广东省自然科学基金(7001619)
- 作品数：4 被引量：17H指数：3
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- 沉默caspase-3基因影响骨髓间充质干细胞的增殖和凋亡被引量：4
- 2013年
- 背景:缺血缺氧的心肌微环境导致植入的细胞存活率低。目的:观察沉默caspase-3基因对大鼠骨髓间充质干细胞增殖和体外缺血缺氧环境下凋亡的影响。方法:构建靶向caspase-3的shRNA重组慢病毒并转染骨髓间充质干细胞为转基因组,以正常细胞组和空载体组做对照,采用MTS法检测各组细胞增殖情况。建立缺血缺氧模型,real-time PCR和免疫组织化学分别检测缺血缺氧环境各组细胞的caspase-3mRNA和蛋白表达水平,应用流式细胞术检测不同缺血缺氧时间点(0,6,12,24,48h)各组细胞的凋亡率。结果与结论:重组慢病毒成功转染骨髓间充质干细胞,且细胞增殖活性升高(P<0.05)。缺血缺氧环境下,转基因组细胞caspase-3在mRNA和蛋白表达水平相比对照组下降(P<0.05)。沉默caspase-3能显著降低骨髓间充质干细胞的凋亡率(P<0.05),且随着缺血缺氧时间的延长凋亡率缓慢升高。结果提示,沉默caspase-3能加快骨髓间充质干细胞的生长速度和提高在体外缺血缺氧环境下的抗凋亡能力。
- 刘家良华平杨淞然陶俊江慧琦王萌杨艳旗
- 关键词：干细胞骨髓干细胞骨髓间充质干细胞CASPASE-3基因缺血缺氧
- 腺病毒介导的肝细胞生长因子/血管内皮生长因子双基因转染骨髓间充质干细胞移植治疗心肌梗死被引量：3
- 2012年
- 背景:骨髓间充质干细胞可以分化为心肌细胞,促进血管再生,但在移植早期其自身分泌的细胞因子不足以维持良好的分化和再生。目的:验证腺病毒介导的肝细胞生长因子和血管内皮生长因子双基因转染新西兰兔骨髓间充质干细胞移植对新西兰兔梗死心肌组织的修复重建和血管再生的影响。方法:腺病毒介导肝细胞生长因子/血管内皮生长因子双基因转染BrdU标记的新西兰兔骨髓间充质干细胞。取新西兰兔50只建立急性心肌梗死模型,4周后随机分为5组,分别于梗死心肌内注射:①骨髓间充质干细胞/Ad.血管内皮生长因子+肝细胞生长因子。②骨髓间充质干细胞/Ad.肝细胞生长因子。③骨髓间充质干细胞/Ad.血管内皮生长因子。④骨髓间充质干细胞。⑤对照组注射等量无血清IMDM培养液。移植4周后观察移植细胞的分化和新生血管的形成,并通过超声多普勒检测心功能变化。结果与结论:除对照组外,其余4组兔心功能都较移植前有明显改善(P<0.05),其中移植双基因转染骨髓间充质干细胞/Ad.血管内皮生长因子+肝细胞生长因子组兔的心功能改善程度要明显高于其他3组。部分BrdU染色阳性的细胞可以分化成为内皮细胞,参与构成了梗死区域的新生毛细血管。与对照组比较,其余4组都有明显的血管新生(P<0.05),而以骨髓间充质干细胞/Ad.血管内皮生长因子+肝细胞生长因子组最显著。提示肝细胞生长因子/血管内皮生长因子双基因转染新西兰兔骨髓间充质干细胞移植于梗死心肌可以促进心肌再生和新生血管的形成,明显改善心功能。
- 陈国祥华平熊利华陈矩潘德强
- 关键词：基因转染骨髓间充质干细胞血管内皮生长因子肝细胞生长因子
- 混合静脉血氧饱和度评估心脏外科围术期的风险被引量：5
- 2012年
- 【目的】分析混合静脉血氧饱和度(SvO2)对心脏外科围术期风险评估的价值及其预警值。【方法】170例心脏手术后病人到达ICU时通过经胸壁肺动脉导管采取标本测量SvO2。分析SvO2与围术期危险因素以及预后的关系,运用统计学计算SvO2对术后并发症的预警值,并将预警值作为分组界值将病人分组进行比较,验证SvO2与心脏外科围术期并发症及预后的关系。【结果】SvO2的预警值为53.5%。A组(SvO2≤53.5%)22例;B组(SvO2>53.5%)148例。A组EuroSCORE(TheEuropean System for Cardiac Operative Risk Evaluation)评分(4.6±3.4)明显高于B组(2.8±2.3;P=0.015)。A组与B组相比,术后由于心包填塞或出血剖胸探查率18.18%vs 2.03%(P=0.006),术后脑梗死率13.6%vs 1.5%(P=0.016),术后第1天胶体液用量(1 587±732)mL vs(1 091±785)mL(P=0.002),住院死亡率18.18%vs 1.35%(P=0.003)等显著高于B组。4例(2.4%)发生频发室性早搏,拔除经胸壁肺动脉导管后心律失常消失。拔除经胸壁肺动脉导管后无一例发生导管相关出血。【结论】经胸壁肺动脉导管取血测量SvO2安全经济。SvO2对心脏外科围术期风险可做出可靠的评估。
- 江慧琦王萌华平王铭辉胡海宇杨艳旗
- 关键词：混合静脉血氧饱和度
- RNA干扰抑制骨髓间充质干细胞中caspase-3基因的表达被引量：5
- 2012年
- 背景:研究发现,骨髓间充质干细胞移植入心肌梗死区域后易发生凋亡导致移植细胞存活率较低。目的:构建caspase-3基因的小分子干扰RNA片段(small interfering RNAs,siRNAs)表达质粒,探讨其在体外对骨髓间充质干细胞中caspase-3基因表达的抑制作用。方法:根据siRNA设计原则,针对caspase-3基因设计并合成siRNAs,构建caspase-3siRNA表达载体并利用脂质体介导方法瞬时转染骨髓间充质干细胞。实验分为正常对照组,阴性序列对照组(si-ncg)和3个干扰组(si-caspase-3-1、si-caspase-3-2和si-caspase-3-3)。结果与结论:成功构建了caspase-3siRNA表达载体并转染骨髓间充质干细胞。Westernblot和RT-PCR检测转染后的骨髓间充质干细胞中caspase-3蛋白和mRNA的表达下降,以转染si-caspase-3-3的骨髓间充质干细胞下降最明显。结果提示构建的caspase-3siRNA表达质粒在体外能抑制骨髓间充质干细胞中caspase-3基因的表达。
- 刘立宝华平杨淞然刘家良江慧琦王萌曾宽敖翔杨艳旗
- 关键词：骨髓间充质干细胞凋亡CASPASE-3RNA干扰
