绍兴市科技计划项目(2005141)
- 作品数：6 被引量：13H指数：3
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- 相关机构：绍兴市人民医院浙江大学更多>>
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- 成体干细胞向肝细胞分化
- 2006年
- 成体干细胞跨越胚层限制分化为其他胚层来源的细胞,对揭示不同胚层细胞间相互分化的生物学意义和机制具有重要学术价值,并可以为临床细胞移植治疗开辟新的途径,从而成为当前研究的热点之一。综述了近年来肝源性卵圆细胞、成肝细胞、骨髓源干细胞和其他成体干细胞跨越分化为肝细胞的研究现状与进展,以及卵圆细胞、成肝细胞等的分离鉴定,表面标志、生物学特征和跨越分化机制,并对成体干细胞在肝脏疾病细胞治疗上的应用前景作了展望。
- 董学君张国荣陈烨项黎新潘若浪邵健忠
- 关键词：成体干细胞肝细胞卵圆细胞
- 损伤肝脏条件培养液体外诱导小鼠骨髓单个核细胞分化为肝细胞的研究被引量：4
- 2006年
- 目的探索小鼠骨髓单个核细胞(BM MNCs)体外诱导分化为肝细胞的可行性及方法。方法将四氯化碳注射的小鼠肝脏进行培养,收集上清液,用于诱导BM MNCs分化。观察细胞分化中的形态变化;在1、7、14、21 d时,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫荧光反应检测甲胎蛋白(AFP)、细胞角蛋白18(CKl8)、CK19、肝细胞核因子3β(HNF3β)、酪胺酸胺基转移酶(TAT)和白蛋白(ALB)基因的表达,过碘酸Schiff氏剂反应(PAS)检测细胞糖原合成。结果诱导组细胞呈肝细胞样变化;RT-PCR检测,第7天可见AFP、CK19基因表达,第14天AFP表达增强,第21天减弱;第14天可见ALB、CK18、HNF3B基因表达,且持续到第21天;第21天TAT表达。免疫荧光反应结果显示,第21天ALB、CK18、CK19、AFP表达呈阳性;同时PAS糖原合成反应也出现阳性。结论BM MNCs在损伤肝脏条件培养液诱导下可跨越分化为肝细胞,该方法的建立对分化机制研究有重要意义。
- 董学君陈烨陈小永张国荣邵健忠项黎新
- 关键词：骨髓肝细胞
- 细胞因子诱导小鼠骨髓间充质干细胞跨越分化肝细胞的研究被引量：3
- 2008年
- 目的探索骨髓间充质干细胞（MSCs）体外跨越分化为肝细胞的诱导体系。方法从单核细胞中分离间充质干细胞，用添加20ng／ml HGF、10ng／ml FGF-4、10ng／ml OSM和10％NBS的IMDM培养液诱导间充质干细胞向肝细胞分化。结果经细胞因子诱导的细胞出现肝细胞样变化，随诱导时间延长体积逐渐增大、形态往上皮样转变，胞浆丰富，出现双核或多核细胞。RT—PCR和免疫荧光检测结果显示，AFP在诱导初期表达，在诱导后期表达下降；CK18、ALB和TAT的表达与诱导时间呈线性关系，第20天达到表达高峰；诱导20d后免疫荧光检测，AFP、CK18、ALB和TAT均为阳性；诱导20d细胞的PAS糖原合成反应呈阳性，即具备糖原合成和储存的肝细胞特有功能。结论HGF、FGF4和OSM三种细胞因子组合，可诱导小鼠间充质干细胞向肝细胞分化，该结果为间充质十细胞跨越分化肝细胞的分子机制探讨和临床应用打下了基础。
