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甲状旁腺激素对成人成骨细胞护骨素和护骨素配体及其相关因子的调节被引量：2: 2004年; 目的 :探讨甲状旁腺激素 (PTH)调节骨吸收作用的途径和机制。方法 :观察PTH对人成骨细胞(HOB)表达护骨素 (OPG)、护骨素配体 (OPGL)及其相关因子 ,如肿瘤坏死因子相关性凋亡诱导配体 (TRAIL)、巨噬细胞集落刺激因子 (M CSF)的影响 ,用RT PCR法检测OPG ,OPGL ,TRAIL及M CSF基因表达情况 ,用Westernblotting分析法检测OPG和OPGL蛋白表达情况。结果 :PTH下调HOB细胞中OPG的表达 ,上调OPGL ,M CSF及TRAIL的表达。结论 :PTH通过降低成骨细胞中OPG与OPGL的比值 ,增加M CSF和TRAIL的表达 ,促进破骨细胞生成、活化。; 苏欣廖二元彭健刘石平戴如春; 关键词：护骨素 M-CSF 甲状旁腺激素人成骨细胞

雌二醇对正常成人成骨细胞基质金属蛋白酶及其抑制因子的影响被引量：3: 2001年; 目的探讨雌二醇(17β-estradiol,E2)对正常人成骨细胞(hOB)基质金属蛋白酶(MMP)及其抑制因子(TIMP)的影响和绝经后骨质疏松的发病机制。方法hOB予雌激素干预后,MMP和TIMP用ELISA检测,MMP活性用明胶酶谱法和ELISA检测。结果观察到发现E2抑制hOBMMP-1蛋白质表达(P<0.001)。E2对hOBMMP-2分泌及蛋白质激活无影响(P>0.05)。E2对hOBTIMP-1蛋白质表达亦无影响(P>0.05)。结论雌激素不足可通过减弱其对成骨细胞MMP-1的抑制作用,促进骨吸收,此可能为绝经后骨质疏松的发病机制之一。; 罗湘杭廖二元邓小戈周后德伍贤平; 关键词：雌二醇基质金属蛋白酶基质金属蛋白酶抑制因子成骨细胞

抗坏血酸抑制核因子κB受体活化子配体诱导RAW264.7细胞的分化和功能被引量：5: 2004年; 目的研究抗坏血酸对核因子κB受体活化子配体(RANKL)诱导体外培养的破骨前体细胞RAW2647形成成熟多核破骨细胞的影响,探讨抗坏血酸在破骨前体细胞分化中的作用及机制。方法利用不同浓度的抗坏血酸与RANKL单独或共同处理RAW2647细胞,MTT法测定细胞增殖,抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色法观察TRAP阳性多核细胞,逆转录聚合酶链反应(RTPCR)测定破骨细胞表型基因和功能基因的表达,Western印迹方法检测碳酐酶Ⅱ基因蛋白表达,破骨细胞的骨吸收功能用骨吸收陷窝面积计数法分析。结果抗坏血酸和RANKL都抑制RAW2647细胞的增殖(P<005),但它们之间无协同作用。抗坏血酸本身不能诱导RAW2647细胞形成破骨细胞,但可抑制RANKL诱导的TRAP阳性多核破骨细胞形成(P<005)。抗坏血酸下调RANKL诱导的碳酐酶Ⅱ和RANK基因mRNA表达及碳酐酶Ⅱ基因蛋白表达,抑制骨吸收功能(P<005)。结论抗坏血酸能直接抑制RANKL诱导的破骨细胞形成和功能。; 肖新华周厚德袁凌青谢辉廖二元; 关键词：RAW264.7 RANKL 核因子KB 抗坏血酸受体活化功能基因

Effects of 17β-Estradiol on the Expression of IL-6, IL-11 and NF-κB in Human MG-63 Osteoblast-like Cell Line: 2006年; In order to characterize the effects of 17β estradiol （17β-E2） on the expression of IL-6, IL-11 and NF-κB in the human MG-63 osteohlast-like cell line, the expression of IL-6 was detected by RT-PCR, Northern blot and Western blot. The expression of IL-11 was determined by RTPCR, and NF-κB by Western blot. The results showed that 17β-E2 down-regulated the expression of IL-6 mRNA and protein, IL-11 mRNA and NF-κB protein in MG-63 cells. It was suggested that the expression of NF-κB, IL-6 and IL-11 in MG-63 cells could be suppressed by 17β-E2, and this might lend support to estrogen replacement therapy in postmenopausal women.; 王运林廖二元向光大戴如春肖新华罗湘杭; 关键词：IL-6 IL-11 NF-ΚB MG-63

