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重庆市自然科学基金(CSTC2006BB5085)
重庆市自然科学基金(CSTC2006BB5085)
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许雪青
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应用双向启动子RNA干扰技术抑制大鼠血管平滑肌细胞MAPK的表达
2009年
目的应用双向启动子技术构建针对MAPK的干扰载体,观察其对MAPK表达的影响。方法设计MAPK的干扰序列,构建基于双向启动子的干扰载体pHippy-MAPK,RT-PCR检测大鼠血管平滑肌细胞MAPK转录水平受抑制情况,免疫印迹检测大鼠血管平滑肌细胞MAPK蛋白表达受抑制情况,3H-TdR掺入法检测大鼠血管平滑肌细胞的增殖,免疫沉淀法检测大鼠血管平滑肌细胞MAPK活性。结果构建了针对大鼠MAPK3段序列的干扰载体pHippy-MAPK,并证实其中的1个干扰载体pHippy-MAPK3能有效抑制大鼠血管平滑肌细胞MAPK的表达。结论基于双向启动子的编号为3的pHippy-MAPK干扰载体能有效抑制大鼠血管平滑肌细胞MAPK的表达,为干预MAPK信号途径通路提供了有效手段。
王燕
傅春江
王旭开
曾春雨
杨成明
章波
许雪青
白云
关键词:
MAPK
RNA干扰
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