国家自然科学基金(81301949) 作品数:6 被引量:5 H指数:1 相关作者: 李常颖 王海涛 李建民 李保国 王丽丽 更多>> 相关机构: 天津医科大学 天津市泌尿外科研究所 天津医科大学第二附属医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 天津市自然科学基金 天津市科技支撑计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
沉默PIK3C2B基因的表达可抑制前列腺癌PC-3细胞的增殖及侵袭 被引量:1 2015年 目的 :研究下调磷脂酰肌醇-3激酶催化亚基2β(phosphatidylinositol-4-phosphate 3-kinase,catalytic subunit type 2 beta,PIK 3C 2B)基因对前列腺癌PC-3细胞体外增殖及侵袭的影响,并探讨可能的作用机制。方法 :设计合成特异性针对PIK3C2B基因的2对si RNA(PIK3C2B-si RNA1和PIK3C2B-si RNA2)及阴性对照-si RNA(negative control-si RNA,NCsi RNA);采用瞬时转染法将各si RNA转入PC-3细胞;分别采用实时荧光定量PCR法和蛋白质印迹法检测转入PIK3C2B-si RNA后对PC-3细胞中PIK3C2B m RNA及蛋白表达的影响;采用MTT法和Transwell侵袭实验分别检测PIK3C2B基因沉默后对PC-3细胞增殖及侵袭的影响。蛋白质印迹法检测PIK3C2B基因沉默后对其下游蛋白激酶B(protein kinase B,PKB,Akt)信号通路中Akt及磷酸化Akt蛋白表达的影响。结果 :PIK3C2B-si RNA转染PC-3细胞后,PIK3C2B m RNA及蛋白的表达水平均明显下调,以PIK3C2B-si RNA2的干扰效果较强(P<0.01);48和72 h时,PIK3C2B-si RNA2转染组PC-3细胞的增殖能力均明显低于空白对照组和阴性对照组(P值均<0.05);PIK3C2B-si RNA2转染组PC-3细胞的侵袭能力明显低于阴性对照组及空白对照组(P值均<0.05)。PIK3C2B-si RNA2转染组PC-3细胞中总Akt蛋白的表达水平未发生变化,但磷酸化Akt蛋白的表达水平被明显下调(P<0.05)。结论 :PIK3C2B可能通过激活Akt信号转导通路促进PC-3细胞的体外增殖和侵袭能力。 韦士勤 李常颖 李保国 李建民 王丽丽 王海涛关键词:前列腺肿瘤 小分子干扰 肿瘤转移 mTOR抑制剂在去势抵抗性前列腺癌治疗中的研究进展 被引量:2 2015年 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)是一种非典型丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,PI3K/Akt/mTOR通路的过度活化与肿瘤的发生、发展密切相关,并参与肿瘤的侵袭和转移。该通路与转移性前列腺癌密切相关,同时是前列腺癌神经内分泌分化的机制之一。前列腺癌是男性生殖系统最常见的肿瘤,多数经过雄激素剥夺治疗后进展为去势抵抗性前列腺癌(castration resistant prostate cancer,CRPC),预后极差。传统方法对CRPC治疗的有效率低,迫切需要新的治疗靶点。本文对mTOR抑制剂在CRPC治疗中的进展进行综述。 韦士勤 李常颖 王海涛关键词:MTOR抑制剂 靶向治疗 热休克蛋白gp96-肽复合物肿瘤疫苗的应用前景与挑战 被引量:1 2014年 肿瘤组织来源的热休克蛋白gp96-肽复合物(heat shock protein 96-peptide complex,HSPPC-96)结合有肿瘤特异性抗原多肽,能够诱导特异性抗肿瘤免疫。自体HSPPC-96疫苗在延缓肿瘤复发和提高患者总体生存率等方面彰显优势,应用前景广阔。然而作为自体来源的个体化疫苗,HSPPC-96疫苗的实施和推广也面临着巨大的挑战,如肿瘤组织来源限制、对晚期肿瘤疗效不明确等问题。本文综合分析了HSPPC-96疫苗免疫治疗的临床进展、应用前景及其面临的挑战。 李常颖 畅继武关键词:GP96-肽复合物 肿瘤疫苗 免疫应答 新生抗原在肿瘤免疫治疗中的应用进展 2019年 新生抗原(neoantigen)是位于恶性肿瘤细胞表面并在基因变异的基础上产生的带有特异性氨基酸序列蛋白,它们具有肿瘤特异性并普遍存在于不同的肿瘤组织中,从而能够被T细胞识别并进一步引起免疫反应。在不同肿瘤中,新生抗原的数量与免疫活性有关,并进一步影响检查点阻断后的肿瘤抑制。多项研究表明,新生抗原可在肿瘤治疗中具有潜在作用,其安全性和可靠性得到了认可,它不仅为肿瘤免疫疗法提供了理论基础,也进一步推动了个性化医疗的进程。 李建民 李常颖关键词:免疫疗法 个体化医疗 B7.1/GM-CSF修饰的PC3-DC融合疫苗在体外抗肿瘤免疫效应 被引量:1 2017年 目的:制作B7.1/GM-CSF修饰的DC融合疫苗,并观察其在体外的特异性抗肿瘤免疫效应。方法:制备完整表达GMCSF的前列腺癌细胞(PC3细胞),从前列腺癌患者外周血中分离树实状细胞(DC),应用电融合法融合DC和GM-CSF-PC3,构建B7.1/GPI蛋白并锚定于融合细胞表面;应用免疫荧光观察融合细胞形态及锚定稳定性;流式细胞进行融合细胞表形测定;ELISA试剂盒检测IFN-γ分泌情况;MTT及LDH试剂盒测定融合细胞刺激同源异体T淋巴细胞增殖和细胞毒性效应。结果:成功制备GM-CSF-PC3细胞及B7.1/GPI蛋白,成功分离DC并表达DC分子标记;B7.1/GM-CSF融合疫苗高表达DC分子标记及前列腺癌标记;T细胞增殖实验证明融合疫苗具有强烈的免疫刺激活性;细胞毒性实验证明了融合细胞具有比对照组更有效的肿瘤杀伤作用。结论:电融合技术可成功诱导DC与GM-CSF-PC3融合,体外实验中特定修饰的融合疫苗可显著的提升抗肿瘤免疫效应。 郝晓东 李常颖 薄志强 丁浩 张昌文 张志宏关键词:DC细胞 前列腺癌细胞 融合疫苗 B7.1 GM-CSF 不同浓度LBH589对人前列腺癌PC3细胞增殖、EZH2 mRNA及蛋白表达的影响 2015年 目的观察不同浓度组蛋白去乙酰化酶抑制剂LBH589对人前列腺癌PC3细胞增殖、EZH2 mRNA及蛋白表达的影响。方法选择1、10、100 nmol/L的LBH589处理PC3细胞,采用MTT法测算细胞增殖抑制率,实时定量PCR、Western blotting法分别检测细胞EZH2的mRNA和蛋白。结果随着浓度和时间的增加,LBH589对PC3细胞的抑制作用呈现明显的时间-剂量关系(P均<0.05)。相同时间时,随着LBH589浓度的增加,PC3细胞EZH2的mRNA、蛋白表达逐渐降低(P均<0.05);相同浓度时,随着时间的延长,PC3细胞EZH2的mRNA、蛋白表达逐渐降低(P均<0.05)。结论 LBH589可抑制PC3细胞的增殖,同时可使细胞EZH2的mRNA及蛋白表达降低,且随着浓度的增加作用增强。 韦士勤 李常颖 李保国 李建民 王丽丽 王海涛关键词:去乙酰化酶抑制剂