孕激素调节人成骨细胞转化生长因子-β1、β2的表达被引量：4: 2003年; 目的　研究孕激素对正常成人成骨细胞转化生长因子 (TGF) β1、TGF β2表达的调节作用 ,探讨孕激素治疗绝经后骨质疏松症 (OP)的作用机制。方法　鉴定成人成骨细胞 (hOB) ,测定碱性磷酸酶 (ALP)活性、骨钙素分泌 ,VanGieson氏苦味酸酸性复红染色法进行Ⅰ型胶原染色。hOB用孕酮干预。Northern杂交、ELISA分别检测hOBTGF β1、TGF β2mRNA和蛋白质分泌。结果　观察到hOB分泌的ALP活性为 (74 3± 4 7)mU/mg蛋白 ,培养上清液骨钙素含量为 (3 84± 0 3 9)ng/ml蛋白 ,Ⅰ型胶原染色呈红色。观察到孕酮增强hOBTGF β1、TGF β2mRNA表达呈剂量依赖性 (P <0 0 0 1) ;10 -9mol/L孕酮诱导 12～ 2 4h促进TGF β1、TGF β2mRNA表达 ,呈时间依从性。孕酮促进hOBTGF β1、TGF β2蛋白质分泌呈剂量依赖性 (P <0 0 0 1) ;10 -9mol/L孕酮诱导 12～ 2 4h促进TGF β1、TGF β2蛋白质分泌 ,呈时间依从性。结论　孕激素可能通过诱导成骨细胞TGF β1、TGF β2表达 ,促进成骨细胞增殖与分化 ,增强成骨功能及骨基质合成。; 罗湘杭廖二元苏欣廖慧娟伍贤平; 关键词：孕激素成骨细胞转化生长因子-Β1 绝经后转化生长因子-Β2

复合杂合性CCN6基因突变致晚发型脊柱骨骺发育不良伴进行性骨关节病的关节软骨病理和分子病因研究被引量：16: 2004年; 目的　观察晚发型脊柱骨骺发育不良伴进行性骨关节病 (SEDT PA)患者的X线及磁共振成像特点、关节软骨病理特点 ,筛查CCN6基因突变位点 ,探讨SEDT PA的发病机制。方法　应用放射学、磁共振成像方法分析汉族家系中两例SEDT PA患者骨骼及软骨等结构特点 ;应用HE和甲苯胺蓝染色法对关节软骨进行组织病理学特点观察 ;用电子显微镜观察关节软骨组织和细胞的超微结构 ;设计引物对CCN6基因外显子进行扩增和测序分析 ;应用突变CCN6蛋白质三维结构预测等方法研究SEDT PA的发病机制。结果　病理检查发现汉族家系中一例SEDT PA关节软骨细胞增生活跃伴成熟障碍 ,而基质胶原纤维大小和密度明显下降。突变筛查提示两患者在CCN6基因 8号外显子存在两种突变类型 ,其中的替换突变 (10 0 0T→C ,Ser334Pro)来自父方 ;而缺失突变(84 0delT)来自母方 ,导致其编码的氨基酸序列移码突变 ,在下游 31个氨基酸残基后提前出现终止密码子 ,导致蛋白质被截短 4 3个氨基酸残基。蛋白质三维结构预测结果显示 84 0delT截短突变蛋白质与野生型蛋白质相比 ,从信号肽至第一个结构域 (IGFBP)起始的 2 4个氨基酸残基区域由一个单一环变成两个小的交叉环 ,而且伴C末端明显缩短 ,而Ser334Pro蛋白质仅有C末端的延伸方向与野生型蛋白质相反 ,其余?; 彭依群廖二元顾慧敏魏启幼周厚德李剑谢辉翟木绪谭利华罗湘杭伍贤平胡平安倪江东苏欣蒋谊戴如春郭丽娟袁凌青王敏王平芳刘石平杨雅王成隋国良方团育; 关键词：关节软骨晚发型分子病因脊柱骨骺发育不良杂合性

