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人DNA MTase反义基因转染对肝癌细胞DNA MTase基因mRNA表达的影响被引量：6: 2002年; 目的　观察人DNAMTase反义基因转染对肝癌细胞系SMMC 772 1内源性DNAMTase基因mRNA表达的影响。方法　将构建的包含正、反义DNAMTase基因片段的真核表达载体用脂质体法将其转染入肝癌细胞系SMMC 772 1 ;采用RT PCR法观察DNAMTase基因mRNA表达变化。结果　PCR法扩增外源性NeoR基因证实用脂质体法成功将重组载体转染入细胞 ;RT PCR法检测DNAMTase基因mRNA表达 ,显示转染反义DNAMTase基因片段的SMMC 772 1细胞中DNAMTase基因mRNA表达下调。结论　人DNAMTase反义基因转染是一种有效、可靠的抑制肝癌细胞系SMMC 772 1DNAMTase基因表达的方法。它为更多了解DNAMTase在肝癌发生。; 张宏肖文华梁后杰房殿春杨仕明罗元辉; 关键词：DNA甲基转移酶反义DNA 肝癌细胞系

人DNA MTase反义基因转染诱导E-Cadherin基因启动子区域去甲基化被引量：2: 2002年; 目的　　观察人DNAMTase反义基因转染对肝癌细胞系SMMC 772 1E Cadherin基因启动子区域甲基化状态的影响。方法　　采用脂质体法将已构建的包含正、反义DNAMTase基因片段的真核表达载体转染入肝癌细胞系SMMC 772 1;用甲基化特异的PCR法检测E Cadherin基因启动子区域甲基化状态的改变。结果　　PCR法扩增外源性NeoR基因证实用脂质体法成功将重组载体转染入细胞 ;甲基化特异的PCR法检测显示转染反义DNAMTase基因片段的SMMC 772 1细胞中的E Cadherin基因启动子区域呈现去甲基化状态。结论　　人DNAMTase反义基因片段可诱导E Cadherin基因启动子区域去甲基化 ;实验结果有助于进一步了解DNAMTase在肝癌发展中的作用。; 张宏肖文华梁后杰房殿春杨仕明罗元辉; 关键词：反义DNA E-CADHERIN 去甲基化 SMMC-7721

人DNA MTase反义基因转染对诱导肝癌SMMC7-721细胞凋亡的影响被引量：4: 2002年; 目的　观察人DNAMTase反义基因转染对肝癌细胞系SMMC 772 1凋亡的影响。方法　采用脂质体法将构建的包含正、反义DNAMTase基因片段的真核表达载体转染入肝癌细胞系SMMC 772 1;采用MTT法绘制生长曲线 ;流式细胞法和原位末端标记法检测细胞凋亡改变。结果　PCR法扩增外源性NeoR基因证实用脂质体法成功将重组载体转染入细胞 ;生长曲线显示转染反义DNAMTase基因片段的SMMC 772 1细胞增殖速度减慢 ;流式细胞法测得其凋亡率由 3 1%增加到 13 5 %。末端标记法也显示其凋亡指数增加。结论　人DNAMTase反义基因转染可诱导肝癌细胞系SMMC 772 1凋亡。; 张宏肖文华梁后杰房殿春杨仕明罗元辉; 关键词：DNA甲基转移酶反义DNA 肝癌细胞系细胞凋亡肝癌 SMMC-7721

人DNA MTase反义基因转染诱导E-钙黏附蛋白高表达被引量：8: 2002年; 目的　观察人DNAMTase反义基因转染后肝癌细胞系SMMC 772 1E 钙黏附蛋白表达的变化。方法　用基因重组技术构建包含人DNAMTase正、反义基因片段的真核表达载体 ;采用脂质体法将其转染入肝癌细胞系SMMC 772 1;采用RT PCR法观察DNAMTase基因mRNA、E 钙黏附蛋白基因mRNA表达变化 ;以甲基化特异的PCR法检测E 钙黏附蛋白基因启动子区域甲基化状态的改变 ;以免疫组化和流式细胞法检测E 钙黏附蛋白表达变化。结果　正、反义真核表达载体构建成功并转染入SMMC 772 1细胞 ,其中DNAMTase基因mRNA表达减低 ,E 钙黏附蛋白基因mRNA表达上调 ,E 钙黏附蛋白基因启动子区域呈现去甲基化状态 ,E 钙黏附蛋白表达上调。结论　抑制DNAMTase基因的表达可使肝癌SMMC 772 1细胞中E 钙黏附蛋白基因启动子区域去甲基化和表达增加 ;DNAMTase通过诱导启动子区域高甲基化 ,可使E; 张宏肖文华梁后杰房殿春杨仕明罗元辉; 关键词：反义DNA 甲基转移酶 E-钙黏附蛋白基因转染

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国家自然科学基金(39870344)