国家自然科学基金(30470497) 作品数:17 被引量:71 H指数:6 相关作者: 黄钢 盛世乐 王青 朱翠英 顾平 更多>> 相关机构: 上海交通大学医学院附属仁济医院 上海交通大学 上海第二医科大学附属仁济医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
PSA及其它肿瘤标志物在前列腺癌中的应用 被引量:7 2006年 顾平 盛世乐 黄钢关键词:前列腺癌 肿瘤标志物 PSA 癌发病率 恶性肿瘤 高发地区 Dickkopf-1时间分辨免疫荧光分析方法的建立及其在肺癌诊断中的应用 被引量:2 2008年 目的建立Dickkopf-1(DKK-1)时间分辨免疫荧光分析(TR—IFMA)方法,并评价其在肺癌诊断和病理分期中的价值。方法用双抗夹心原理建立DKK-1 TR—IFMA,并对其灵敏度、批内、批间差异和准确性等各项指标进行考核。同时用以测定212例肺癌、72例肺良性疾病患者和120名健康人血清DKK-1含量,以分析血清DKK-1水平与肺癌不同临床病理特性的相关性。结果DKK-1 TR-1FMA的稳定性好,线性宽,其检测灵敏度为0.08μg/L,批内和批间变异系数均〈6.5%,与商业ELISA试剂盒相关性好(r=0.972,P=0.01)。肺癌组血清DKK-1水平[31.93(79.47~18.03)μg/L]显著高于肺良性疾病组[15.25(18.41-11.49)μg/L]和正常对照组[13.90(16.91~11.02)μg/L],但DKK—1水平与年龄、性别、肺癌病理组织类型无关,与TNM分期(r=0.37,P〈0.001)、有无淋巴结转移(r=0.52,P〈0.001)和远处转移(r=0.62,P=0.001)显著相关;血清DKK-1诊断肺癌的总敏感度为68.4%,特异度为92.2%,准确性为82.1%,阳性预测值为90.6%,阴性预测值为72.5%;血清DKK-1诊断小细胞性肺癌的敏感度和准确性稍高于非小细胞性肺癌(70.7%vs69.5%,85.6%vs80.7%)。结论DKK-1可作为一项肺癌血清学标志,适用于肺癌的辅助诊断和病理分期。TR—IFMA检测血清DKK-1方法准确可靠,且为肺癌的DKK-1定量检测提供了技术平台。 盛世乐 王青 覃文新 于彬 黄钢关键词:肺肿瘤 荧光免疫测定 双标记时间分辨荧光免疫分析检测AFP和AFP-IgM在HCC中的应用 被引量:2 2009年 目的建立可同时测定血清甲胎蛋白(AFP)和AFP免疫复合物(AFP-IgM)的快速、灵敏检测方法,探讨其在原发性肝细胞癌(HCC)诊断中的临床价值。方法利用时间分辨免疫荧光分析(TRFIA)技术,分别用Sm^3+标记鼠抗人IgM单克隆抗体(M94181),Eu^3+标记鼠抗人AFP单克隆抗体(M19301),建立双标记TRFIA(dual-TRFIA)。选择HCC患者118例和肝良性病变(BLD)患者123例(肝硬化60例,慢性肝炎63例),健康体格检查者286例。分别用该法检测血清AFP和AFP-IgM水平,并用受试者工作特征(ROC)曲线进行临床诊断特性分析。采用SASS 6.12软件进行统计学处理。结果dual-TRFIA法检测AFP和AFP-IgM的灵敏度分别为0.41μg/L,10.00U/L,与试剂盒[电化学发光免疫(ECLIA)AFP test和Hepa AFP-IC kit]相关性好(r=0.9987和0.9854,P均〈0.05)。AFP和AFP-IgM在HCC中的诊断灵敏度分别为46.61%(55/118),63.56%(75/118),诊断准确性分别为77.10%和77.40%。AFP和AFP-IgM联合检测可将灵敏度提高至72.88%(86/118,χ^2=9.45,P=0.02),诊断准确性提高至84.10%(χ^2=6.24,P=0.04)。结论AFP-IgM是HCC新型血清标志物,同时检测AFP和AFP-IgM能明显提高对HCC的诊断灵敏度和准确性,有利于肝癌的早期诊断。