国家自然科学基金(3113044)
- 作品数：5 被引量：16H指数：3
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- 南方水稻黑条矮缩病毒P7-1蛋白与白背飞虱Actin蛋白的互作
- 南方水稻黑条矮缩病毒(Southern rice black-streaked dwarf virus,SRBSDV)编码的P7-1蛋白能在白背飞虱(Sogatellafurcifera)体内形成包裹病毒的小管结构。研究...
- 任堂雨贾东升魏太云
- 关键词：南方水稻黑条矮缩病毒酵母双杂交
- NSvc4和CP蛋白与水稻条纹病毒的致病相关被引量：4
- 2013年
- 【目的】以水稻条纹病毒(Rice stripe virus,RSV)编码的NSvc4蛋白和CP蛋白的致病功能鉴定为切入点,研究RSV的致病机理。【方法】通过农杆菌介导在本氏烟中对RSV编码的6个蛋白进行细胞定位。采用双分子荧光互补(Bimolecular fluorescence complementation,BiFC)技术鉴定NSvc4蛋白与其余5个蛋白间的互作关系,并用酵母双杂交体系(Yeast two-hybrid,YTH)对NSvc4与CP蛋白间的互作再次验证。利用马铃薯X病毒(Potato virus X,PVX)系统在本氏烟叶片研究NSvc4蛋白和CP蛋白的致病性,采用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)技术验证致病性鉴定结果。【结果】RSV NSvc4蛋白能与CP蛋白互作,且蛋白复合体在本氏烟细胞中能够定位到叶绿体。致病性鉴定显示,PVX-RSV-NSvc4侵染的本氏烟表现为花叶症状;PVX-RSV-CP能够在侵染叶上诱导花叶症状,但是系统叶却恢复健康;PVX-RSV-NSvc4与PVX-RSV-CP共侵染的本氏烟和PVX-RSV-NSvc4CP侵染的本氏烟的侵染叶、系统叶均表现出了严重病症。Real-time PCR结果显示,PVX载体在各侵染本氏烟中的累积量均较低,而RSV CP和NSvc4基因的表达量与本氏烟的发病症状紧密相关。【结论】NSvc4和CP蛋白均有致病性。CP蛋白的致病力不能持久,但是与NSvc4蛋白互作后具有持久致病力,表明二者协同在RSV致病过程中发挥作用。
- 袁正杰贾东升吴祖建魏太云谢联辉
- 关键词：水稻条纹病毒
- RNA干扰途径调控南方水稻黑条矮缩病毒在介体白背飞虱体内的持久侵染被引量：3
- 2015年
- 南方水稻黑条矮缩病毒(SRBSDV)由介体白背飞虱以持久增殖型方式传播,但有关病毒在介体内高效增殖的机制仍不明确.RNA干扰(RNAi)是昆虫保守的抗病毒免疫途径.为了探索SRBSDV在介体白背飞虱体内的持久增殖是否受到RNAi抗病毒免疫途径的调控,本研究采用小分子RNA深度测序发现SRBSDV侵染白背飞虱培养细胞后诱导产生病毒来源的主要长度为21和22 nt的小分子RNA,暗示病毒侵染可激活RNAi反应.在白背飞虱及其培养细胞中通过dsR NA处理干扰RNAi途径中的关键组分Dicer2和Argonaute2基因表达后,SRBSDV的侵染率和积累量显著提高,带毒昆虫的存活率下降、寿命减短.因此,RNAi途径具有调控SRBSDV在介体白背飞虱体内的持久侵染、控制植物病毒在介体昆虫内过度积累从而避免病毒对昆虫造成不利影响的作用.
- 兰汉红张玲华刘宇艳陈红燕贾东升陈倩魏太云
- 关键词：南方水稻黑条矮缩病毒RNA
- 白背飞虱体内RNA干扰技术体系的建立被引量：3
- 2013年
- 应用双链RNA(dsRNA)诱导的RNA干扰(RNAi)技术原理,将体外合成的源于白背飞虱肌动蛋白(Actin)基因的dsRNA通过膜饲喂法饲喂其2龄若虫.通过优化人工饲料、dsRNA浓度和饲喂时间,成功地干扰了白背飞虱Actin基因的表达,并引发白背飞虱的死亡,从而建立了白背飞虱体内的RNAi体系.
