国家林业局948项目(201084)
- 作品数：4 被引量：13H指数：2
- 相关作者：刘红林李建许蔡亚飞徐世永刘健更多>>
- 相关机构：南京农业大学安徽师范大学更多>>
- 发文基金：引进国际先进农业科技计划安徽省自然科学基金南京农业大学SRT基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学自然科学总论更多>>
- 慢病毒载体介导外源基因在不同细胞及鸡体不同组织中的表达被引量：6
- 2008年
- 以增强型绿色荧光蛋白(EGFP)为标记基因构建复制缺陷型慢病毒载体生产病毒,以病毒感染不同来源、不同分化特征的细胞,并进行鸡囊胚注射,观测外源基因的表达情况。试验结果表明,在所有类型细胞中均可检测到EGFP较高水平的表达,其中在HeLa、293FT细胞中的转染效率约1×108TU.mL-1(TU:转染单位),在C127细胞中为5×107TU.mL-1,在鸡胚胎成纤维细胞(CEF)中约为1×106TU.mL-1,病毒在鸡原生殖细胞(cPGC)中转染效率最低为1×102TU.mL-1。病毒的感染可引起细胞表型的不利改变。用该病毒载体注射鸡囊胚获得了可直接活体观察绿色荧光信号的转基因鸡,转基因效率约53%;外源基因在鸡体不同组织如表皮、消化道等器官中检测到不同水平的表达,并表现出不同的分布特征。
- 徐世永丁红梅孙岩王蒙蔡亚飞刘红林
- 关键词：慢病毒载体转基因鸡绿色荧光蛋白
- 禽类生殖嵌合体的制作及其应用被引量：1
- 2004年
- 目前已能够运用禽类囊胚细胞 (BCs)或原生殖细胞 (PGCs)制作嵌合体。为了提高生殖嵌合体的制作效率 ,已有许多方法被采用。最近的研究表明 ,对BCs或PGCs进行同性别移植也可以提高生殖嵌合的制作效率。BCs和PGCs体外培养的成功使得嵌合体技术能够应用于禽类转基因中 ,并且 。
- 李建许蔡亚非陈杰刘红林
- 关键词：禽类囊胚细胞原生殖细胞体外培养转基因保种
- 人工选育与鸡行为策略的变化被引量：2
- 2004年
- 根据资源分配理论,人工的选育及其选育方向和程度都会导致动物的行为策略产生变化.本实验中,我们选择AA(ARBORACRES)肉鸡和狼山鸡作为我们的观察对象,结果分析表明,狼山鸡比AA肉鸡更活跃,在站立、站立修饰羽毛、站立啄环境、走动或跑动等需要大量耗能的行为上,狼山鸡发生的频率比AA肉鸡高,其差异极显著(P<0.01),这些行为的差异也证实了资源分配理论的正确性.对AA肉鸡来说,蹲卧似乎是一种极为节省能量的行为,而这些被节省的能量被用于生长.我们的观察结果也暗示了鸡这一行为可能主要受神经及内分泌的影响.
- 高源李建许刘健蔡亚非杜文兴刘红林
- 关键词：AA肉鸡狼山鸡人工选育选育方向羽毛
- 狼山鸡-AA肉鸡嵌合体的制作及其转基因鸡研究被引量：5
- 2007年
- 试验Ⅰ:以狼山鸡为供体,AA肉鸡为受体,通过赤道开窗法制作了狼山鸡-AA肉鸡的嵌合体。共操作了108枚鸡蛋,孵化成活19只,孵化成活率17.6%。获得表型嵌合体鸡胚22枚,其中15只孵化成活,嵌合体率为13.9%。对2只嵌合体公鸡解剖发现,有1只的睾丸发育异常。PCR扩增禽类W染色体特异性的重复序列发现,2只嵌合体公鸡的性腺都嵌合了供体异性的细胞。结果表明所采用的嵌合体制作方法制备转基因鸡是可行的。试验Ⅱ:利用脂质体介导法,在体外将外源pEGFP质粒转入到鸡X期胚胎细胞中,培养8 h开始有外源基因的表达,体外培养12 h后获得了21.43%的转染效率。将转染后的鸡胚盘细胞移入到受体AA肉鸡的胚下腔,孵化6 d后在8个鸡胚中检测到有外源基因的存在,阳性率为40%(8/20)。
- 李建许陈杰蔡亚飞刘健徐世永刘红林
- 关键词：胚盘细胞嵌合体转基因狼山鸡AA肉鸡