dual-TR-IMFA法同时检测AFP和AFP-IgM稳定可靠,可以满足临床使用需要。 盛世乐 王青 黄钢 于彬 覃文新关键词:荧光免疫测定 甲胎蛋白类 单克隆 RCAS1在多种肿瘤细胞系中的表达 2006年 目的采用多种方法检测多种肿瘤细胞系中S iSo细胞表达的受体结合肿瘤抗原(RCAS1)的表达情况。方法采用实时定量聚合酶链反应(PCR)、Northern b lot检测、免疫组化法和酶联免疫吸附实验对10个人肿瘤细胞系及2个正常人细胞系RCAS1分子的表达进行了检测。结果实时定量PCR及Northern b lot结果显示,除了正常肝细胞LO2,各肿瘤细胞及正常人胚肾细胞293均见RCAS1 mRNA表达;免疫组化见各肿瘤细胞和293细胞的细胞膜和细胞浆中均有RCAS1蛋白,但在LO2细胞中未见RCAS1蛋白;除了HuH-7和LO2细胞,其余10个细胞培养上清液中的RCAS1蛋白量均明显高于DMEM全培液(P<0.001)。结论RCAS1广泛表达于多种肿瘤细胞系中。 韩源 黄钢关键词:RCAS1 肿瘤细胞系 Logistic回归和ROC曲线分析多种肿瘤标志物在结直肠癌中的诊断价值 被引量:6 2007年 目的:应用Logistic回归和ROC曲线探讨CEA、CA199及CA50在结直肠癌诊断中的应用价值。方法:结直肠癌患者75例,良性结直肠病患者35例,正常人49例,分别应用化学发光免疫分析测定CEA,电化学发光免疫分析测定CA199,免疫放射分析测定CA50,通过ROC曲线分析CEA、CA199、CA50及各种Logistic回归结果的ROC曲线下面积(AUC)。结果:结直肠癌-良性结直肠病中,CA50的AUC要高于CA199的AUC,而CEA、CA50两项联合诊断结直肠癌的AUC(0.875)要高于CEA、CA199、CA50三项联合诊断的AUC(0.604),且CEA、CA50两项联检诊断的AUC高于CEA、CA199或CA50任意单一检查的AUC。在结直肠癌-正常对照组中,三项肿瘤标志物联检的AUC(0.866)均高于三项肿瘤标志物单一检查的AUC,无论在结直肠癌-正常对照组中还是结直肠癌-良性结直肠病中CEA的AUC都高要于CA199或CA50。结论:CEA在诊断结直肠癌有一定的临床应用价值,CA50联合CEA检测可为临床鉴别良恶性结直肠病提供有效的参考,而CEA、CA199及CA50三者联检对鉴别良恶性结直肠病的意义不大。作为一种统计手段,Logistic回归可改善诊断的灵敏度和特异性。 顾平 黄钢 韩源关键词:结直肠癌 癌胚抗原 A549肺腺癌多细胞球体放射抗拒细胞的化疗药物敏感性 被引量:3 2006年 目的探讨A549肺腺癌多细胞球体放射抗拒细胞的化疗药物敏感性。方法放射抗拒细胞为6MV高能X线照射25Gy后的第10代再增殖细胞,对照组为A549亲代细胞和MCF7长春新碱耐药(MCF7VCR)细胞。6种化疗药物分别为顺铂(DDP)、长春花碱酰胺(VDS)、5氟尿嘧啶(5FU)、羟基喜树碱(HCP)、丝裂霉素(MMC)和阿霉素(ADM),异搏定(VPL)作为耐药逆转剂。MTT比较药敏试验效果,RT PCR检测mdr1和MRP耐药基因表达。结果A549亲代和放射抗拒细胞对DDP耐药,对VDS、5FU、HCP、MMC和ADM敏感,VPL的抑制率分别为98%和25%(P<0.001)。未加药组A549亲代细胞的A值为放射抗拒细胞的2倍(P<0.001)。MCF7VCR细胞对DDP和MMC耐药,对VDS、5FU、HCP和ADM较敏感,VPL的抑制率80%。A549所有细胞的mdr1β2MG为0,MRPβ2MG为0.7左右,MCF7VCR分别为35和4.36。结论A549放射抗拒细胞的化疗药物敏感性无明显变化,对VPL的敏感性减低不能以mdr1和MRP耐药基因的表达水平来解释,可能与某种膜蛋白的变化,以及细胞增殖能力减低有关。