复方尼尔雌醇片急性和长期毒性的动物实验研究被引量：7: 2003年; 目的　观察复方尼尔雌醇片 (CNT)的急性和长期毒性反应。方法　本研究分为急性和长期毒性试验两部分 ,包括 3种动物的 5项独立试验。用昆明种小鼠和杂种家犬分别对CNT的LD50 、心血管系统、呼吸系统、神经系统等进行了急性毒性试验。实验结束后 ,尸解全部动物 ,进行系统病理和主要器官的组织病理检查。在长期毒性试验中 ,对SD大鼠和杂种家犬分别进行了 6个月的观察 ,于实验后 2月 (家犬 )或 4月 (SD大鼠 )、6月和停药后 2周 (SD大鼠 )或 3周 (家犬 )采血或处死动物 ,测定血液学、血生化学、尿生化指标和肝、肾功能指标。取各器官进行组织病理学检查。结果　 (1 )CNT的LD50 为 66 6mg/kg(腹腔注射 ) ,相当于临床用量的 681倍。最大耐受量为 32 5mg/kg(灌胃法 ) ,相当于临床用量的 3 32 5倍。 (2 )高于临床用量 3倍和 9倍剂量的CNT对小鼠无明显急性神经毒性、心血管毒性或呼吸系统毒性 ,亦未发现对其他主要脏器有何急性毒性反应。 (3)在观察 6个月期间内 ,高于临床用量的 36 7和 1 4 4倍的CNT剂量对SD大鼠和家犬无明显长期毒性反应。但SD大鼠在给予CNT或尼尔雌醇后 ,摄食减少、体重下降 (与对照组比较 ,P <0 0 0 1 ) ,同时发现血浆红细胞计数和血红蛋白降低 (与对照组比较 ,P <0 0 5～P <0 0 0 1 ) 。; 廖二元戴如春罗湘杭廖慧娟伍贤平李焕德程泽龙孙瑞元刘锡玖; 关键词：复方尼尔雌醇片长期毒性急性毒性动物实验 CNT 毒性反应

雌二醇对人成骨肉瘤MG63细胞株护骨素、护骨素配体及其相关因子的调节被引量：16: 2003年; 目的　观察 17β 雌二醇 (17β E2 )和ICI 182 780对人成骨肉瘤MG6 3细胞株表达护骨素(OPG)、OPG配体 (OPGL)及其相关因子 [TRAIL、巨噬细胞集落刺激因子 (M CSF)、转化生长因子 β(TGFβ) ]的影响。方法　用逆转录PCR(RT PCR)法检测基因表达情况 ,用Westernblot分析法检测蛋白表达情况。结果　 (1) 17β E2 能上调MG6 3细胞中OPG及TGFβ的表达 ,下调OPGL、M CSF及TRAIL的表达。 (2 )ICI 182 780对被检测基因有不同的调节活性。结论　雌激素缺乏可能导致成骨细胞中OPG、TGFβ的表达减少 ,而解除了对OPGL、M CSF和TRAIL等细胞因子的抑制作用 ,使破骨细胞的数量和活性增加 ,骨吸收增强和骨量丢失 ,这可能是绝经后骨质疏松症的一个重要的发病机制 ;ICI 182 780并非纯雌激素受体拮抗剂 ,而属于选择性雌激素受体调节剂。; 苏欣廖二元彭健伍贤平; 关键词：雌二醇人成骨肉瘤 MG63细胞株护骨素

雌二醇对成骨细胞护骨素基因表达的影响被引量：21: 2001年; 目的　研究在MG 6 3细胞和成人成骨细胞培养的不同阶段 ,雌激素对护骨素 (OPG)基因mRNA表达的影响 ,探讨雌激素对成骨细胞的作用机制。方法　在细胞培养的不同时间 ,测定细胞内碱性磷酸酶 (ALP)活性、骨钙素 (OC)含量和进行VanGieson胶原染色 ,以确定细胞培养的增殖、成熟、矿化阶段 ,于成熟阶段用 17β 雌二醇 (E2 )对培养细胞进行处理 ,用半定量RT PCR技术测定雌二醇对成骨细胞OPG基因mRNA表达的影响。结果　ALP活性、骨钙素含量及胶原染色均表明 ,细胞培养汇片后 12天达到成熟。正常成人髂骨分离的成骨细胞 (HOB)及成骨肉瘤细胞株MG 6 3均能表达OPG ,且表达量与培养的时程有关。培养 12天时 ,两种细胞OPG基因mRNA表达均达最高峰 (P <0 .0 1)。 10 -8mol/L的E2 能使MG 6 3细胞OPG基因mRNA的表达增加至基础值的 10倍 (P<0 .0 0 1) ,HOB的OPG基因mRNA表达增加至基础值的 7～ 8倍 (P <0 .0 1)。结论　OPG在成骨细胞表达。; 廖二元周后德邓小戈张湘生彭建伍贤平; 关键词：成骨细胞雌二醇护骨素基因表达

人成骨肉瘤MG-63细胞株和正常成人成骨细胞MMP及TIMP的表达被引量：14: 2001年; 罗湘杭廖二元邓小戈周后德伍贤平彭健; 关键词：成骨细胞基质金属蛋白酶基质金属蛋白酶抑制因子

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