国家自然科学基金(30530720)
- 作品数：11 被引量：78H指数：6
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- CD147分子通过VEGF促进类风湿关节炎滑膜组织中的血管新生被引量：18
- 2007年
- 目的观察类风湿关节炎(RA)滑膜组织中CD147表达强度与血管内皮生长因子(VEGF)表达水平间的相关性,并探讨成纤维样滑膜细胞(FLS)表面CD147的水平变化对VEGF表达的影响。方法收集15例RA患者滑膜,以4例骨关节炎(OA)患者滑膜作对照,采用免疫组织化学SP染色方法检测滑膜组织中CD147和VEGF的表达;体外原代培养FLS细胞,分别加入CD147抗体,PI3K通路阻断剂,MAPK通路的ERK1/2、P38及JNK阻断剂等作用FLS细胞,ELISA检测细胞培养上清中VEGF的表达水平。结果与4例OA滑膜组织CD147和VEGF表达相比,15例RA滑膜组织中均有CD147、VEGF均高表达。其中,表达CD147的细胞主要为成纤维样滑膜细胞、单核-巨噬细胞和淋巴细胞;表达VEGF的细胞主要为成纤维样滑膜细胞、微血管周围成纤维样细胞及血管平滑肌细胞。滑膜组织中CD147和VEGF的表达强度间具有统计学意义。ELISA结果显示,在使用LY294002或抗HAb18GmAb阻断CD147表达后,VEGF的表达量显著下降(P<0.05);而MAPK阻断剂(PD98059、SP600125和SB203580)等对VEGF表达水平无统计学意义(P>0.05)。结论CD147经PI3K-Akt信号通路在RA滑膜组织中上调VEGF促进血管新生。提示CD147在RA血管新生和血管翳形成中有重要意义。
- 王聪华陈丽娜朱平樊春梅王彦宏贾俊峰
- 关键词：关节炎类风湿CD147
- 细胞亲环素A促单核细胞THP-1钙离子的运动及细胞黏附能力
- 2007年
- 目的观察细胞亲环素A(CypA)对单核细胞THP-1细胞胞内钙离子运动及细胞与细胞外基质黏附能力的影响。方法乙酸肉豆蔻佛波酯(PMA)诱导分化THP-1细胞,通过激光共聚焦及结晶紫染色法检测CypA刺激THP-1细胞后细胞内游离钙离子浓度的变化及细胞与细胞外基质黏附能力的变化,同时使用CsA、CD147分子拮抗剂AP-9作用细胞,观察CD147分子是否参与了CypA这一调节作用。结果CypA显著促进分化前及分化后的THP-1细胞胞内游离钙离子的运动,同时增强了细胞与细胞外基质的黏附能力(P<0.05),CsA、CD147分子拮抗剂AP-9则可以阻断CypA对细胞钙离子及黏附能力的调节作用。结论CypA通过CD147分子促进细胞钙离子的运动及细胞黏附能力,提示在类风湿关节炎(RA)中CypA可以增强单核/巨噬细胞与滑膜及软骨面的结合及侵袭能力,促进了关节炎的发生发展。
- 杨勇朱平丁进樊春梅王彦宏陈志南
- 关键词：CYPACD147单核细胞
- 中性粒细胞增强类风湿关节炎滑膜细胞产生基质金属蛋白酶及其细胞侵袭力被引量：12
- 2007年
- 目的:研究中性粒细胞表面CD147分子对类风湿关节炎(RA)成纤维样滑膜细胞(FLS)产生基质金属蛋白酶(MMP)及细胞侵袭力的作用。方法:取自关节镜或骨科手术治疗的RA、骨关节炎(OA)患者的滑膜组织,体外分离培养FLS,通过流式细胞术(FCM)检测细胞表面分子及形态学方法鉴定。采用全反式维甲酸(ATRA)诱导HL-60细胞(人早幼粒白血病细胞株)诱导中性粒细胞分化,并用硝基蓝四氮唑(NBT)还原反应测定其分化程度。进而以FCM测定分化前后的HL-60细胞及FLS表面CD147的表达,并通过明胶酶谱和重组基质侵袭实验检测分化前后HL-60细胞对FLS MMP表达和细胞侵袭能力的作用以及CD147拮抗肽(AP-9)对这种MMP表达和细胞侵袭能力的抑制作用。