与化疗引起的多药耐药不同,对于放射抗拒细胞,VPL可能不是一个理想的耐药逆转剂,应寻求新的生物制剂联合化疗药物治疗放射抗拒复发肿瘤。 史德刚 石根明 黄钢关键词:肺腺癌 多细胞球体 抗拒 化疗药物敏感性 AFP时间分辨荧光免疫分析试剂盒的研制及其临床应用 被引量:6 2006年 目的:研制AFP时间分辨荧光免疫分析(TrFIA)试剂盒。方法:采用双抗体夹心法建立AFP-Tr-FIA试剂盒,对反应条件进行优化,并对试剂盒的各项指标进行评价。结果:抗体包被浓度确定为5μg/m l,铕标抗体最佳稀释比为1 50。试剂盒的线性范围为1ng/m l^1210ng/m l,灵敏度为0.41ng/m l,准确度高,批内和批间变异系数分别5.1%~8.8%,6.7%~11.9%。与CA199、CA125、CEA和白蛋白无交叉反应。破坏试验表明试剂在37℃可稳定7d。收集50例肝癌患者和370例健康人血清,用本试剂盒测得肝癌患者血清AFP浓度(557.3ng/m l±322.1ng/m l)显著高于健康人(6.5ng/m l±5.4ng/m l)(P<0.001)。370例正常人血清标本测试该试剂盒的正常参考范围为(0~12.0)ng/m l。本试剂盒检测结果与商用W allac AFP试剂盒检测结果相关系数为0.9988。结论:试剂盒各项指标达到规定的要求,可用于临床血清AFP检测。 盛世乐 黄钢 王青 高菊美 朱翠英 袁济民关键词:甲胎蛋白 肝癌 时间分辨荧光免疫分析 肿瘤标志物在卵巢癌中的应用 被引量:6 2007年 以肿瘤抗原125为重点,综述肿瘤标志物在卵巢癌筛查、诊断、指导治疗、估计预后等方面的应用,简要介绍其他尚处于评估或研究阶段的卵巢癌肿瘤标志物,包括激肽释放酶家族、骨桥蛋白、prostasin、溶血磷脂酸、肿瘤相关胰蛋白酶抑制剂、肿瘤相关血清抗原、人附睾蛋白4、蛋白激酶CL。 顾平 盛世乐 黄钢关键词:卵巢肿瘤 肿瘤标志物 CA125 CA19-9时间分辨荧光免疫分析方法建立及EDTA处理血浆对其测定结果的影响 被引量:3 2007年 建立双抗体夹心法CA19-9时间分辨荧光免疫分析(TRFIA),探讨抗凝剂EDTA对其检测结果的影响,并对本法的稳定性和与Abbort Axsym测定结果的相关性等指标进行评价.分别按一步法和二步法对CA19-9进行测定,并比较血清标本和用EDTA处理的血浆标本对CA19-9结果的影响.结果表明本试剂盒的线性范围为0.19~600U/mL,灵敏度为0.19U/mL,批内和批间CV(%)分别为1.1%~5.4%,1.2%~5.6%.对3230份标本用本试剂盒检测与Abbort Axsym试剂盒检测结果相关系数为0.931.一步法中EDTA处理血浆标本的检测结果明显低于血清标本,二步法中两者无显著性差异.本试剂盒各项指标达到规定的要求,可用于临床血清CA19-9检测.使用中采用血清或血浆标本时要用二步法进行测定,以减少EDTA对结果的影响. 王青 盛世乐 黄钢关键词:时间分辨荧光免疫分析 CA19-9 EDTA VEGF-TrFIA及其在结直肠癌中的应用 被引量:4 2006年 目的:研制VEGF时间分辨荧光免疫分析(TrFIA)试剂盒。方法:采用双抗体夹心法建立VEGF-TrFIA试剂盒,并对试剂盒的各项指标进行评价。结果:试剂盒的线性范围为1pg/m l^400pg/m l,灵敏度为0.21pg/m l,准确度高,批内和批间变异系数分别为1.1%~8.4%,2.97%~11.7%。与CA199,CA215,AFP,CEA和白蛋白无交叉反应。收集30例结直肠癌患者和37例健康人血清,用本试剂盒测得结直肠癌患者血清VEGF浓度(357.3±22.1)pg/m l显著高于健康人(71.5±9.1)pg/m l(P<0.0001)。本试剂盒检测结果与商用ELISA试剂盒检测结果相关系数为0.993。结论:试剂盒各项指标达到规定的要求,可用于临床血清VEGF检测。 盛世乐 鲍时华 黄钢 朱翠英 袁济民关键词:血管内皮生长因子 时间分辨荧光免疫分析 结直肠癌