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国家自然科学基金(50603012)
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李宗海
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2007
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一种靶向性阳离子多肽载体的表达纯化
2007年
目的:原核表达靶向性阳离子多肽(KH)20-EGF,并对其DNA包装能力进行检验。方法:构建pET28a-(KH)20-EGF原核表达载体。进行酶切和测序鉴定。转化BL21(DE3)后,经过IPTG诱导表达和NTA树脂纯化得到粗提蛋白产物,SDS-PAGE和Western blot鉴定后,将蛋白与质粒DNA混合,用于凝胶阻滞实验分析。结果:重组(KH)20-EGF的产量约为300μg/L。SDS-PAGE和Western blot表明该蛋白的凝胶迁移有些滞后;凝胶阻滞试验发现(KH)20-EGF对质粒DNA的迁移有阻滞作用。结论:成功表达非病毒载体(KH)-EGF并确认其DNA包装能力。
王海
王华茂
李锦军
石必枝
李宗海
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基因治疗
原核表达纯化
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