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产脂肪酶海洋微生物的筛选、鉴定及酶学性质研究被引量：4: 2015年; 目的：从海洋来源样品中筛选脂肪酶产生菌，并对其进行鉴定和酶学性质研究。方法：以橄榄油为唯一碳源，采用固体平板变色圈观察法筛选脂肪酶产生菌。利用16SrDNA序列分析对其进行鉴定，并对脂肪酶酶学性质进行研究。结果：从海鳗和鲍鱼肠道内容物以及平潭海域、北极和盐湖泥样5个样品中共分离筛选出22株脂肪酶产生菌，其中ZF一16菌株产酶能力较强，根据其形态特征及16SrDNA序列分析鉴定为洋葱伯克霍尔德菌。其酶学性质研究表明，该脂肪酶最适反应pH为9．0，在pH5．0～10．0范围稳定；最适反应温度75℃，当温度小于40℃时较稳定；低浓度（1mmol／L）的Na＋和K＋对脂肪酶的活性有激活作用。Zn2＋对脂肪酶有强烈的抑制作用；对C4－C18均有降解作用，尤其对中长链的三辛酸甘油酯（C8）具有较强的降解能力。结论：从海洋来源的样品中筛选到产脂肪酶能力较强的细菌ZF-16菌株，经鉴定为洋葱伯克霍尔德菌。其所产脂肪酶为碱性高温脂肪酶，对C14-C18底物有降解作用，可用于食品烘焙、废纸脱墨和造纸脱胶工业。; 周智敏林娟林仙菊王巧煌叶秀云; 关键词：海洋微生物洋葱伯克霍尔德菌脂肪酶酶学性质

产木聚糖酶海洋微生物的筛选与诱变育种被引量：6: 2015年; 以自制木聚糖为初筛培养基的唯一碳源,从多个海洋来源样品中一共筛到60株有透明圈且形态各异的菌株,摇瓶发酵结果显示,38株具有产木聚糖酶能力,其中B659菌株产酶能力最高,酶活力为525.3 U·m L-1.结合B659菌株的形态特征和16S r DNA序列分析鉴定该菌株属于Bacillus属.对B659菌株进行紫外诱变,筛选得到酶活提高13.9%且稳定遗传的突变菌株G3-17;对G3-17菌株进一步进行微波诱变得到酶活较G3-17菌株高出11.6%且稳定遗传的突变菌株W1-40.对B659菌株和W1-40突变菌株进行发酵试验,72 h时W1-40菌株的酶活力达到645.2 U·m L-1,比B659菌株(517.9 U·m L-1)提高24.6%.; 黄小云林娟林小洪王国增叶秀云; 关键词：海洋微生物木聚糖酶诱变

梅花鹿过氧化氢酶基因的克隆与表达被引量：1: 2014年; 克隆得到梅花鹿过氧化氢酶基因序列,已提交Genbank登录(HQ877674).基因编码区全长1 584 bp,编码527个氨基酸,理论计算分子量为60 027.4 Da,理论计算等电点为6.67,预测蛋白质结构中不含有二硫键,在蛋白质序列中,具有过氧化氢酶家族活性中心保守序列和过氧化氢酶家族亚铁血红素保守序列,其DNA序列和蛋白质序列均与Bos taurus来源过氧化氢酶的同源关系最为接近.使用pPICZαC质粒和毕赤酵母GS115菌株,成功异源表达该基因,对诱导表达的发酵上清液进行活性测定,酶活为463 U·mL-1.; 林峻林娟叶秀云; 关键词：梅花鹿过氧化氢酶克隆

海洋来源芽孢杆菌产木聚糖酶的条件研究被引量：3: 2015年; 木聚糖酶来源广泛,目前发现的产酶菌株大部分来源于陆地,而对海洋微生物的研究较少。从福建平潭海域筛选到1株产木聚糖酶活力较高的B659菌株,经16Sr DNA鉴定为同温层芽胞杆菌。对B659菌株进行产酶培养基及发酵条件的优化。优化的产酶液体培养基是:麸皮6%,豆饼粉1%,K2HPO410 mmol/L,初始p H 6.0。经培养基优化的木聚糖酶活力提高了1.6倍。优化的发酵条件是:温度30℃,摇床转速230 r/min,装液量25 m L/250 m L,接种量8%(体积分数)。酶活力较优化前提高了0.7倍。经产酶培养基及发酵条件的优化,木聚糖酶活力达到2 838 U/m L,提高了3.4倍,发酵周期由72 h缩短至30 h。; 林小洪林娟王国增叶秀云黄小云; 关键词：海洋微生物芽孢杆菌木聚糖酶培养基成分发酵条件

重组梅花鹿来源Cu/Zn-SOD的分离纯化及酶学性质: 2018年; 超氧化物歧化酶(SOD)能特异性清除氧自由基,对保护细胞免受氧化损伤具有重要作用。本文构建了表达重组梅花鹿来源Cu/Zn-SOD的毕赤酵母工程菌GS115-p PIC9K-SOD,并对重组SOD进行分离纯化和酶学性质研究。通过10 ku中空纤维柱超滤、DEAE弱阴离子交换层析、高效凝胶色谱分离纯化,重组Cu/Zn-SOD的比活力为1 7647.1 U/mg,回收率为36.84%。对重组Cu/Zn-SOD的酶学性质研究表明,其最适反应pH 8.0,最适反应温度30℃;在pH 5~9之间较为稳定,保温1h后仍能保留80%以上的酶活力;60℃保温1 h酶活保持在90%以上,70℃保温20 min残余酶活力仍有70%以上。重组Cu/Zn-SOD在中性条件下对蛋白酶耐受性较好,然而易受胃酸的酸解导致酶活力丧失。; 许鑫琦吕橄李仁宽叶秀云林娟; 关键词：梅花鹿毕赤酵母纯化酶学性质

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福建省高校产学合作科技重大项目(2013N5005)