石药集团医药联合研究基金
- 作品数：86 被引量：413H指数：11
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- 相关机构：河北联合大学河北医科大学河北大学更多>>
- 发文基金：河北省自然科学基金国家自然科学基金河北省高等学校科学技术研究青年基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学化学工程更多>>
- 刺五加功能基因密码子偏好性的分析被引量：11
- 2013年
- 目的分析刺五加功能基因密码子的使用方式及其影响因素。方法以刺五加的17条功能基因为材料,利用CodonW和SPSS软件进行多元统计分析和对应性分析。结果刺五加功能基因密码子3个位置的GC量依次为51.03%、41.23%和40.04%,三者均与整个编码区的GC量显著相关(P<0.05),GC12与GC3的相关系数为0.262,未达到显著水平。同义密码子的相对使用频率大于1的密码子共27个,其中22个以A或T碱基结尾。对应性分析的结果表明,第1轴显示了22.78%的差异,与GC3、密码子适应指数和密码子偏好指数均极显著相关(P<0.01),相关系数分别为0.786、0.686和0.617,与有效密码子数的相关性未达显著水平。第2轴显示了19.28%的差异,且仅与有效密码子数极显著相关(r=0.635)。确定了刺五加功能基因的17个最优密码子。结论刺五加的功能基因偏好使用以A或T碱基结尾的密码子,其使用模式受选择和突变的共同影响。
- 邢朝斌吴鹏修乐山周秘
- 关键词：刺五加密码子用法功能基因
- 应用SEFA-PCR扩增刺五加内生青霉鲨烯合酶基因的旁邻序列
- 2012年
- ①目的克隆刺五加内生青霉Penicillium minioluteum P116-1a鲨烯合酶(squalene synthase,SS)基因的旁邻序列。②方法根据已经获得的P.minioluteum P116-1a SS DNA序列设计特异性性引物,采用SEFA-PCR(self-formed adaptor PCR)扩增其3'和5'末端未知序列。③结果 3'末端扩增获得长约5 000 bp的片段,5'末端扩增获得长约3 000bp的片段。④结论首次应用SEFA-PCR技术扩增获得P.minioluteum P116-1a SS基因的末端序列,为进一步研究该基因对刺五加皂苷含量的作用机制奠定了基础。
- 朱金丽何闪周秘修乐山邢朝斌
- 关键词：染色体步移
- 刺五加细胞色素P450基因的克隆与表达分析被引量：2
- 2014年
- 根据已报道的人参、三七等植物的细胞色素P450(Cytochrome P450,P450)基因的cDNA序列设计引物,利用RT-PCR法克隆刺五加P450基因的cDNA全长序列,并分析其在不同生长发育时期和器官中的表达情况。结果显示,克隆了全长为1 410 bp的刺五加P450基因的cDNA序列,该基因编码469个氨基酸残基组成的蛋白质。GenBank登录号为KF498590,与人参、三七的P450氨基酸序列一致性分别为91.5%和90.4%。刺五加的P450基因在不同生长发育时期和器官中均有表达,但表达量具有显著差异(P<0.05)。最大表达量出现在盛花期,为最低表达量(萌芽期)的1.26倍。各器官中,叶片的表达量最高,是最低量幼茎的1.49倍。
- 邢朝斌吴鹏李非非刘岩周秘修乐山
- 关键词：刺五加细胞色素P450克隆
- 乳糖酸修饰的黄芩苷自组装胶束载药系统的制备及体外评价被引量：5
- 2021年
