国家自然科学基金(81273050) 作品数:4 被引量:19 H指数:2 相关作者: 朱惠莲 王丽君 刘燕 周静雅 罗晓林 更多>> 相关机构: 中山大学 广州市越秀区疾病预防控制中心 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 广州市科技计划项目 达能营养中心膳食营养研究与宣教基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
甜菜碱对脂肪变性HepG2细胞Hcy、SAM/SAH及脂代谢相关基因mRNA表达的影响 被引量:7 2013年 目的探讨甜菜碱对脂肪变性HepG2细胞同型半胱氨酸(Hcy)水平、S腺苷蛋氨酸/S腺苷同型半胱氨酸(SAM/SAH)比值及脂代谢相关基因mRNA表达的影响。方法 60 mg/L油酸作用24 h诱导非酒精性脂肪变性HepG2细胞模型,分别按脂肪变性模型组、2.5、5、10 mmol/L甜菜碱组进行干预,同时设空白对照组,每组设3个复孔。各组细胞培养24 h后油红O-苏木素染色观察细胞脂滴形成情况,酶法测定甘油三酯(TG)浓度,高效液相色谱法(HPLC)测定Hcy浓度和SAM/SAH比值,RT-PCR检测MTP、APOB及DGAT2 mRNA的表达。结果与空白对照组比较,脂肪变性模型组的培养基中Hcy浓度上升(P<0.05);而甜菜碱各剂量组与空白对照组比较则差异均无统计学意义(均P>0.05)。与空白对照组比较,脂肪变性模型组的细胞内和培养基中TG浓度上升(均P<0.01);细胞内的SAM/SAH比值(P<0.05)、APOB的mRNA水平(P<0.01)均下降。与脂肪变性模型组的比较,2.5和10 mmol/L甜菜碱组细胞内TG浓度均有所增加(均P<0.05),5 mmol/L甜菜碱组培养基中TG浓度有所增加(P<0.01);10 mmol/L甜菜碱组的SAM/SAH比值明显上升(P<0.01);5、10 mmol/L甜菜碱组的APOB mRNA水平明显上升(均P<0.01);甜菜碱各剂量组中DAGT2的mRNA表达水平均有所上升(均P<0.05)。结论甜菜碱能降低脂肪变性HepG2细胞培养基Hcy的浓度,增高细胞内SAM/SAH比值,增加APOB的mRNA表达,可能提高细胞脂质清除能力,但同时增加了DGAT2 mRNA的表达,可能促进TG合成。 陈力 王丽君 谭耀宗 周静雅 朱惠莲关键词:甜菜碱 S-腺苷甲硫氨酸 体检人群血清甜菜碱、胆碱水平及其影响因素分析 2015年 目的胆碱和甜菜碱是体内重要的甲基供体,探讨性别、年龄、体格测量指标、吸烟、饮酒等因素与血清甜菜碱、胆碱水平的关联性,为甜菜碱和胆碱在慢病防治中的应用提供流行病学依据。方法采用问卷调查的方法收集1643例(男1078,女565)体检人群的一般情况和生活行为方式资料,测量身高、体重、腰围、臀围并计算体质指数(body mass index,BMI)和腰臀比率,采用高效液相色谱-串联质谱法检测血清中甜菜碱、胆碱的水平。结果男性血清甜菜碱、胆碱水平分别比女性高16.9%和12.0%;65岁及以上人群血清甜菜碱和胆碱水平显著高于其他年龄组人群;与BMI、腰围、腰臀比率正常的人群相比,诊断为肥胖的人群血清甜菜碱水平均显著降低,但血清胆碱水平无统计学差异;不饮酒者血清甜菜碱水平高于饮酒者,但只与酒精摄入量≥21g/d的饮酒者间的差异有统计学意义,血清甜菜碱的水平在不同吸烟状态的人群中无统计学差异,血清胆碱水平在不同吸烟状态及不同酒精摄入量的人群中差异均无统计学意义。结论男性血清胆碱、甜菜碱水平高于女性,中老年人血清胆碱、甜菜碱水平较高,肥胖人群血清甜菜碱水平较低,过量饮酒可能会降低血清甜菜碱的水平。 陈晓玲 常颖 王丽君 周瑞芬 刘燕 朱惠莲关键词:影响因素 甜菜碱对非酒精性脂肪肝小鼠肝脏脂代谢的影响 被引量:10 2014年 目的探讨甜菜碱对高脂饲料诱导的非酒精性脂肪肝(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)小鼠肝脏甘油三酯(triglyceride,TG)水平、病理组织学形态和脂代谢相关基因表达水平的影响。