山东省高等学校科技计划项目(J10LC73)
- 作品数：5 被引量：15H指数：3
- 相关作者：乔宁刘永光竺晓平李美芹王兴翠更多>>
- 相关机构：潍坊科技学院山东农业大学青岛农业大学更多>>
- 发文基金：山东省高等学校科技计划项目山东省科技发展计划项目国家公益性行业科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 番茄黄化曲叶病毒病的发生与防治策略被引量：3
- 2013年
- 介绍了番茄黄化曲叶病毒病发生与棚内温度、湿度的关系,并提出了防治该病的综合措施,包括关闭放风口、棚前(棚外)点种玉米、在棚顶安装遮阳网、套种玉米、勤浇水、增施生物有机肥、控制烟粉虱等。
- 王成增姜会霞常怀云吕化霞刘永光乔宁竺晓平
- 关键词：病毒病黄化番茄棚内温度遮阳网烟粉虱
- 番茄黄化曲叶病毒双抗体夹心ELISA检测方法的初步建立被引量：6
- 2013年
- 以纯化的番茄黄化曲叶病毒(TYLCV)外壳蛋白为抗原,免疫家兔制备并纯化出TYLCV的多克隆抗体IgG,以此抗体做包被抗体,并用碱性磷酸酶(AP)对其进行标记作为酶标抗体,从而建立了番茄黄化曲叶病毒的双抗体夹心ELISA(DAS-ELISA)检测方法。通过ELISA方阵试验确定该法的最佳工作浓度为酶标抗体(IgG-AP)作1∶400倍稀释,包被抗体浓度为6.25μg.mL-1;并且确定了抗原最低检出浓度为9.75ng.mL-1。采用该法对山东寿光的田间病样进行了定性和定量检测,结果表明建立的DAS-ELISA方法灵敏度高、特异性强,可用于番茄黄化曲叶病毒的常规检测。
- 乔宁李美芹吕金浮刘永光王兴翠竺晓平
- 关键词：番茄黄化曲叶病毒DAS-ELISA
- 山东寿光地区番茄黄化曲叶病毒外壳蛋白基因克隆及其在大肠杆菌中的表达被引量：4
- 2012年
- 利用双生病毒简并引物PA/PB,对山东寿光地区保护地疑似感染番茄黄化曲叶病毒(TYLCV)的番茄植株进行PCR检测,结果证明番茄病叶由TYLCV侵染所致。以提取的病叶总DNA为模板,扩增得到长约770bp的TYLCV-CP基因片段,克隆至pEASY-T1Simple载体,然后用XhoI和EcoRI将其切下并插入到pET-32a表达载体中,构建了寿光地区TYLCV分离物的外壳蛋白基因原核表达载体,转入大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG(异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷)诱导获得了50kD重组蛋白,Ni2+-NTA亲和层析纯化和Western印迹分析证明目的蛋白为TYLCV外壳蛋白,且具有良好的抗原活性。
- 乔宁李美芹郭宝太刘永光裴华丽竺晓平
- 关键词：番茄黄化曲叶病毒外壳蛋白基因基因克隆原核表达
- 山东省昌乐县保护地西瓜高产栽培技术被引量：1
- 2014年
- 山东省昌乐县尧沟镇是西瓜种植专业地区，昌乐西瓜以早熟、沙瓤、品质上佳而闻名国内外，是全国地理标志产品，于1997年通过了中国绿色食品认证。1999年和2001年，连续两届被评为中国国际农业博览会名牌产品。昌乐县西瓜已成为全县农业的主要产业，年平均播种面积1万hm2，总产量60万t。尧沟镇被誉为“中国西瓜第一镇”，昌乐县被誉为“中国西瓜之乡”。在长期的实践过程中，昌乐的瓜农们摸索出了一套保护地栽培条件下的西瓜高产栽培技术。
- 唐玉海
- 关键词：高产栽培技术保护地西瓜农业博览会绿色食品认证
- 番茄黄化曲叶病毒CP基因的原核表达载体构建选择被引量：1
- 2012年
- [目的]筛选出目的蛋白能够高效表达的重组质粒。[方法]利用原核表达载体pET-32a(+)和pET-28a(+)成功构建了番茄黄化曲叶病毒(Tomato Yellow Leaf Curl Virus,TYLCV)外壳蛋白(Coat Protein,CP)基因的重组质粒p32a-CP和p28a-CP,并通过PCR和双酶切鉴定了序列连接的正确性;再分别将2个载体转化至BL21(DE3)中,采用不同浓度的IPTG对其进行诱导表达,并进行SDS-PAGE电泳检测。[结果]测序结果显示TYLCV-CP基因已定向插入p32a-CP和p28a-CP中;SDS-PAGE电泳结果显示分子量约为50 kD的目的蛋白在重组载体p32a-CP中得到了高效表达,而在重组载体p28a-CP中未表达。[结论]为下一步的抗体制备及TYLCV的免疫学检测奠定了基础。
- 乔宁李美芹刘永光王兴翠唐玉海魏家鹏
- 关键词：番茄黄化曲叶病毒外壳蛋白基因