- 目的制备乳糖酸(lactobionic acid,LA)修饰的O-羧甲基壳聚糖(O-carboxymethyl chitosan,OCMC)偶联黄芩苷(baicalein,BC)的自组装胶束,并考察其作为载体共同递送阿霉素(doxorubicin,DOX)和黄芩苷的可行性。方法以OCMC为水溶性骨架,通过酰胺化反应依次将黄芩苷、乳糖酸偶联到骨架上,分别获得O-羧甲基壳聚糖-黄芩苷偶联物(CMBC)和靶向的乳糖酸-O-羧甲基壳聚糖-黄芩苷偶联物(LA-CMBC)。利用核磁、红外确证偶联物的结构;透析-超声法制备自组装胶束并表征;芘荧光探针法测定临界聚集浓度(critical micelle concentration,CMC);制备载药胶束DOX/LACMBC,紫外测定阿霉素的包封率和载药量;透析法考察载药胶束在不同pH值条件下的释放行为;MTT法考察体外抗肿瘤活性。结果为考察取代度对粒径的影响,制备了3种取代度的CMBC胶束,粒径在164-215 nm,LA-CMBC和DOX/LACMBC胶束的粒径分别约为156 nm和180 nm。LA-CMBC胶束的CMC值为(0.081±0.019)mg/mL。载药胶束中阿霉素的包封率为(69.67±3.87)%,载药量为(16.08±0.25)%。体外释放表明DOX/LA-CMBC具有缓释性和pH敏感性。细胞毒性实验表明,DOX/LA-CMBC胶束对HepG2肝癌细胞生长具有显著的抑制作用。结论制备的载药胶束DOX/LA-CMBC粒径均匀、载药量较好,提高了黄芩苷的水溶性,且具有良好的pH敏感性和抗癌活性。
- 邵艳寻郭切切张舒迪杨雅欣龚法伍刘占军
- 关键词：黄芩苷偶联物阿霉素
- UPLC-Q-TOF-MS法鉴定连翘脂素在人肝微粒体中的代谢产物被引量：7
- 2017年
- 目的建立体外人源肝微粒体孵育体系,应用UPLC-Q-TOF-MS法,首次对连翘脂素在人肝微粒体中的代谢产物进行鉴定。方法采用Phenomenex Kinetex C_(18)色谱柱(2.1 mm×100 mm,2.6μm),以0.1%甲酸水-乙腈为流动相进行梯度洗脱,流速为400μL·min^(-1);进样量5μL。采用正离子模式进行检测,电喷雾离子源,源温度为550℃,质量数扫描范围m/z 100~1 000。结果对ESI-MS正离子模式下连翘脂素可能的裂解途径进行了推测,同时鉴定了连翘脂素在肝微粒体中的8个代谢产物。结论所建立的连翘脂素在人肝微粒体中的UPLC-Q-TOF-MS测定法方便快捷,可应用于连翘脂素在人肝微粒中的代谢研究,同时为连翘脂素的药物代谢动力学提供了依据。
- 张晓旭贾佩佩张智勇张兰桐
- 关键词：人肝微粒体体外代谢
- 多波长RP-HPLC法同时测定参芍口服液中5种成分的含量被引量：4
- 2015年
- 目的：建立同时测定参芍口服液中丹参素、原儿茶醛、芍药苷、阿魏酸、丹酚酸B含量的方法。方法：采用反相高效液相色谱法。色谱柱为Eclipse XDB C18,流动相为0.5%磷酸水溶液-甲醇-乙腈（梯度洗脱）,流速为1.0 ml/min,检测波长为280、230、320nm,柱温为30℃,进样量为10μl。结果：在此色谱条件下,5种成分可完全分离,丹参素、原儿茶醛、芍药苷、阿魏酸、丹酚酸B的质量浓度分别在24~384、1.25~20、40.5~648、1.5~24、145~2 320μg/ml范围内与各自峰面积呈良好的线性关系（r=0.999 9、0.999 9、0.999 8、0.999 9、0.999 9）;精密度、稳定性、重复性试验的RSD≤2.2%;平均加样回收率分别为100.7%、100.0%、99.6%、100.3%、99.3%,RSD分别为1.23%、2.19%、0.87%、1.11%、2.46%（n=9）。结论：该方法专属性强,精密度、准确度好,可用于测定参芍口服液中5种成分的含量。
