国家自然科学基金(39970321)
- 作品数：4 被引量：11H指数：2
- 相关作者：杨志祥糜漫天郎海滨张乾勇朱平更多>>
- 相关机构：第三军医大学北京大学第一医院第三军医大学大坪医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- PCR基因芯片被引量：7
- 2002年
- 基因芯片 (genechips)可以快速、微型化、自动化地检测大量基因 ,成了生物医学研究的重要推动力。随着微加工技术的发展 ,我们建立了有 12 0 0个微反应池的PCR基因芯片 ,将基因芯片和聚合酶链式反应 (PCR)技术结合在一起。PCR基因芯片综合了基因芯片体积小却可以检测大量基因 ,以及PCR敏感而且容易发现各种基因变异的特点 ,采用以PCR为基础 ,而非以分子杂交为基础的检测方式 ,克服了杂交技术所存在的内在缺陷 ,大大增强了实验的敏感性和可重复性 ;扩展了基因芯片在生物医学领域中应用的范围 ,更适用于各种基因重排、基因突变和基因缺失的鉴定。PCR反应采用荧光探针作实时定量分析。在临床肿瘤和白血病的诊断、人类基因组分析、基因多态性和疾病易感性鉴定、遗传性疾病的基因诊断、动物和植物基因变异筛选。
- 朱平
- 关键词：基因芯片基因表达聚合酶链反应克隆分子
- 视黄酸依赖Fas/RARα融合基因转染HL-60细胞启动的凋亡效应研究
- 2003年
- 目的 检测视黄酸依赖Fas RARα表达载体转染HL 6 0细胞启动的凋亡效应。方法 成功构建视黄酸依赖Fas RARα表达载体 ,用脂质体转染HL 6 0白血病细胞 ,经四甲基偶氮唑盐 [3 (4,5 dimethylthiaol 2 yl) 2 ,5 diphenyltetrazoliumbromide ,MTT]、流式细胞、DNA梯形带和透射电镜等方法观测视黄酸处理后细胞凋亡效应的发生。结果 以一定剂量的视黄酸处理HL 6 0后 ,细胞增殖受抑 ,呈凋亡性变。结论 视黄酸及其依赖的融合基因表达可协同诱导HL 6
- 杨志祥糜漫天张乾勇郎海滨韦娜
- 关键词：视黄酸融合基因转染HL-60细胞
- 一种视黄酸可控的绿色荧光蛋白表达研究被引量：2
- 2003年
- 目的 成功构建带有视黄酸反应元件 (RARE) TK启动子控制的增强型绿色荧光蛋白 (eGFP)报告基因表达载体 ,并验证该载体转染HL6 0细胞后全反式视黄酸 (ATRA)依赖的eGFP表达。方法 采用常规分子克隆方法构建真核表达载体pRARE TK eGFP ,经脂质体转染肿瘤细胞 ;ATRA处理后检测细胞增殖功能变化和经荧光显微镜直接观测eGFP表达变化情况。结果 ATRA处理转染HL6 0细胞后 ,eGFP呈视黄酸 (RA)时间剂量依赖性表达增高。结论 ATRA可通过RARE调控TK启动子下游的eGFP报告基因表达。
- 杨志祥糜漫天张乾勇郎海滨
- 关键词：视黄酸绿色荧光蛋白基因表达RA细胞转染肿瘤
- 视黄酸依赖Fas/RARα融合基因诱导MCF-7细胞凋亡的分子机制研究被引量：2
- 2006年
- 目的探讨视黄酸协同融合基因Fas/RARα诱导MCF-7细胞凋亡效应及其分子机制。方法以流式细胞仪、DNA梯形带检测MCF-7细胞凋亡效应,经RT-PCR和蛋白免疫印迹等方法观测视黄酸处理后caspase-8、bcl-2及bax基因表达变化。结果一定剂量视黄酸可诱导转染Fas/RARα融合基因的MCF-7细胞凋亡,caspase-8和bax基因表达上调,而bcl-2基因表达下降。结论视黄酸及其依赖的融合基因表达可联合诱导MCF-7细胞凋亡,caspases和bcl-2家族成员表达变化可能是其作用的主要分子机制。
- 杨志祥糜漫天王东王阁郎海滨
- 关键词：融合基因视黄酸细胞凋亡MCF-7分子机制
