王全顺 王莉莉 韩晓苹 任芳 于力关键词:淋巴瘤 FGFR1 临床病理学 异基因造血干细胞移植后供者淋巴细胞输注的优化策略 2009年 异基因造血干细胞移植(allo—HSCT)是可治愈多种血液系统恶性疾病的有效手段,而移植后疾病的复发一直是限制移植治疗效果的重要原因。供者淋巴细胞输注(DLI)作为一种过继性细胞免疫治疗,可以通过移植物抗白血病(GVL)或移植物抗肿瘤(GVT)效应预防和治疗恶性疾病的复发,近年来得到了快速的发展和广泛的应用。而传统的DLI后GVHD的发生率高达50%~60%,严重影响了DLI的临床应用。我们就增进DLI的GVL效应及减轻GVHD的优化策略进行综述。 王立新 于力关键词:供者淋巴细胞输注 移植后 血液系统恶性疾病 过继性细胞免疫治疗 移植物抗白血病 动员外周血造血干细胞移植物中同时高效去除T/B细胞的体外研究 被引量:2 2008年 单倍体相合造血干细胞移植时,去除移植物中的T细胞和B细胞可减少移植物抗宿主病和EBV相关的淋巴细胞增殖性疾病的发生。本研究在国内首次应用CliniMACS系统,通过CD3/CD19磁珠抗体同时有效地去除动员外周血造血干细胞中的T细胞和B细胞。用流式细胞术检测移植物中T细胞和B细胞的去除效率,以集落形成实验评价去除后的干细胞功能。结果表明:T细胞和B细胞去除之前单个核细胞总数为4.88×1010,去除之后移植物中T细胞比例为0.02%,去除4.4Log;B细胞比例不到0.01%,至少去除3.3Log。移植物中除CD34+细胞外,还包括NK细胞,单核细胞和粒细胞。CD34+细胞纯度为0.98%,计数1.84×108,回收率为69.7%;NK细胞计数2.54×109,回收率为71.7%。集落形成实验显示CD3/CD19去除对造血干细胞功能无影响。结论:应用CliniMACS系统可有效地同时去除动员外周血干细胞中的T细胞和B细胞,且不影响造血干细胞的生物学功能,此项研究为去除T/B细胞的单倍体相合造血干细胞移植提供了技术平台。 肖娟 李红华 金香淑 靳海杰 富丽烨 高春记 韩晓蘋 于力关键词:造血干细胞移植