国家重点基础研究发展计划(G1999016005)
- 作品数：24 被引量：397H指数：13
- 相关作者：蒋湘宁陆海卢存福张守攻张建国更多>>
- 相关机构：北京林业大学中国林业科学研究院北京农学院更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金高等学校骨干教师资助计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学医药卫生化学工程更多>>
- 反义4CL1基因转化烟草调控木质素生物合成被引量：16
- 2003年
- 将控制木质素生物合成的关键限速酶 (香豆酸CoA连接酶 ,4CL)基因 4CL1反向插入植物表达载体pBI12 1构建表达载体 ,通过农杆菌叶盘法介导转化烟草 ,获得一批转基因抗性植株 .经PCR检测 ,证明 4CL1基因已成功反义转入到烟草植株中 .通过对转基因植株和对照植株的纤维素和木质素含量的对比分析 ,发现反义 4CL1基因转化植株的纤维素含量比对照提高了 11 4 % ,而木质素含量比对照降低了 19 1% .
- 杨雪萍陆海陈雪梅蒋湘宁
- 关键词：转基因烟草木质素纤维素
- 牡丹花粉管通道形成时间初探
- 以牡丹品种“凤丹白”为研究材料,人工授粉后于不同时间剪除柱头,根据胚珠发育状况初步探明了牡丹花粉管通道形成所需的时间,结果表明,授粉后1 h,牡丹已形成花粉管通道。为牡丹花粉管通道法转基因技术体系的建立奠定了一定的理论基...
- 范丙友高水平王占营
- 关键词：花粉管通道
- 文献传递
- 重组毛白杨4-香豆酸:辅酶A连接酶的酶学性质研究被引量：5
- 2007年
- 4-香豆酸：辅酶A连接酶（4CL）催化维管植物木质素生物合成羟基肉桂酸及其衍生物辅酶A酯化合物的形成。该文对我国乡土树种毛白杨重组Pt4CL1的酶学性质进行了初步研究,结果表明：Pt4CL1在高温下不稳定,10%甘油可部分提高其温度稳定性;Pt4CL1酶学反应最适温度为40℃;Pt4CL1在pH 3.0～8.0范围内比较稳定,当pH大于8.0时其Pt4CL1的稳定性下降;最适反应pH为8.0;Mg^2＋是Pt4CL1最适激活剂,EDTA可抑制其活性;Tris-HCl的最适浓度为0.2 mol/L;4-香豆酸是Pt4CL1的最适底物。
- 范丙友陆海蒋湘宁
- 关键词：4-香豆酸:辅酶A连接酶毛白杨酶学特性
- 干旱胁迫下胡杨生理适应机制的研究被引量：15
- 2006年
- 胡杨具有很强的抗旱能力,是生长在沙漠地区少有的乔木树种,在我国主要分布于新疆的塔克拉玛干沙漠.为了更深入阐明胡杨的抗旱机制,我们对生长在新疆塔克拉玛干沙漠的天然胡杨林进行了实地调查、现场采样和室内相关实验.结果表明,在干旱胁迫下,胡杨叶片的蒸腾作用减少,气孔阻力增加.严重干旱胁迫后,叶片中的K+和Ca2+含量增加,分别为对照的1·43倍和2·99倍,而Mg2+和Na+变化不明显.和对照相比,中度干旱胁迫下胡杨叶片质膜H+--ATPase的质子转运活性没有差别,但严重干旱胁迫则使其活性降低,质膜H+--ATPase转运质子的能力下降.以上结果表明,胡杨可通过增加气孔阻力来降低胡杨叶片的蒸腾作用,选择性的吸收无机离子以及降低ATP消耗来适应干旱环境的胁迫.
- 杨永青王文棋Erio A.Ottow兰海燕张富春Andrea Polle蒋湘宁
- 关键词：抗旱蒸腾作用离子含量
- GRP1.8融合反义4CL1基因调控烟草木质素生物合成被引量：29
- 2003年
- 该研究成功地将从刺槐 (Robiniapseudoacacia)中克隆得到的定位于形成层表达的GRP1 8启动子 ,分别与GUS报告基因及从毛白杨 (Populustomentosa)中克隆的香豆酸连接酶 (4CL1)基因连接构建成GRP1 8 GUS和GRP1 8 anti 4CL1融合基因 ,转基因于烟草植物 .经组织化学检测分析 ,GUS基因成功地由GRP1 8启动子驱动定位于形成层表达 ;融合基因GRP1 8 anti 4CL1的表达明显地改变了转基因烟草植株的木质素和纤维素的含量和比例 .转基因烟草的木质素含量较对照平均降低了 13 7% ,而转基因植株的纤维素含量较对照升高了 15 6 % .
