国家高技术研究发展计划(2003AA625070) 作品数:12 被引量:107 H指数:6 相关作者: 孙谧 王跃军 王春波 郝建华 邹艳丽 更多>> 相关机构: 中国水产科学研究院黄海水产研究所 青岛大学 上海水产大学 更多>> 发文基金: 国家高技术研究发展计划 国家自然科学基金 农业部海洋与河口渔业资源及生态重点开放实验室开放基金 更多>> 相关领域: 生物学 医药卫生 化学工程 更多>>
扇贝多肽经由aSMase-JNK通路抑制UVA诱导HaCaT细胞凋亡 被引量:5 2008年 建立紫外线A(UVA)辐射损伤HaCaT细胞的病理模型,从酸性鞘磷脂酶-JNK信号通路的角度研究扇贝多肽(Polypeptide from Chlamys farreri,PCF)抑制UVA诱导HaCaT细胞凋亡的分子机制.采用Hoechst 33258染色结合琼脂糖凝胶电泳分析细胞凋亡;用RT—PCR法和细胞免疫荧光染色检测胞内酸性鞘磷脂酶(acid sphingomyelinase,aSMase)的表达;蛋白印迹法检测细胞内JNK及磷酸化JNK的蛋白水平.结果表明,PCF可明显地抑制UVA诱导的HaCaT细胞凋亡;aSMase抑制剂Desipramine和JNK抑制剂SP600125均可阻断UVA引起的细胞凋亡;PCF的浓度在1.42~5.68mmol/L范围内可依赖性地抑制UVA辐射后细胞内aSMase的表达量以及JNK蛋白的磷酸化;预先加入Desipramine则抑制UVA引起的JNK蛋白的磷酸化.表明PCF通过阻断aSMase—JNK通路来抑制UVA诱导HaCaT细胞凋亡. 邢雁霞 苏爱 杜卫 王春波关键词:扇贝多肽 酸性鞘磷脂酶 紫外线A 凋亡 HACAT细胞 海洋微生物溶菌酶的纯化与性质研究 被引量:33 2005年 海洋微生物溶菌酶发酵上清液经超滤、CM_SepharoseFF阳离子交换层析和SephadexG_10 0凝胶过滤层析纯化得到电泳纯的溶菌酶,纯化倍数为34 7,活力回收为2 4 1%。对纯化溶菌酶性质研究表明,该酶分子量约为39kD ,对溶壁微球菌的最适作用温度为35℃,最适作用pH为8 0 ,在5 0℃以下和pH 5 0~10 0之间都有较好的稳定性,与常见金属离子和化学试剂有良好的配伍性,广谱杀菌,对多种致病菌也有较强的溶菌作用。 邹艳丽 孙谧 王跃军鳕碎肉酶解物清除羟自由基作用研究 被引量:5 2007年 通过测定鳕碎肉酶解物对Fenton体系产生的羟自由基的清除效果,从海洋蛋白酶YS-894、海洋蛋白酶YS-80、胃蛋白酶和木瓜蛋白酶中,筛选出海洋蛋白酶YS-894作为酶解鳕碎肉制备具有较高清除羟自由基活性酶解物的水解酶;用正交试验L9(34)对该酶的水解条件进行优化,并确定了水解的最佳肉水比。最终工艺条件为40℃、酶解45 m in、pH 9.0、酶解质量分数0.25%、底物∶水=1∶3的条件下进行水解,水解物对羟自由基的清除效果较好,清除率为68.88%。 胡文婷 张凯 孙谧关键词:下脚料 酶解 活性肽 羟自由基 低温碱性蛋白酶QDAPr的生物信息学分析及同源模建 对一株来自黄海的假单胞杆菌QD80所产的碱性蛋白酶QDAPr进行了生物信息学分析,并用生物信息学软件对其空间结构进行了模拟,同时对模建结果进行了结构质量的分析和检测,最后对模建的结果进行了初步的实验验证。结果表明,该碱性... 郝建华 袁翠 王跃军 孙谧关键词:碱性蛋白酶 生物信息学 同源模建 文献传递 海洋假单胞杆菌QD80低温碱性蛋白酶的化学修饰 被引量:2 2006年 海洋假单胞杆菌QD80低温碱性蛋白酶(QDAPr)具有良好的低温适应性,且与常见的增稠剂及表面活性剂有良好的配伍性.因此该蛋白酶在日用化学领域,尤其是低温洗涤领域,具有广泛的应用价值.为研究其结构与功能之间的关系,用EDC、PMSF、N-AI、2,3-丁二酮等8种化学修饰剂修饰该低温碱性蛋白酶,然后检测残余酶活力,借以研究酶分子中氨基酸侧链基团与酶活性中心的关系.结果表明,羧基、丝氨酸、ε-氨基、巯基等残基与酶活性无关;而色氨酸、组氨酸、酪氨酸残基侧链的化学修饰引起酶活性的大幅度下降,说明色氨酸、组氨酸、酪氨酸残基是酶活力所必需的基团.