国家自然科学基金(30470389)
- 作品数:5 被引量:5H指数:2
- 相关作者:陆应麟陈惠华杜芝燕徐元基谭晓刚更多>>
- 相关机构:军事医学科学院更多>>
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- 相关领域:医药卫生更多>>
- RNA干扰在肿瘤转移研究中的应用被引量:2
- 2005年
- RNA干扰是与特定基因同源互补的双链RNA在体内以序列特异的方式引发靶基因的mRNA降解,从而导致转录后基因沉默的过程。由于其在基因沉默中的高度特异性和有效性,在基因功能和基因药物的研究中有很大潜力。综述了RNA干扰可能的分子机制、分子生物特性和其在肿瘤特别是肿瘤转移中的应用。
- 谭晓刚陈惠华陆应麟
- 关键词:RNA干扰转录后基因沉默肿瘤转移
- MAG-2对肺癌细胞系PLA801生长的影响及其机制的研究
- 2008年
- 背景与目的肿瘤的发生、发展、增殖及转移是多种基因的结构、功能和表达情况改变积累的结果。MAG-2是利用抑制消减杂交技术获得的与肺癌转移相关的新基因,实验证实该基因与肺巨细胞癌细胞的转移密切相关。本研究的目的在于研究基因MAG-2对肺巨细胞癌细胞增殖的影响及其分子机制。方法构建MAG-2的正反义表达载体,分别转染PLA801C和PLA801D,获得稳定表达相应序列的细胞株;然后利用MTT实验、流式细胞术、Fluo-3-Am荧光染料染色实验观察了这两株稳定转染细胞的细胞增殖能力、细胞周期的组成、细胞内游离Ca2+浓度变化,并用Westernblot及RT-PCR实验检测MAG-2对p53、PCNA等分子的影响。结果MAG-2正义载体转染能增加PLA801C株细胞内PCNA的转录,抑制p53突变蛋白的水平,增加S期细胞所占的比例,增加细胞内游离Ca2+浓度,对细胞具有一定的促增殖作用;MAG-2反义载体转染可以降低细胞内游离Ca2+浓度,抑制PLA801D株细胞的增殖,但是对p53和PCNA的影响不明显。结论MAG-2对肺癌细胞PLA801具有促增殖的作用,通过影响细胞内游离Ca2+浓度来实现对细胞增殖的调节是其可能的机制之一。
- 张金强孟宇宏刘刚陈惠华王妍徐元基杜芝燕陆应麟
- 关键词:钙信号增殖肺肿瘤
- 人肿瘤转移相关基因mag-2的多克隆抗体的制备和鉴定
- 2007年
- 目的:制备和鉴定针对人肿瘤转移正相关基因mag-2蛋白产物的特异性多克隆抗体。方法:采用生物软件分析mag-2蛋白序列特性,预测特异性抗原表位,人工合成17肽抗原表位片段,将之与钥孔碱血蓝蛋白(KLH)耦联,采用背部皮下及皮内多点注射法免疫日本大耳白兔,收集分离血清,间接酶联免疫吸附试验(ELISA)测定其效价,Western印迹试验鉴定其特异性及其在多种肿瘤细胞中的表达。结果:成功免疫日本大耳白兔,ELISA结果表明得到的抗血清与免疫多肽有良好的结合,获得了高效价的多克隆抗体;Western印迹试验结果显示抗血清检测到的条带大小约为55×103,与mag-2理论蛋白产物相对分子质量相符;发现mag-2在多种肿瘤细胞中均有表达。结论:成功制备了mag-2特异性多克隆抗体,为深入研究mag-2基因在肿瘤转移中的作用提供了一个有用的工具。
- 刘刚徐元基姜云波贾海泉潘和平杜芝燕陆应麟
- 关键词:多克隆抗体肿瘤转移表位
- 转移正相关基因mag1-的原核表达及抗体制备被引量:1
- 2006年
- 目的:克隆人mag1-基因,在大肠杆菌中进行表达并制备其抗体。方法:利用PCR方法从含有mag1-基因全长序列的pcDNA3-mag1-质粒上扩增mag1-基因开放阅读框(ORF),将其插入表达载体pET-28 a(+)中,构建重组表达载体pET-28 a-mag1-,用IPTG诱导目的基因在E.coli中的表达,并通过W estern印迹方法对表达产物进行鉴定。表达产物经过初步纯化后作为抗原免疫兔制备多克隆抗体。结果:所获得的序列经测序分析与源序列一致;SDS-PAGE分析表明,经0.1 mmol/L IPTG 37℃诱导6 h后在E.coli中有大量的融合蛋白表达,相对分子质量约为18×103。W estern印迹分析提示,诱导表达产物能与H is单抗发生特异反应。ELISA结果表明获得了高效价的多克隆抗体。结论:获得了H is-mag1-融合蛋白在大肠杆菌中高效表达,并制备了其相应的多克隆抗体。
- 蔺会云徐元基王妍陈惠华杜芝燕谭晓刚陆应麟
- 关键词:基因表达抗体酶联免疫吸附测定
- 组织型谷氨酰胺转氨酶在肿瘤生物学中的作用被引量:2
- 2006年
- 组织型谷氨酰胺转氨酶是一种多功能酶,不仅可以催化多种蛋白质形成交联分子稳定细胞外基质,而且可以调节肿瘤生长、细胞分化、细胞凋亡和细胞黏附。本文就该酶的一般特性及在肿瘤生物学中的作用进行综述。
- 蔺会云陆应麟
- 关键词:转谷氨酰胺酶肿瘤转移肿瘤发生细胞分化细胞外基质