结果:成功建立了FLS分离培养和HL-60细胞分化的实验体系。培养的FLS具有典型成纤维细胞的形态,均一的高度表达CD90(>98%)而不表达CD14。分化后的HL-60细胞CD147表达上调,RAFLS细胞CD147表达水平低于分化前及分化后HL-60细胞(P<0.05)。明胶酶谱试验显示:①与OA FLS相比,单培养的RA FLS表达较高水平的酶原及活化形式的MMP-2(P<0.05);②分化前/后的HL-60细胞分别与FLS共培养,酶原及活化形式的MMP-2和MMP-9的表达水平较这些细胞单独培养均显著升高(P<0.05),且分化后的HL-60细胞与FLS共培养酶原及活化形式MMP-2表达水平较分化前HL-60细胞与FLS共培养明显升高(P<0.05);③AP-9显著抑制两共培养组中MMP-2和MMP-9的上调作用(P<0.05)。侵袭实验显示:RA FLS侵袭能力高于OA FLS(P<0.05);分化前后的HL-60均可增加RA FLS的侵袭能力(P<0.05),且分化后强于分化前(P<0.05);AP-9可抑制这一促进作用,降低FLS的侵袭能力(P<0.05)。结论:中性粒细胞可能通过CD147促进RA患者滑膜FLS MMP-2、MMP-9的表达和活化,增强FLS的侵袭能力,这种促进作用可被CD147拮抗肽所抑制,将为RA关节软骨和骨损伤机制和治疗的进一步研究提供了重
- 梁晓辉朱平杨勇汪莉郑朝晖丁进
- 关键词：类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞基质金属蛋白酶中性粒细胞
- 两种类风湿关节炎滑膜侵蚀软骨联合免疫缺陷模型的建立及比较
- 2008年
- 目的比较背部皮下与肾包囊内2种不同移植方式所建立的类风湿关节炎（RA）滑膜侵蚀软骨联合免疫缺陷（SCID）模型的病理学及血清学改变，为采用人滑膜和软骨进行RA炎症及软骨损伤机制和治疗的体内研究提供实验系统。方法15只SCID小鼠随机分为皮下移植组、肾包囊移植组及空白对照组，无菌获取RA患者滑膜及人正常软骨，通过相应的移植方式共同植入各组SCID小鼠体内。分别于术后4、8周取移植组织，进行组织病理学分析；留取血清，用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测人类风湿因子（RF）水平。结果皮下移植组成活率及建模成功率较肾包囊组明显增高，两组滑膜中炎细胞浸润、滑膜增殖、软骨侵蚀评分及血清RF-IgM水平差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论与肾包囊移植相比，背部皮下移植建立的SCID-HuRAg在炎症及骨侵蚀及血清学改变上差异无统计学意义，且操作简便，成功率高，是进行人RA滑膜对软骨侵蚀机制和治疗体内研究的理想动物模型。
- 贾俊峰朱平史战国王聪华吕婷婷赵金康贾筠肖李冰
- 关键词：关节炎类风湿滑膜软骨联合免疫缺陷
- CyPA对类风湿关节炎中性粒细胞的趋化和产生IL-8的作用及其意义被引量：9
- 2009年
- 目的:观察细胞环亲素A(CyPA)对人中性粒细胞HL-60株和类风湿关节炎(RA)患者外周血中性粒细胞的趋化和产生IL-8的作用。方法:选择12例RA患者,分离外周血中性粒细胞,采用Boyden小室趋化实验比较CyPA和/或IL-8对HL-60和RA患者粒细胞的趋化作用,采用ELISA检测CyPA促进培养的粒细胞产生IL-8作用,并与健康人比较。结果:CyPA组、IL-8组及CyPA+IL-8组较阴性对照组趋化性显著增强(P<0.05);与IL-8组相比,CyPA抗体+IL-8组趋化指数降低(P<0.05);与CyPA组或IL-8组相比,CyPA+IL-8组趋化指数有所增加。RA患者中性粒细胞培养上清中IL-8水平较健康人显著增加(P<0.05);经CyPA刺激后,RA患者中性粒细胞培养上清中IL-8水平较CyPA刺激前增加,差异有统计学意义(P<0.05);阻断CyPA后,RA患者中性粒细胞培养上清中IL-8水平较CyPA刺激前无明显差异。结论:CyPA影响IL-8对中性粒细胞的趋化作用并对其分泌有影响。
