国家自然科学基金(30670962)
- 作品数：2 被引量：12H指数：1
- 相关作者：李潇杨红李景南钱家鸣路新卿更多>>
- 相关机构：北京协和医院首都医科大学附属北京朝阳医院北京协和医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- K-ras基因突变通过调节E-cadherin/β-catenin/p120蛋白复合体形成和RhoA蛋白活性对结肠癌细胞株Caco-2转移的影响被引量：11
- 2010年
- 目的观察K-ras基因突变通过调节E-cadherin/β-catenin/p120蛋白复合体形成和RhoA蛋白活性对结肠癌细胞株Caco-2转移的影响,探讨其促进结肠癌转移的相关机制。方法将培养的结肠癌细胞株Caco-2分别给予空白质粒phr-GFP转染(对照组)、K-ras基因突变型质粒phr-K-ras(Val12)转染(转染组)、phr-K-ras(Val12)质粒转染+丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)途径特异性抑制剂PD98059处理(MAPK抑制组)和phr-K-ras(Val12)质粒转染+磷脂酰肌醇3激酶(PI-3K)途径特异性抑制剂LY294002处理(PI-3K抑制组),Transwell细胞迁移实验检测细胞迁移率,细胞免疫荧光检测E-cadherin、β-catenin蛋白表达及其在细胞内定位,Western blot检测细胞内p120蛋白的表达,免疫沉淀检测与E-cadherin结合的β-catenin蛋白水平,Pull-down实验检测RhoA蛋白活性。结果转染组Caco-2细胞的迁移率为(19.8±5.6)%,明显高于对照组的(14.0±4.2)%(P=0.001)和MAPK抑制组的(15.8±1.2)%(P=0.044),但与PI-3K抑制组的(17.5±2.8)%差异无统计学意义(P=0.095)。细胞免疫荧光检测结果显示,转染组细胞膜上的E-cadherin和β-catenin蛋白表达减少。Western blot检测结果显示,转染组和PI-3K抑制组细胞内p120总蛋白表达减少。免疫沉淀检测结果显示,转染组和PI-3K抑制组细胞内与E-cadhenn结合的β-catenin蛋白水平下降。Pulldown实验检测结果显示,转染组细胞内的RhoA蛋白活性增加。结论K-ras基因突变可以促进结肠癌细胞株Caco-2的转移,其可能是通过MAPK途径减少E-cadherin/β-catenin/p120蛋白复合体形成,增强RhoA蛋白活性来实现的。
- 李景南李潇钱家鸣路新卿杨红
- 关键词：K-RAS基因突变RHOA蛋白
- 结肠癌与直肠癌癌变相关基因及蛋白表达的差异分析被引量：1
- 2023年
- 目的 探讨结肠癌及直肠癌癌变相关基因及蛋白表达的差异。方法 选取1999—2008年北京协和医院结肠癌和直肠癌住院患者石蜡组织标本各30例,比较两组患者的一般资料、癌变相关蛋白的阳性率、肿瘤组织错配修复系统蛋白表达的阳性率和肿瘤K-ras基因突变频率。结果 60例患者中,男34例,女26例;平均年龄(61.9±15.4)岁。两组在肿瘤易感基因结肠腺瘤性息肉病(adenomatous polyposis coli,APC)蛋白的阳性率(60.0%比53.3%)、Wnt1蛋白的阳性率(50.0%比66.7%)、β连环蛋白(β-catenin)的阳性率(93.3%比90.0%)、p53蛋白的阳性率(76.7%比86.7%)、结肠癌组织K-ras突变频率(53.3%比36.6%)的比较,差异均无统计学意义(P> 0.05)。结肠癌组Mut L同源基因1(mut L homolog1,MLH1)蛋白的阳性率(76.7%比100.0%)、减数分裂后分裂蛋白2(post meiotic segregation 2,PMS2)蛋白的阳性率(76.7%比100.0%)、MLH1和PMS2蛋白同时阳性率(76.7%比100.0%)均低于直肠癌组,差异均有统计学意义(P <0.01)。结论 肿瘤驱动基因APC、Wnt1、β-catenin及p53在结肠癌及直肠癌癌变过程中均发挥重要作用,K-ras在结肠癌中存在高频突变,错配修复系统相关蛋白MLH1及PMS2在结肠癌中存在高频表达缺失,提示结肠癌及直肠癌癌变机制可能存在差异。
- 赵莉韩涛涛李可敏王静李骥
- 关键词：结肠癌直肠癌蛋白表达
