国家高技术研究发展计划(2001AA223091)
- 作品数：3 被引量：18H指数：2
- 相关作者：胡薇王聚君冯正沈大康薛纯良更多>>
- 相关机构：中国疾病预防控制中心上海第二医科大学华中师范大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 日本血吸虫分泌蛋白基因Sjsp16的克隆与表达被引量：1
- 2002年
- 目的 克隆和表达日本血吸虫新的分泌蛋白Sjsp16的编码基因。 方法 根据EST测序的结果设计引物 ,从含有Sjsp16基因的cDNA克隆中扩增得到该编码基因 ,亚克隆入原核表达载体 pET2 8中表达 ,然后用生物信息学的方法对蛋白结构功能进行预测。 结果 成功克隆和表达了日本血吸虫分泌蛋白基因Sjsp16,生物信息学分析提示该基因编码蛋白的N端带有一个信号肽序列 ,是一个分泌蛋白 ,含有一个ML功能结构域 ,具有 4种潜在的功能作用位点 ,即 1个N 糖基化位点、3个蛋白激酶C磷酸化位点、4个酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点和 3个肉豆蔻酰化位点。 结论 Sjsp16基因编码蛋白为具有脂质识别和结合功能的分泌蛋白 ,可能为潜在的血吸虫病药物靶点或疫苗候选分子。
- 胡薇刘锋王聚君许学年韩泽广冯正
- 关键词：日本血吸虫分泌蛋白克隆编码基因生物信息学
- 日本血吸虫SjE16基因的原核表达及其免疫诊断应用潜能被引量：15
- 2003年
- 目的 亚克隆和表达日本血吸虫钙结合蛋白SjE16的编码基因,初步研究其免疫反应性。方法 根据表达序列标签(ESTs)测序的结果设计引物,从含有钙结合蛋白基因片段的克隆中扩增得到该编码基因,亚克隆人原核表达载体pGEX4T-1中表达,然后用ELISA方法初步检测重组蛋白的免疫反应性。结果 成功克隆和表达了日本血吸虫SjE16基因,该重组蛋白用于血吸虫病免抗体ELISA检测,其特异性和敏感性分别为94.1％(16/17)和88.2％(15/17)。非治疗组在感染后9～11wk抗体水平升高,并在感染后21wk仍维持高水平,而治疗组血清抗SjE16抗体水平在治疗后11wk下降至感染前水平。SjE16用于检测血吸虫病患者血清中的抗体,其特异性为98.3％(57/58),急性患者和慢性患者的敏感性分别为85.5％(53/62)和70.2％(40/57)。结论 获得了SjE16的重组蛋白,该蛋白能被日本血吸虫病患者的血清所识别,且在病兔药物治疗后迅速下降。SjE16重组蛋白具有诊断现感染和疗效考核的潜能。
- 王兆军胡薇沈大康武小文王聚君韩泽广薛纯良
- 关键词：日本血吸虫病基因重组
- 日本血吸虫钙磷蛋白基因的克隆、表达及其进化分析被引量：2
- 2006年
- 目的克隆和表达日本血吸虫钙磷蛋白基因,纯化表达产物。方法从日本血吸虫cDNA文库中挑出钙磷蛋白基因进行体外扩增,将目的基因亚克隆至原核表达载体pET-28a中进行表达,组氨酸标签亲和柱层析法纯化表达产物,并用蛋白质印迹(Westernblotting)分析其免疫原性。然后用生物信息学方法对其结构域和功能作用位点进行分析和预测,并绘制该蛋白的进化树。结果构建了重组原核表达载体,并在大肠埃希菌中获得了表达。纯化的重组蛋白可以被日本血吸虫感染的兔血清识别。经生物信息学分析发现该基因的编码蛋白含有4个EF手型(exchangefactorhand,EF-hand)功能结构域,另外具有3种潜在的功能作用位点,即2个蛋白激酶C磷酸化位点、8个酪蛋白激酶II磷酸化位点和1个N-肉豆蔻酰化位点,属于II型(type-II)钙磷蛋白。结论日本血吸虫钙磷蛋白基因编码蛋白为钙结合蛋白,有可能成为潜在的日本血吸虫病疫苗候选抗原和药物及诊断靶点。
- 鞠川彭建新徐斌王玮冯正胡薇
- 关键词：日本血吸虫原核表达