- 董学君陈烨邵健忠张国荣项黎新
- 关键词：间充质干细胞肝细胞分化肝细胞生长因子
- 损伤肝脏条件培养液体外诱导小鼠骨髓间充质干细胞分化为肝细胞被引量：6
- 2007年
- 目的探索损伤肝脏条件培养液体外诱导小鼠骨髓间充质干细胞（MSCs）分化为肝细胞的可行性及方法。方法培养注射CCl4所致的损伤小鼠肝脏组织块,收集条件培养液,进行MSCs诱导分化。通过形态学观察、RT-PCR、免疫荧光反应和过碘酸Schiff反应鉴定分化细胞。结果诱导组细胞呈肝细胞样变化。RT-PCR检测显示：AFP基因第5天开始表达,第10天表达增强,此后表达减弱；细胞角蛋白18和Alb基因第10天开始表达,持续到第20天；第20天检测到酪氨酸氨基转移酶基因表达。免疫荧光反应显示诱导20 d的细胞AFP、细胞角蛋白18、Alb表达阳性,诱导20 d细胞过碘酸Schiff反应呈阳性。结论MSCs在损伤肝脏条件培养液诱导下可分化为肝细胞。
- 张国荣董学君陈烨邵健忠项黎新潘若浪
- 关键词：肝细胞骨髓间充质干细胞细胞分化肝损伤
- 三种细胞因子组合诱导小鼠骨髓单个核细胞分化为肝细胞被引量：2
- 2006年
- 目的探索小鼠骨髓来源的单个核细胞向肝细胞分化的诱导条件。方法通过密度梯度离心的方法获得小鼠骨髓来源的单个核细胞;在含有100g/L新生牛血清的IMDM培养液中添加细胞因子HGF20ng/ml、FGF-4 10ng/ml和OSM10ng/ml,诱导骨髓来源的单个核细胞向肝细胞分化。结果小鼠骨髓单个核细胞在3种细胞因子的诱导下,随着时间的延长,体积逐渐增大、形态上向上皮样细胞转变,胞浆丰富,出现双核或多核细胞;半定量RT-PCR的结果显示,甲胎蛋白(AFP)和细胞角蛋白19(CK19)的表达量在诱导初期首先增加,在诱导后期逐渐减少,而白蛋白(ALB)、细胞角蛋白18(CK18)以及酪胺酸胺基转移酶(TAT)的表达与诱导时间呈线性关系;免疫荧光检测诱导3周后的细胞,AFP、CK19、CK18和ALB均为阳性表达;诱导3周的细胞PAS糖原合成反应呈阳性,说明已经具备糖元合成和储存这一肝细胞的特征性功能。结论培养液中添加3种细胞因子(HGF、FGF-4和OSM)组合可以诱导小鼠单个核细胞向肝细胞分化。
- 董学君陈烨张国荣邵健忠项黎新
- 关键词：抗原分化肝细胞
- 三种细胞因子组合诱导小鼠骨髓单个核细胞跨越分化肝细胞的研究
- 2006年
- 目的探索诱导小鼠骨髓来源单个核细胞向肝细胞分化的诱导条件。方法首先通过密度梯度离心的方法获得小鼠骨髓来源单个核细胞,用添加20 ng/ml HGF、10 ng/ml FGF-4、10 ng/ml OSM和10%NBS的IMDM培养液诱导这些细胞向肝细胞分化。结果小鼠单个核细胞在三种细胞因子的诱导下,随诱导时间延长逐渐体积增大、形态上向上皮样转变,胞浆丰富,出现双核或多核细胞;半定量RT-PCR的结果显示,AFP和CK19的表达量在诱导初期首先增加,并且在诱导后期逐渐减少。而CK18、ALB和TAT的表达与诱导时间呈线性关系;免疫荧光检测诱导3周后的细胞,AFP、CK19、CK18和ALB均为阳性表达;诱导3周的细胞PAS糖原合成反应呈阳性,说明已经具备糖元合成和储存这一个肝细胞的特征性功能。结论组合HGF、FGF-4和OSM三种细胞因子可以诱导小鼠单个核细胞向肝细胞分化。
- 董学君陈烨张国荣邵健忠项黎新
- 关键词：单个核细胞肝细胞HGF
