首都医学发展科研基金(2005-2040)
- 作品数：9 被引量：30H指数：4
- 相关作者：梁黎明柴家科杨红明孙强马忠锋更多>>
- 相关机构：中国人民解放军总医院第一附属医院中国人民解放军总医院秦皇岛市第一医院更多>>
- 发文基金：首都医学发展科研基金北京市科技计划项目河北省科学技术研究与发展计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学电子电信更多>>
- 无细胞毒性猪去细胞真皮基质制备及转归研究被引量：1
- 2009年
- 目的制备无细胞毒性猪去细胞真皮基质(PADM),评价其生物安全性,并观察基质在体内的转归情况。方法取0.3～0.4mm厚的猪断层皮片,用高渗盐水浸泡去除表皮,然后置于氢氧化钠溶液中,常温下水浴持续震荡去除真皮细胞,获得PADM,经交联和消毒后进行细菌学及猪病毒微生物学检测。将PADM植入SD大鼠皮下,于术后动态观察PADM大体及组织学形态变化。结果所获PADM柔软而有弹性,易于塑形,便于手术操作。PADM内无任何细胞成分,胶原纤维排列规则有序,弹力纤维丰富。细菌和病毒微生物学检测结果均为阴性。PADM植入SD大鼠皮下后未引发免疫排斥。术后3周,PADM与创面黏附牢固,不易从创面揭离;术后24周仍然可见其结构;早期PADM被大量炎性细胞浸润,随时间延长成纤维细胞逐渐增多,并出现新生的毛细血管,胶原纤维逐渐排列规则、致密。结论高渗盐水/氢氧化钠方法制备PADM过程简单,所得真皮基质无细胞毒性,生物安全性高,在体内可作为真皮支架长期存在。
- 马忠锋柴家科杨红明梁黎明许明火
- 关键词：皮肤移植胶原
- 不同性状激光微孔脱细胞真皮构建活性基质的研究被引量：4
- 2008年
- 目的:探讨不同性状激光微孔脱细胞真皮构建活性基质的可行性。方法:将激光微孔猪脱细胞真皮分成两组即干燥组和湿润组,每组36片。将成纤维细胞悬液分别滴加在两组真皮表面,培养不同时间点后,每组分别随机留取6个孔的培养液,采用双抗体夹心ELISA法测定上清液中人TGF-β1、bFGF含量。结果:随着培养时间的延长,TGF-β1和bFGF分泌量逐渐增多,第8天达到稳定水平,第10、12天与第8天的含量比较差异无统计学意义(P>0.05);各时间点干燥组各因子的含量均高于湿润组(P<0.05)。结论:激光微孔猪脱细胞真皮可用为支架构建活性基质,其冷冻干燥后更有利于成纤维细胞的粘附与增殖。
- 梁黎明柴家科孙强杨红明陈敏亮冯瑞
- 关键词：脱细胞真皮基质激光微孔成纤维细胞
- 三倍频Nd:YAG激光器不同扫描速度对猪脱细胞真皮基质微孔孔径的影响被引量：2
- 2008年
- 目的探讨三倍频Nd∶YAG激光器不同扫描速度对猪脱细胞真皮基质微孔孔径的影响。方法在输出功率、频率等参数固定的前提下,调整激光束扫描速度（10-600mm/s）,以轮廓迂回法对猪脱细胞真皮基质进行打孔。分别测量打孔后真皮基质TritonX-100溶液浸泡洗涤前、后微孔入口及出口的孔径,计算真皮基质热损伤率。结果激光束扫描速度小于或等于80mm/s,热损伤率较低,微孔孔径变化不明显;随着激光束扫描速度的加快,热损伤率增大,孔径随之增大;当扫描速度加快至500mm/s,孔径开始缩小;当扫描速度为600mm/s,激光束不能穿透真皮基质形成微孔。结论不同激光束扫描速度下,真皮基质微孔形成情况不同,综合考虑热损伤率与打孔效率,80mm/s为最适宜的激光束扫描速度。
- 梁黎明柴家科孙强宗小军陈继民
- 关键词：激光微孔脱细胞真皮基质
- 气-液面培养对角质形成细胞分化的影响
- 2008年
- 目的研制角质形成细胞-胶原-猪去细胞真皮基质（PADM）组织工程皮肤，观察气．液面培养对角质形成细胞分化及细胞因子基因表达的影响。方法将角质形成细胞种植在真皮基质胶原面进行气-液面培养和浸没式培养。采用逆转录．聚合酶链反应（RT—PCR）技术，对比研究两种培养方法获得的细胞膜片bFGF基因表达差异。结果气-液面培养获得的角质形成细胞层结构与正常皮肤相似，细胞分化良好。单纯浸没式培养角质形成细胞层较薄，分化较差。气-液面培养获得的细胞膜片bFGF mRNA表达量明显高于单纯浸没式培养（t=3．825，P〈0．01）。结论气．液面培养可促进角质形成细胞的生长、分化及复层表皮结构形成，影响细胞因子的基因表达。
- 马忠锋柴家科杨红明梁黎明许明火
- 关键词：角质形成细胞皮肤基因表达
- 激光打孔制备微孔猪脱细胞真皮基质被引量：6
- 2007年