- 张北王聪华王彦宏樊春梅朱平
- 关键词：类风湿关节炎中性粒细胞IL-8
- 类风湿关节炎滑膜侵蚀软骨SCID鼠模型的建立及初步实验研究被引量：8
- 2006年
- 目的建立类风湿关节炎(RA)-SCID小鼠模型,观察滑膜对软骨的侵蚀情况,为探讨RA滑膜侵蚀软骨机制及治疗奠定基础。方法70只SCID小鼠,3～6周龄。无菌获得12例非关节炎患者正常关节软骨,修剪成约2 mm×2 mm×1 mm后备用。同时取10例RA患者(膝关节或髋关节)滑膜组织修剪成约3 mm×6 mm的小块(片),这些小块包裹软骨后共植入SCID鼠肾包囊处,4例骨关节炎(OA)患者滑膜及2例正常滑膜同样处理作对照。术后观察小鼠和移植物的一般情况,从第4周开始分批处死SCID小鼠并切除移植物,进行苏木素-伊红(HE)染色病理分析。结果大部分滑膜及软骨在SCID小鼠体内存活,4周开始滑膜黏附并侵蚀软骨,12周后RA滑膜明显破坏软骨,移植物细胞浸润、软骨破坏与RA病理类似,OA滑膜轻微破坏软骨,而正常滑膜几乎不破坏软骨。结论RA滑膜植入SCID可成活并能侵蚀软骨,RA-SCID小鼠可作为人源化滑膜侵蚀软骨模型,在探讨机制特别是软骨破坏及治疗方面可能有明显优势。
- 史战国朱平贾俊峰卢宁赵金康李鸿明王彦宏樊春梅肖李冰
- 关键词：滑膜软骨SCID鼠
- CD4^+CD25^(high)调节性T细胞在类风湿性关节炎病程中的消长及其意义被引量：14
- 2007年
- 目的研究类风湿性关节炎(RA)患者病情发展不同阶段外周血及滑液中CD4+CD25high调节性T细胞数量的差别,及其与类风湿性关节炎活动程度的相关性,探讨CD4+CD25highT细胞在RA发生发展中所发挥的免疫抑制和调节作用。方法分别选取未经过缓解病情抗风湿药(DMARDs)治疗的活动性RA患者11例,经DMARDs治疗病情缓解的RA患者12例,和DMARDs治疗后效果不佳的RA患者9例,以及正常对照8例,检测他们的外周血淋巴细胞,以流式细胞术检测CD4+CD25high调节性T细胞的百分率,并研究CD4+CD25highT细胞百分率与抗环瓜氨酸(CCP)抗体,C反应蛋白(CRP),血沉(ESR)及类风湿因子(RF)的相关性。对其中部分患者的血液和关节滑液同时进行分析。结果RA未经治疗组和治疗效果不佳组CD4+CD25highT细胞的百分率(分别是5.24%和6.43%)明显低于正常对照组和治疗后病情缓解组(分别是17.17%和11.79%,P<0.01)。RA患者CD4+CD25highT细胞的百分率与抗CCP抗体(58.0Ru/mL),ESR(38.8mm/h)及CRP(2.73μg/L)呈明显负相关(P<0.05),与类风湿因子(RF=14.4Iu/mL)无明显的相关性(P=0.054)。正常对照组的CD4+CD25highT细胞百分率与抗CCP抗体(均<5.0Ru/mL),ESR(4.67mm/h),CRP(0.15μg/L)及RF(1.37)无明显相关性(P>0.1)。RA患者关节滑液中CD4+CD25highT百分率明显低于强直性脊柱炎(ankilosing spondylitis,AS)关节积液患者(P<0.05)。结论试验结果表明未经缓解病情治疗和治疗后效果不佳者的外周血中,CD4+CD25high调节性T细胞相对减少,且与病情活动程度负相关,这可能是RA发生和发展的一个重要因素。