- 赵艳玲陆海陶霞娟陈雪梅蒋湘宁
- 关键词：转基因烟草木质素
- 植物抗冻蛋白及其基因工程研究的新进展被引量：17
- 2002年
- 抗冻蛋白 (Antifreezeproteins,AFPs)自 2 0世纪 6 0年代被发现以来 ,研究对象先后从极区鱼类、昆虫转移到植物材料上 .目前已有 6种植物的AFPs被提纯 ,即为欧白英中的 6 7kD(Sd6 7)的糖蛋白 ;冬黑麦中的 5条具有高抗冻活性的多肽 ,分别为 16 ,2 5 ,32 ,34,36kD ;沙冬青中 4 0kD的afp ;桃树中 5 0kD的PCA6 0 ;胡萝卜中的 36kD抗冻多肽及冬麦草中 11 77kD的热稳定抗冻蛋白 .这些AFPs在分子量、氨基酸组成及同源性上都不尽相同 .由于AFPs可以通过降低冰点、抑制重结晶等方式来提高植物的抗寒性 ,所以植物AFPs基因克隆及转化的成功 ,为提高冷敏感经济作物及农作物的抗寒性提供了新的技术途径 .
- 陈曦卢存福蒋湘宁王沙生
- 关键词：植物抗冻蛋白基因工程
- 超高产水稻生理育种研究进展被引量：20
- 2004年
- 综述了超高产水稻根系活力及其影响因子,光合作用机理及其产量实现过程,茎的转运和调节机制等方面的研究进展。提出了水稻超高产生理育种要加强产量及其相关生理性状在细胞水平生理过程和形态水平目标性状的构成相互关联的研究。在分子水平上建立实现水稻高产优势的生理学基础,利用生物信息学的研究手段,从分子到群体不同生理层次相互依存关系,通过计算机模拟仿真,逐步实现水稻超高产设计数字化生理育种。
- 高宇田恬
- 关键词：超高产水稻生理育种根系活力光合作用计算机模拟仿真
- 毛白杨4-香豆酸:辅酶A连接酶可溶性原核表达及活性检测被引量：21
- 2006年
- 为了进一步研究毛白杨4CL1的酶学特性，构建了毛白杨4CL1原核表达载体pQE31-4CL1．经IPTG诱导在大肠杆菌中表达了毛白杨4CL1蛋白，SDS-PAGE电泳分析表明该新蛋白的分子量为60kD，与预测值一致．对毛白杨4CL1蛋白在大肠杆菌中的表达体系进行了优化，确定IPTG的最佳浓度为0．4mmol／L，诱导时的菌液密度OD600为0．3-0．5，最佳表达时间为2h．37℃下表达的4CL1融合蛋白以包涵体的形式存在，没有生物学活性．当表达温度从37℃降低为28℃时，可溶性的有生物学活性的毛白杨4CL1蛋白诱导表达获得成功，表达量达11％．以耦联有Ni^2＋-NTA的琼脂糖为亲和层析填料，金属鳌合亲和柱层析一步纯化获得了电泳纯4CL1蛋白，4CL1蛋白对5种底物的比活性分别为：4-香豆酸3949．0pkat／mg，咖啡酸2214．0pkat／mg，阿魏酸715．0pkat／mg，肉桂酸84．9pkat／mg，而对芥子酸没有生物活性．
- 范丙友胡诗宇陆海蒋湘宁
- 基因转录调控相关数据库集成系统及其应用被引量：2
- 2004年
- 通过互联网访问的有关基因转录调控的数据库集成系统及其应用 ,包括调控区 (3’和 5’调控区、内显子和外显子调控区等 )、调控单元 (启动子 ,增强子 ,沉默子等 )和转录因子结合位点相关数据库及其数据库系统的性质、组成和功能。也介绍了这些数据库和系统的查询和搜索方法以及相关开发的程序工具。这些生物信息学资源对于从事生物信息学、分子生物学、遗传工程、基因功能、生物技术、代谢工程、药物设计、病理学和药理学研究的机构及人员在教学研究方面具一定的参考价值和帮助。
- 苗福蒋湘宁
- 关键词：基因转录调控数据库
- 维管植物4-香豆酸:辅酶A连接酶(4CL)研究进展被引量：21
- 2007年
- 在大多数维管植物中4CL以基因家族形式出现。4CL基因成员在植物组织中差异表达,参与不同的苯丙烷类衍生物的生物合成。4CL基因的表达受发育调控,其表达还能被环境因子激活,如各种伤害、病原菌侵染、紫外线辐射等。4CL具有高度趋异的底物偏好性及底物特异性,决定4CL同工酶底物特异性的因素可能是结合沟的空间限制而不是底物和多肽链之间的特异性相互作用。在4CL氨基酸序列中存在2个保守的肽基序(motif),肽基序BoxⅠ,SSGTTGLPKGV,肽基序BoxⅡ,GEICIRG。应用反义技术已经成功地将4CL基因用于调控模式植物拟南芥、烟草及木本植物美洲山杨、毛白杨木质素的生物合成。未来的研究应侧重以下方向:应用多种技术分离、鉴定出更多木本植物的4CL基因;通过生物技术来增加木本植物木质素含量的研究也值得期待;建立4CL蛋白结晶体系,从原子水平解析4CL蛋白的结构,从而从根本上阐明4CL蛋白结构与功能之间的关系。
- 范丙友陆海蒋湘宁
- 关键词：4-香豆酸维管植物