- 付连浩张熙洁王绍志刘晓红
- 关键词：丹参素原儿茶醛丹酚酸B
- HPLC-ESI-MS/MS法测定连翘心中的8种化学成分被引量：10
- 2017年
- 目的建立HPLC-ESI-MS/MS法同时测定连翘心中连翘酯苷A、连翘苷、连翘脂素、芦丁、槲皮素、异槲皮苷、阿魏酸和橙皮苷的量。方法色谱柱为Diamonsil C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-0.1%甲酸水,梯度洗脱,体积流量800μL/min,进样量10μL;质谱采用电喷雾离子源(ESI源),负离子模式监测,源喷射电压-4 500 V,离子源温度650℃,定量分析采用多反应监测模式(MRM)。结果连翘心中8种成分在线性范围内峰面积与质量浓度均呈良好的线性关系,加样回收率为98.1%~101.8%,精密度RSD值小于0.84%。连翘酯苷A、连翘苷、连翘脂素和芦丁的量较高,平均质量分数分别为1 609.78、80.08、86.64和373.86μg/g,槲皮素、异槲皮苷、阿魏酸和橙皮苷的量较低。结论该法灵敏度高、专属性好、结果可靠,适用于连翘心中多组分的测定。
- 张巧月刘艳艳万昶宸付正良王丽芳张兰桐
- 关键词：液质联用连翘酯苷A连翘苷异槲皮苷橙皮苷
- 温度/pH双重敏感纳米水凝胶的制备及性能被引量：2
- 2016年
- 目的:探索温度/pH双重敏感聚N-异丙基丙烯酰胺/壳聚糖纳米水凝胶制备及性能。方法:采用大分子单体聚N-异丙基丙烯酰胺在壳聚糖溶液中,聚乙二醇二甲基丙烯酸酯为交联剂,以过硫酸胺为引发剂聚合。结果:所得产物为聚N-异丙基丙烯酰胺和壳聚糖的纳米半互穿网络水凝胶,并具有温度敏感性和pH敏感性。结论:该合成方法适用于制备双敏纳米水凝胶药用载体。
- 谢小勇彭琳薛慧敏赵占刘占军
- 关键词：布洛芬
- 刺五加与其愈伤组织中皂苷合成关键酶基因表达的差异分析被引量：2
- 2012年
- 目的:分析刺五加叶片、叶柄及其愈伤组织中SS、SE和bAS基因表达量的差异。方法:以刺五加叶片和叶柄为外植体,诱导获得愈伤组织。实时荧光定量PCR检测SS、SE和bAS基因的表达量。结果:刺五加SS、SE和bAS基因在刺五加叶片、叶柄及其愈伤组织中都有表达,SS、SE和bAS基因在叶片愈伤组织中的表达量分别为叶片中的89.3%、73.8%和83.4%,在叶柄愈伤组织中的表达量分别为叶柄中表达量的80.2%、87.7%和70.9%。结论:刺五加愈伤组织中SS、SE和bAS基因的表达量显著低于植株中的表达量。
- 邢朝斌吴鹏龙月红何闪梁能松
- 关键词：刺五加愈伤组织实时荧光定量PCR
- 补肾固齿丸中11种成分的LC-MS/MS-离子扫描切换法测定被引量：1
- 2013年
- 建立了液相色谱-串联质谱法同时测定补肾固齿丸中的11种成分。采用C18色谱柱,以甲醇-水为流动相,梯度洗脱。采用多反应离子检测,结合正负离子扫描切换,甜菜碱、芒柄花素、五味子醇甲和23-乙酰泽泻醇B采用正离子方式检测,梓醇、丹参素钠、丹酚酸B、肉桂酸、蒙花苷、柚皮素和丹皮酚采用负离子方式检测。所有被测物的线性关系良好;方法回收率为98.5%～107.0%,RSD为0.7%～3.1%。
- 张子建董立华孙冬晓郭盼盼王春英
- 关键词：补肾固齿丸液相色谱-串联质谱