方法将72只雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组,NAFLD模型组和1%甜菜碱干预组,每组24只。对照组饲以普通饲料,模型组和干预组均饲以高脂饲料。对照组和模型组均给予普通的饮用水,干预组给予含1%甜菜碱的饮用水。干预12w和18w后,试剂盒测定肝脏TG浓度;肝组织苏木素和伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色观察组织形态学变化;反转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)检测肝组织脂肪酸合成酶(fatty acid synthetase,FAS)、乙酰辅酶A羧化酶(acetyl-CoA carboxylase,ACC)、脂肪分化相关蛋白(adipose differentiation-related protein,ADRP)、过氧化酶体增殖物激活α受体(peroxisome proliferator-activated receptorsα,PPARα)和微粒体甘油三酯转运蛋白(microsomal triglyceride transfer protein,MTTP)mRNA表达水平;Western blot检测肝组织MTTP蛋白表达水平。结果干预12w后,与对照组相比,模型组小鼠肝脏TG水平明显上升(P<0.01),PPARα和MTTP mRNA表达水平明显下降(P<0.01);与模型组相比,1%甜菜碱干预组小鼠肝脏TG水平、ACC和ADRP mRNA表达水平显著下降(均为P<0.01),及PPARα和MTTP mRNA表达水平呈上升趋势(P>0.05)。干预18w后,与对照组相比,模型组小鼠肝脏TG水平、FAS、ACC和PPARαmRNA表达水平差异无统计学意义,ADRP和MTTP mRNA表达水平明显下降(均为P>0.05);与模型组相比,1%甜菜碱干预组小鼠肝脏TG水平明显下降(P<0.01),PPARα和MTTP mRNA表达水平明显增加(均为P<0.01)。HE染色结果显示,干预组脂肪变性较模型组明显减轻。结论甜菜碱通过调节肝脏脂代谢相关基因的表达,影响TG水平,对高脂饮食诱导NAFLD小鼠具有肝损伤保护作用。 周静雅 王丽君 侯孟君 罗晓林 刘燕 朱惠莲关键词:甜菜碱 非酒精性脂肪 MRNA表达 血清中氧化三甲胺的高效液相色谱串联质谱法测定研究 被引量:2 2015年 目的 建立人血清中胆碱依赖肠道菌群代谢物——氧化三甲胺(TMAO)的高效液相色谱串联质谱法(HPLC-MS/MS)的测定方法,并研究其精密度和稳定性。方法 以d9-TMAO为内标,血清经乙腈除蛋白后,采用Si O2柱(2.1 mm×100 mm,5μm)、乙腈-甲酸铵(10 mmol/L,p H 3.0)等度洗脱,选择多反应监测模式测定,测定方法的精密度和准确度及不同保存条件下的稳定性。结果 本研究方法的检测限和定量限分别为0.003和0.063μmol/L,线性范围为0.16-20.00μmol/L(r2=0.999 9),不同浓度点的日内变异系数为2.03%-2.64%,日间变异系数为6.00%-9.94%,回收率为89.5%-103.0%;血清在4℃保存时,24 h内TMAO浓度变化在10%以内,72 h后TMAO浓度升高明显,浓度变化为15.85%;血清保存于-80℃时,72 h后TMAO浓度变化范围均在10%以内;反复冻融4个冻融循环内浓度变化仍在15%的可接受范围内。结论 本研究建立的高效液相色谱串联质谱法检测TMAO的方法具有快速、准确且灵敏的特点,可以满足大样本人群血样检测要求。血液样本保存时应注意保存温度、时间对TMAO浓度的影响。 刘燕 谭栩颖 许斌 王一钦 唐志红 朱惠莲关键词:血清 氧化三甲胺