- 目的探讨激光打孔制备微孔猪脱细胞真皮基质(PADM)的可行性。方法采用胰蛋白酶/Triton X-100的方法制备PADM,使用CO2激光加工机进行打孔。对比激光微孔PADM与传统网状PADM的外观。将48只SD大鼠背部制作全层皮肤缺损创面,随机分为3组,每组16只。微孔组:移植激光微孔PADM+自体刃厚皮;网状组:移植网状PADM+自体刃厚皮;对照组:仅移植自体刃厚皮。术后定期观察各组大鼠创面愈合情况,计算移植物成活率和创面收缩率。结果激光微孔PADM微孔呈矩阵样整齐排列,与网状PADM比较真皮基质分布更均匀。术后6周,微孔组移植物成活率与对照组比较差异无统计学意义,但明显高于网状组(P<0.05);微孔组创面收缩率明显低于网状组和对照组(P<0.05)。结论激光打孔可制备激光微孔PADM,其真皮基质与自体刃厚皮复合移植可提高创面修复质量。
- 梁黎明柴家科冯瑞李江明孙强尹会男
- 关键词：脱细胞真皮基质激光微孔皮肤移植
- 以活性复合真皮基质为载体构建组织工程皮肤的研究被引量：1
- 2008年
- 目的构建含活性真皮基质的组织工程皮肤。方法将人成纤维细胞（Fb）与Ⅰ型牛胶原混合接种于猪脱细胞真皮基质（PADM）的表面，构建活性真皮替代物。其上接种人表皮细胞进行气-液面培养，获得组织工程皮肤，进行组织学观察。结果Fh在胶原内结构完整，与PADM形成复合真皮基质。所构建的组织工程皮肤表皮层结构与人正常皮肤相似，具备基底层、棘层、颗粒层和角质层，细胞之间有桥粒连接，细胞分化良好。结论Fh-胶原-PADM真皮替代物可作为较好的构建组织工程皮肤的真皮支架。
- 马忠锋柴家科杨红明梁黎明许明火
- 关键词：细胞培养技术表皮细胞真皮基质
- 激光微孔猪脱细胞真皮基质制备及创面移植的观察被引量：12
- 2007年
- 目的 制备激光微孔猪脱细胞真皮基质（PADM），寻找其与自体刃厚皮复合移植的最佳孔间距。方法 采用胰蛋白酶法制备PADM，用激光加工机打孔，制备孔间距为0．8、1．0、1．2、1．5mm的激光微孔PADM。在144只SD大鼠背部制作全层皮肤缺损创面，分为微孔Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组，依次采用前述4种孔间距的激光微孔 PADM＋自体刃厚皮移植；网状组采用网状PADM＋自体刃厚皮移植；对照组单纯移植自体刃厚皮。每组24只大鼠。观察移植后2、4、6周各组创面愈合情况，计算移植物成活率和创面收缩率，并行组织学观察。结果 移植后2、4周，微孔Ⅰ、Ⅱ组移植物成活率均低于对照组（P〈0．05），但与网状组比较，差异无统计学意义（P〉0．05）；移植后6周，微孔Ⅰ、Ⅱ组成活率明显高于网状组（P〈0．05）。移植后4、6周微孔Ⅰ、Ⅱ组创面收缩率较对照组显著降低（P〈0．05），移植后6周[（16．0±2．6）％、（15．1±2．4）％]明显低于网状组[（19．3±2．4）％，P〈0．05]。组织学观察见各微孔组上皮化良好，胶原纤维排列整齐，基底膜结构完整。结论 孔间距为0．8mm或1．0mm的激光微孔PADM与自体刃厚皮复合移植可提高创面修复质量，其中孔间距1．0mm效果最佳。
- 梁黎明柴家科杨红明冯瑞尹会男李凤玉孙强
- 关键词：激光皮肤移植脱细胞真皮基质微孔
- 活性真皮基质的研制及生物学活性检测
- 2010年
- 目的构建含有成纤维细胞(Fb)-胶原-猪去细胞真皮基质(PADM)的活性真皮基质。研究培养液中转化生长因子-β1(TGF-β1)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的分泌情况。方法将Fb与胶原混合种植于PADM的表面,收集第2、4、6、8、10d培养液样本,双抗体夹心ELISA法测定其中TGF-β1、bFGF的含量。结果Fb在胶原内结构完整,与PADM形成复合真皮基质。TGF-β1和bFGF浓度培养第4天与第2天比较显著上升(P<0.01),并达到稳定水平。结论Fb-胶原-PADM真皮替代物可作为构建组织工程全层皮肤的真皮支架。
- 马忠锋柴家科杨红明梁黎明许明火
- 关键词：成纤维细胞胶原细胞因子
- Ca^(2+)对角质形成细胞增殖与分化调控的作用研究被引量：7
- 2007年
- 目的:探讨胞外Ca2+对人角质形成细胞(HKC)的增殖与分化的调控作用,为组织工程皮肤的研制提供依据。方法:HKC体外培养,应用形态学、免疫细胞化学、MTT等方法检测胞外Ca2+对HKC增殖与分化的影响,并利用钙通道阻滞剂SK&F 96365来研究其作用的可能途径。结果:Ca2+为0.5mmol/L时,HKC呈单层生长,免疫细胞化学显示HKC呈低分化状态,当Ca2+为1mmol/L与1.5mmol/L时,细胞在3天后出现复层生长,免疫细胞化学显示细胞K19角蛋白表达减少,Ca2+为2.0mmol/L时表现出一定的细胞毒性作用,SK&F 96365可逆转Ca2+的促增殖与分化作用。结论:胞外Ca2+在一定范围内具有促HKC分化与增殖的作用,并且该作用可以被SK&F 96365所阻滞。
- 孙强柴家科梁黎明杨红明杜佳梅王丽环
- 关键词：CA^2+角质形成细胞钙通道阻滞剂