- 陈丽娜王聪华朱平樊春梅王彦宏李小燕
- 关键词：调节性T细胞
- 类风湿关节炎患者外周血Th细胞亚群的变化及依那西普的调节作用被引量：16
- 2008年
- 目的:观察活动期类风湿关节炎(RA)患者外周血中辅助性T细胞亚群(Th1、Th2和Th17)数量和比例的变化,探讨依那西普治疗对Th亚群的作用。方法:选择20例活动期中重度RA患者,随机分为依那西普加MTX联合治疗组、MTX治疗组,于治疗前后分离PBMC,采用流式细胞术(FCM)检测Th1、Th2、Th17细胞的数量及Th1/Th2比值,同步用ELISA测定培养上清中IFN-γ、IL-4、IL-17水平,与同期选择的健康对照组比较并与患者的病情活动指标进行相关性分析。结果:治疗前活动期RA患者PBMC中IFN-γ+Th1细胞的量、IL-17+Th17细胞的量及平均荧光强度、Th1/Th2比值均高于健康对照组[(27.0±2.9)%vs(23.2±1.7)%,P<0.05;(36.78±2.6)%vs(2.35±0.9)%及(26.61±2.6)vs(11.4±1.2),P<0.01;(12.8±1.6)vs(8.60±1.9),P<0.01];依那西普加MTX联合治疗12周后,RA患者的病情改善,IFN-γ+Th1细胞、Th1/Th2比值、IL-17+Th17细胞的量及平均荧光强度、培养上清中IL-17水平均低于治疗前,而与健康对照组相比无统计学意义(P>0.05),且联合治疗组降低的幅度均大于MTX治疗组;治疗前后Th17细胞的量与C反应蛋白(CRP)、疾病活动指数(DAS28)的消长呈正相关(P<0.05,r=0.38和P<0.05,r=0.42)。结论:IL-17+Th17细胞、IFN-γ+Th1细胞及Th1/Th2比值的增高可能参与活动期RA的发病机制,依那西普治疗可改善RA病情并下调Th1和Th17细胞亚群。
- 吕婷婷朱平李晓燕樊春梅
- 关键词：关节炎类风湿依那西普TH亚群TH17细胞
- 细胞亲环素A通过CDl47分子促进类风湿关节炎单核／巨噬细胞MMP-9的表达
- 2007年
- 目的观察类风湿关节炎（RA）滑液中存在的大量细胞亲环素A（CypA）是否可以上调RA滑液中细胞膜表面高表达CD147分子的单核／巨噬细胞基质金属蛋白酶（MMP）-2和MMP-9的表达及活性，并确定这一调节是否需要CDl47分子信号通路的参与。方法重组人CyPA（200ng／mL）刺激人单核细胞系THP-l细胞24h。进行实时定量RT-PCR及明胶酶谱分析MMP-2和MMP-9mRNA表达及酶活性的改变：加入抗CDl47拮抗肽AP-9阻断细胞膜分子CDl47的作用。临床收集10例确诊的活动期RA患者外周血及关节腔滑液，分离获得单核／巨噬细胞，观察CypA对其MMP-2和MMP-9表达的影响。结果CyPA增加分化前及分化后THP-1细胞MMP-9 mRNA及蛋白的表达和活性，而对MMP-2则无作用；环孢素A（CsA）及抗CDl47拮抗肽AP-9显著抑制THP-1细胞MMP-2和MMP-9 mRNA表达及其分泌和活性及阻断CypA的上调作用。CyPA对RA关节腔滑液内单核／巨噬细胞MMP-9的表达和活性具有促进作用。结论CypA通过CD147受体的参与，上调RA关节腔滑液内单核／巨噬细胞MMP-9的表达及其活性，这一作用机制为RA发病机制及其治疗提供了新的理论基础。
- 杨勇朱平
- 关键词：亲环素A基质金属蛋白酶类类风湿CDL47
- CD4+CD25high调节性T细胞在类风湿关节炎病程中的消长及其意义
- 为了研究类风湿关节炎(RA)患者病情发展不同阶段外周血及滑液中 CD4
- 陈丽娜朱平樊春梅王彦宏李小燕
- 文献传递
