国家自然科学基金(30471970)
- 作品数:10 被引量:53H指数:4
- 相关作者:陈杰卢朝辉于双妮孟云霄张婷婷更多>>
- 相关机构:北京协和医院中日友好医院更多>>
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- 胰腺癌中miR-27a靶基因PSMA1的预测及鉴定被引量:2
- 2013年
- 目的 软件预测并筛选miR-27a可能的靶基因,结合胰腺癌比较蛋白质组学结果中表达下调的蛋白,进一步检测胰腺癌中miR-27a的靶基因并进行验证.方法 采用生物信息学预测软件TargetScan、PicTar以及miranda预测miR-27a的靶基因,结合前期比较蛋白质组学的结果,筛选出miR-27a的可能靶基因;构建靶基因3'非翻译区(UTR)的表达载体,双荧光素酶报告基因检测系统验证miR-27a对靶基因的靶向作用;胰腺癌肿瘤细胞系PANC-1和BxPC-3中转染miR-27a mimics或微小RNA阴性对照序列,Western blot检测靶蛋白的表达情况.结果 软件预测与蛋白质组学分析结合筛选出miR-27a的靶基因为PSMAl.双荧光素酶报告基因检测系统显示,与对照组相比miR-27a对野生型PSMA1的3'UTR具有靶向作用,实验组较阴性对照组相对活性值下降19.14%,差异具有统计学意义(P=0.016);而对突变型PSMA1 3'UTR的靶向作用消失,实验组与阴性对照组相比差异无统计学意义(P=0.249).Western blot分析显示转染miR-27a mimics组PSMA1蛋白的相对表达量明显低于阴性对照组,PANC-1细胞实验组的PSMA1相对表达量为0.71±0.01;BxPC-3细胞实验组的PSMA1相对表达量为0.58±.0.04,P值均<0.01.结论 胰腺癌中PSMA1是miR-27a的直接靶基因.
- 张婷婷孙洋贾丛伟于双妮卢朝辉陈杰
- 关键词:胰腺肿瘤微RNAS
- RNA干扰Ezrin蛋白表达对胰腺癌细胞系Panc-1细胞生物学行为的影响被引量:2
- 2012年
- 目的探讨RNA干扰Ezrin对胰腺癌胞系Panc-l细胞生物学行为的影响。方法建立靶向Ezrin干扰质粒,稳定转染Panc-1细胞,并用流式细胞术检测细胞周期,CCK-8法检测细胞增殖情况,扫描电镜观察细胞表面形态及表面突起的变化,软琼脂克隆形成实验检测细胞体外非锚着依赖性的生长能力,用未包被及包被Matrigel胶的Transwell小室分别检测细胞的运动和侵袭能力。结果RNA干扰Ezrin后其蛋白的表达明显下降,Panc-1表面的细胞突起、微绒毛数量明显减少,体外非锚着依赖性的生长能力也明显下降,运动及侵袭能力也明显下降,但对细胞的体外增殖和细胞周期没有明显的影响。结论Ezrin蛋白的表达对胰腺癌细胞的细胞突起、表面微绒毛的形成、细胞骨架及非锚着依赖性的生长发挥着重要的作用,干扰Ezrin的表达将对胰腺癌细胞的表面突起的形成、细胞骨架以至细胞运动及在转移灶的存活中起着重要的作用。
- 孟云霄于双妮卢朝辉陈杰
- 关键词:胰腺肿瘤细胞骨架
- 人胰腺癌中miRNA的差异表达及部分功能研究被引量:2
- 2011年
- 胰腺癌是一种常见的恶性肿瘤,具有高度侵袭性,它的预后差,患者5年生存率不到5%,因此,对于胰腺癌发病机制及其新的治疗靶点的研究,是众多学者研究的热点。miRNA是由21—25个核苷酸组成的非编码RNA,它作为一种转录后调节分子通过与靶基因的3’-UTR配对,促进mRNA的降解或抑制翻译,从而抑制其靶基因的表达。近年的研究显示,大多数肿瘤都存在miRNA表达谱的改变,
- 陈杰于双妮马怡晖赵武干卢朝辉
- 关键词:MIRNA人胰腺癌非编码RNA高度侵袭性转录后调节
- 微小RNA在胰腺导管腺癌中的研究进展被引量:3
- 2011年
- 微小RNA(miRNA)是一种内源性非编码RNA分子,长度19~24个核苷酸,作为转录后调节分子发挥作用。多种肿瘤中都存在miRNA表达谱的改变,差异表达的miRNA发挥癌基因或抑癌基因的作用,与肿瘤的发生、发展和预后有着密切的联系。对胰腺导管腺癌miRNA表达谱的研究及其靶基因的探索有助于了解胰腺导管腺癌的发病机制,同时miRNA表达谱是胰腺导管腺癌早期诊断和预后判断潜在的肿瘤标志物。本文总结了近年已知miRNA在胰腺腺癌中的表达情况,并探讨miRNA在胰腺导管腺癌诊断、治疗及预后中的作用。
- 余春开于双妮卢朝辉陈杰
- 关键词:胰腺导管腺癌微小RNA靶基因生物学标志物
- fascin蛋白在结、直肠腺瘤和癌中的表达及意义被引量:22
- 2006年