- 贾东升任堂雨陈红燕魏太云谢联辉
- 关键词：白背飞虱RNA干扰ACTIN基因双链RNA
- 病毒被限制在昆虫中肠是灰飞虱不属于南方水稻黑条矮缩病毒有效介体的原因
- 近年来,南方水稻黑条矮缩病毒(Southern rice black-streaked dwarf virus,SRBS-DV)在我国南方稻区大面积发生,给农业生产带来了巨大的损失.SRBSDV属于呼肠孤病毒科斐济病毒属...
- 贾东升陈红燕毛倩卓刘启飞魏太云
- 关键词：南方水稻黑条矮缩病毒白背飞虱灰飞虱病毒复制
- 南方水稻黑条矮缩病毒P7-1管状结构蛋白参与病毒的扩散
- 南方水稻黑条矮缩病毒(southern riee black streaked-dwarf virus,SRBSDV)属于呼肠孤病毒科(Reoviridae)斐济病毒属(Fijivirus)的一个暂定种,是近年来危害我国...
- 贾东升毛倩卓郑胜兰马元元陈红燕魏太云
- 关键词：南方水稻黑条矮缩病毒扩散
- 水稻黑条矮缩病毒在灰飞虱消化系统的侵染和扩散过程被引量：3
- 2014年
- 水稻黑条矮缩病毒(Rice black-streaked dwarf virus,RBSDV)由介体灰飞虱(Laodelphax striatellus Fallén)以持久增殖型方式传播,其编码的P9-1蛋白是形成病毒复制和子代病毒粒体装配的场所—病毒原质(viroplasm)的组分之一。为了明确RBSDV在介体昆虫体内的侵染循回过程,本研究通过原核表达的P9-1蛋白免疫注射兔子制备P9-1抗体,应用免疫荧光标记技术研究P9-1在饲毒后不同时期的介体灰飞虱体内的定位。共聚焦显微镜观察到饲毒后3 d,P9-1出现在介体中肠的少数上皮细胞内;饲毒后6 d,在中肠外表的肌肉细胞分布有P9-1;饲毒后10 d,P9-1分布于中肠和后肠表面的肌肉,同时在唾液腺也能观察到P9-1的存在。结果表明RBSDV在介体灰飞虱体内首先侵染中肠上皮细胞并复制,随后扩散到中肠表面的肌肉细胞,并通过环肌和纵肌扩散到中肠和后肠,最后扩散到唾液腺。本研究首次直观地阐述了RBSDV在灰飞虱消化系统的侵染和扩散过程,为有效阻断灰飞虱携带并传播病毒奠定基础。
- 贾东升马元元杜雪陈红燕谢联辉魏太云
- 关键词：水稻黑条矮缩病毒灰飞虱侵染途径
- 南方水稻黑条矮缩病毒P6抗体的制备及应用被引量：4
- 2014年
- 为了建立快速准确检测田间介体白背飞虱带毒率的方法,利用Gateway重组技术将与病毒早期复制有关的P6基因的N端993 bp构建原核表达载体pDEST17-P6,并将诱导表达的目的蛋白免疫注射新西兰大白兔制备多克隆抗体。结果表明:Western blot检测制备的P6抗体可特异性检测SRBSDV侵染水稻的P6蛋白,免疫荧光标记技术可检测南方水稻黑条矮缩病毒(Southern rice black streaked dwarf virus,SRBSDV)侵染白背飞虱体内的P6蛋白,且P6抗体可直观高效准确地用于免疫荧光标记检测昆虫带毒率。以上研究表明,所制备的P6抗体可用于SRBSDV的田间介体昆虫带毒率快速检测,有助于病毒病害的监测和预报。
- 郑胜兰贾东升魏太云
- 关键词：南方水稻黑条矮缩病毒抗体制备免疫荧光标记
- 南方水稻黑条矮缩病毒在灰飞虱体内受到多种屏障的限制
- 近年来,南方水稻黑条矮缩病毒(southern rice black-streaked dwarf virus,SRBSDV)在我国南方稻区流行。SRBSDV主要由白背飞虱以持久增殖型方式高效传播,灰飞虱可低效携带但不能...
- 兰汉红杜雪贾东升毛倩卓魏太云
- 关键词：南方水稻黑条矮缩病毒白背飞虱灰飞虱
