国家重点基础研究发展计划(2001CB509900)
- 作品数:2 被引量:17H指数:2
- 相关作者:华学峰徐琳洪良庆黄正宇缪斌更多>>
- 相关机构:中山大学附属第三医院中山大学第四军医大学更多>>
- 发文基金:国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 四种细胞因子组合从小鼠骨髓细胞体外诱导优势不成熟CD8a+DC被引量:11
- 2008年
- 【目的】探索从小鼠骨髓细胞体外诱导大量优势不成熟CD8a+DC(DC2)的新方法。【方法】取小鼠骨髓细胞,采用GM-CSF5ng/mL,IL-420ng/mL,Flt3L25ng/mL,SCF100ng/mL4种细胞因子组合,37℃,5%CO2体外培养诱导。第3、7、16天流式细胞术4色荧光标记法分析细胞表型,细胞计数分析总细胞产量,采用电镜、免疫荧光及相差摄影观察细胞形态。【结果】小鼠骨髓细胞经GM-CSF+IL-4+Flt3L+SCF诱导第3天在CD11c+的DC细胞群中可产生97.09%的CD8a+优势DC2细胞(占总细胞的34.6%),其中CD8a+MHCⅡ-的不成熟DC占61.77%;随培养时间延长比例下降,但培养第16天时CD8a+的不成熟DC仍占优势。总细胞计数分析显示随培养时间延长,细胞总数下降。电镜、免疫荧光及相差摄影等形态学检查显示所诱导的DC呈现典型树突状形态特征。【结论】GM-CSF+IL-4+Flt3L+SCF可以体外快速诱导小鼠骨髓细胞产生大量优势不成熟CD8a+DC,是体外制备不成熟DC2的一种较好的新方法。
- 纳宁罗云洪良庆欧阳斌黄正宇缪斌华学峰杨培生徐琳
- 关键词:骨髓细胞
- ncRNA候选基因spt1的克隆与初步分析被引量:6
- 2004年
- 在用suc2信号肽捕获系统对小鼠胚胎cDNA文库筛选的过程中 ,反复获得一个相同的强阳性克隆 ,命名为spt1。对该克隆的序列分析表明 :插入序列由 6 97bp组成 ,6个开放阅读框中共有 37个启始密码子 (ATG)和 80个终止密码子 (TGA、TAG、TAA) ;没有较大的有意义开放读框存在。经BLAST分析 ,结果显示该序列定位于小鼠第17号染色体长臂 ,没有发现同源基因。Northernblot和RT PCR分析表明 ,该序列仅表达于小鼠卵巢组织 ,全长约4 5~ 5 0kb。酵母转化和序列截短实验提示 ,该序列能够介导蔗糖转换酶向细胞外的分泌。因此 ,推测spt1很有可能是一个新的非编码RNA的一部分 ,参与蛋白质的分泌过程。
- 孙强黄红艳韩骅
- 关键词:非编码RNA蛋白质分泌