- 目的探讨fascin蛋白在结、直肠腺瘤和癌中的表达及其临床病理意义。方法用免疫组化方法检测41例结、直肠癌,38例腺瘤及20例正常上皮中fascin蛋白的表达。肿瘤细胞染色>5%的病例定为阳性。结果41例结、直肠癌中有17例(41·5%)表达,而且fascin蛋白的表达和浆膜侵犯(P=0·005)、肿瘤分级(P=0·002)、TNM分期(P=0·011)、淋巴结转移(P=0·011)、p53表达(P=0·047)及Ki-67表达(P=0·034)等因素相关,与年龄、性别、组织学类型无关。27例中、重度异型增生腺瘤中仅3例(11·1%)表达,11例轻度异型增生腺瘤及正常上皮均不表达。结论在结、直肠癌的多步发生过程中,fascin蛋白表达看来是一迟发事件,通常在癌中表达,并与肿瘤侵袭和转移相关,有可能成为新的治疗靶点。
- 杨强卢朝辉罗玉凤万建伟曹金伶高洁武莎菲陈杰
- 关键词:FASCIN免疫组化
- 人乳腺珠蛋白在乳腺癌中的表达被引量:5
- 2008年
- 目的探讨人乳腺珠蛋白(mammaglobin A,MGA)在乳腺癌中的表达及其临床意义。方法采用免疫组化EnVision法检测MGA在87例原发性乳腺癌及其癌旁乳腺组织、20例转移性乳腺癌中的表达,并观察其与临床病理指标的关系。结果MGA在87例原发癌和癌旁乳腺组织的阳性率分别为70.1%和74.7%(P>0.05),但原发癌中强阳性者显著高于癌旁乳腺(P<0.01)。MGA的表达与淋巴结转移、ER和PR状态有显著相关性(P<0.05)。MGA在原发或转移癌的不同年龄组、组织学类型、组织学分级、TNM分期、c-erbB-2中的表达差异均不显著。结论MGA表达于原发和转移乳腺癌,可用于临床病理辅助诊断。MGA表达与腋窝淋巴结、ER和PR状态相关,可用于辅助判断预后。
- 刘键平罗玉凤万建伟卢朝辉陈杰
- 关键词:乳腺珠蛋白乳腺癌免疫组化标记物
- 伴破骨细胞样巨细胞的上皮性肿瘤被引量:8
- 2010年
- 伴有破骨细胞样巨细胞肿瘤的共同特征是间质中存在破骨细胞样巨细胞(osteoclast-likegiantcells,OGC)。可见于身体的各个部位,最常见于骨、肌腱(腱鞘)和软组织,其次是泌尿道、乳腺及胰腺(表1),通常称之为“伴OGC的肿瘤”或“巨细胞肿瘤”。本文将就伴有OGC的上皮性肿瘤进行介绍。
- 孟云霄姜英卢朝辉陈杰
- 关键词:上皮性肿瘤软组织泌尿道
- Ezrin蛋白过表达对胰腺癌细胞系Panc-1生物学行为的影响被引量:5
- 2012年
- 目的探讨Ezrin过表达对胰腺癌细胞系Panc-1生物学行为的影响。方法用过表达载体pcb6-Ezrin稳定转染Panc-1细胞,并用流式细胞仪检测细胞周期,CCK-8法检测细胞生长曲线,扫描电镜观察细胞表面形态及表面突起的变化,用未包被及包被Matrigel胶的Transwell小室分别检测细胞的运动和侵袭能力,并用免疫印迹法检测信号相关蛋白Erk1/2的变化。结果过表达Ezrin后其蛋白的表达明显升高,Panc-1细胞表面的细胞突起、微绒毛数量明显增加,运动及侵袭能力也明显增加,但对细胞的体外增殖和细胞周期无明显的影响。Ezrin的过表达能够激活Erk1/2的表达。结论 Ezrin蛋白对胰腺癌细胞的细胞突起、表面微绒毛的形成、细胞骨架及细胞的运动和侵袭发挥着重要的作用。因此,Ezrin可能在胰腺癌的进展中发挥着重要的作用,Erk1/2信号转导途径在这一过程中发挥着重要的作用。
- 孟云霄于双妮卢朝辉陈杰
- 关键词:EZRIN微绒毛过表达
- 微小RNA与肿瘤关系研究新进展被引量:2
- 2013年
- 微小RNA(microRNA,miRNA)是一类非编码小分子RNA,20世纪90年代初被发现,随后不断有新的miRNA分子被发现,并且诸多的研究提示,miRNA广泛参与了细胞的生长、分化、增殖和凋亡以及代谢、免疫反应等过程。肿瘤的发生发展是细胞功能紊乱、正常生命活动调节受阻,导致细胞恶性增长的结果。对肿瘤中miRNA表达谱的分析揭示,多数类型肿瘤中都存在miRNA表达谱的改变,并且有学者研究报道miRNA基因多位于肿瘤相关的染色体脆性位点区。通过对miRNA功能的探索得知,miRNA通过5’端2~8核苷酸(nt)的“种子”序列与mRNA3’非翻译区(3’-UTR)互补配对,进而在RNA诱导的基因沉默复合物(RNA-inducedsilencingcomplex,RISC)的作用下,导致靶基因的翻译抑制或降解,从而实现miRNA在转录后水平对基因表达的调控。每个miRNA可作用于多个靶基因,而同一个靶基因也可能受到多个miRNA的调节,其在不同肿瘤中的作用不尽相同。下面我们将对目前已经研究的miRNA在肿瘤中的作用进行综述。
- 张婷婷陈杰
- 关键词:微小RNA肿瘤细胞功能紊乱染色体脆性位点非翻译区RNA分子
- Ezrin与胰腺癌发生及转移的关系的探讨
- 目的探讨 ezrin 蛋白表达对胰腺癌发生和转移的影响。方法运用 RNA 干扰技术,用脂质体介导的方法对胰腺癌细胞系 MiaPaca-2的 ezrin 蛋白进行敲减,并通过(3418筛选的方法建立稳定转染细胞系,并检测干...
- 孟云霄陈杰卢朝晖于双妮
- 关键词:胰腺肿瘤EZRIN
- 文献传递