精氨酸残基侧链的化学修饰引起酶活性的轻微下降,说明精氨酸对酶活性具有一定贡献,但不处于活性中心. 郝建华 王跃军 袁翠 孙谧关键词:低温碱性蛋白酶 化学修饰 低温碱性蛋白酶QDAPr的生物信息学分析及同源模建 被引量:6 2006年 对一株来自黄海的假单胞杆菌QD80所产的碱性蛋白酶QDAPr进行了生物信息学分析,并用生物信息学软件对其空间结构进行了模拟,同时对模建结果进行了结构质量的分析和检测。最后对模建的结果进行了初步的实验验证。结果表明:该碱性蛋白酶的等电点为8.52,外源性氨基酸为32.9%,二级结构中α螺旋占5.88%,β折叠片占14.6%,与铜绿假单胞菌的碱性蛋白酶的同源性为76%。三维结构检测表明此模型的结构符合立体化学和生物学功能。同源性分析表明该模建模型含有HEXXHXUGUXH的基元(motif),通过BrAc修饰实验初步验证了活性中心的功能。 郝建华 袁翠 王跃军 孙谧关键词:碱性蛋白酶 生物信息学 同源模建 牡蛎软体中抗菌蛋白对白色念珠菌超微结构的影响 被引量:5 2008年 目的观察牡蛎软体中提取的抗菌蛋白对分离的致病性念珠菌超微结构的影响。方法取临床分离的白色念珠菌,暴露于抗菌蛋白中24h,应用透射电镜观察细胞超微结构的变化。结果经4h抗菌蛋白(3.5×103U.mL-1)作用,白色念珠菌菌体变为椭圆形,细胞壁松弛,细胞质固缩;16h后,菌体呈圆球形,细胞壁边缘呈毛状,残缺并且明显肿胀,胞浆内容变空,细胞器几乎消失,胞核不清;24h后,菌体呈不规则形,细胞壁缺失,细胞质解体出现空腔。结论抗菌蛋白对白色念珠菌有较强的抗菌作用。 兰晓明 牟茜 王春波关键词:牡蛎 抗菌蛋白 念珠菌 超微结构 海洋溶菌酶膜剂治疗细菌性阴道病疗效观察 被引量:1 2008年 目的:观察海洋溶菌酶膜剂(商品名:海妇洁膜)治疗细菌性阴道病的疗效。方法:将收治的细菌性阴道病患者,经微生物学检查未合并其他阴道炎者300例,随机分为两组,研究组150例,用海妇洁膜治疗,对照组150例,用甲硝唑泡藤片治疗。观察并比较两组治疗结束后3天的有效率和不良反应,于下次月经干净后复查各组的复发率。结果:研究组有效率为96%,对照组为78%,复查复发率:研究组为8.03%,对照组20.93%,两组比较,差别有显著性意义(P<0.01)。另外,研究组未出现不良反应,对照组有36例(24.00%)患者在用药期间有阴道烧灼感,41例(27.33%)患者反映阴道分泌物多。结论:海妇洁膜治疗细菌性阴道病疗效肯定,复发率低,安全性高。 兰晓明 刘静 郭新华 戴红英 王春波关键词:膜剂 细菌性阴道病 海洋细菌QD80低温碱性蛋白酶的基因克隆和性质 被引量:5 2005年 对海洋细菌QD80所产低温碱性蛋白酶进行了基因克隆和序列分析,对此酶的性质进行了初步研究.此酶基因开放阅读框架为1377bp,分子量为49.9kD.此序列上游-8bp处为该基因的SD序列,-10区和-35区分别有5′TAGAAT3′和5′TTGACC3′的保守序列.该酶最适pH为9.5,最适反应温度为30℃,在10℃酶活力仍能保持30%以上.该酶对氧化剂H2O2的抗氧化作用明显,浓度达到4gL时酶活仍保留85%.该蛋白酶的低温适应性和抗氧化特性将对其在低温洗涤领域的应用提供广泛的潜在应用价值. 郝建华 孙谧 王跃军 刘均忠关键词:低温碱性蛋白酶 基因克隆 抗氧化性 Triton X-100-无机盐双水相体系的相平衡模型及碱性蛋白酶在该体系中的分配系数模型 被引量:7 2006年 研究了TritonX-100-无机盐双水相萃取体系在298K时的相行为,建立了包含界面吸附效应的非离子表面活性剂双水相液-液平衡模型及碱性蛋白酶在其中的分配系数模型,验证了模型的可靠性和适用性.研究发现,该模型对中性范围的非离子表面活性剂双水相萃取体系的相行为及碱性蛋白酶分配平衡的模拟效果较好;非离子表面活性剂在水溶液中由于易结合离子而影响相行为,使体系更易分相;无机盐增大了碱性蛋白酶的表面疏水性,使碱性蛋白酶在疏水相中增溶. 谢红国 王跃军 孙谧关键词:双水相 相行为