重大基础研究前期研究专项(2004-CCA02400)
- 作品数:1 被引量:0H指数:0
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- D2蛋白酶间接ELISA检测方法的建立
- 2010年
- 目的建立D2蛋白酶间接ELISA检测方法,为D2蛋白酶的进一步研究及应用奠定基础。方法以纯化的D2蛋白酶为抗原,免疫新西兰白兔,制备D2蛋白酶多克隆抗体,建立D2蛋白酶间接ELISA检测方法,并进行验证及初步应用。结果D2蛋白酶间接ELISA检测方法的最佳反应条件为:一抗稀释度为1∶64000,二抗稀释度为1∶80000,抗原稀释度为1∶100,饱和包被浓度为1160ng/ml,封闭剂为10%胎牛血清。标准曲线的线性检测范围为18~1160ng/ml。该方法准确性、重复性良好,特异性强、敏感性高,与琼脂扩散试验检测结果的符合率为95.5%。结论已建立了D2蛋白酶间接ELISA检测方法,可用于D2蛋白酶含量的检测。
- 苏洁王斌鲁晓晴赵巍闫志勇钱冬萌丁守怡宋旭霞杨丽刘海燕
- 关键词:间接ELISA多克隆抗体