湖北省科技攻关计划(2007AA301C14-1)
- 作品数：6 被引量：8H指数：1
- 相关作者：程范军陈龙王家宁唐俊明刘岐焕更多>>
- 相关机构：郧阳医学院附属东风医院武汉大学郧阳医学院更多>>
- 发文基金：湖北省科技攻关计划湖北省自然科学基金湖北省教育厅重点项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 趋化因子GROβ动员造血干／祖细胞的研究进展被引量：1
- 2009年
- 粒细胞集落刺激因子是造血干／祖细胞动员的金标准，但仍有部分患者或供体动员失败。趋化因子GROβ为快速的造血干／祖细胞动员剂，能动员较多的早期造血于细胞，其动员的移植物不仅能快速造血重建，还能进一步提高归巢和植入。本文就趋化因子GROβ对造血干／祖细胞的动员作用、动员特点及动员机制进行综述。
- 郑芳程范军
- 关键词：动员造血干细胞造血祖细胞
- 鼠尾胶在小鼠外周血间充质干细胞分离培养中的作用被引量：4
- 2008年
- 背景:动物和人外周血中分离出的间充质干细胞生长繁殖受分离方法、培养条件等因素的影响。目的:采用重组人粒细胞集落刺激因子动员小鼠外周血间充质干细胞,体外培养条件中加入鼠尾胶包被,观察其对细胞分离、培养、增殖的影响。设计、时间及地点:开放性实验,于2005-05/2007-12在郧阳医学院附属人民医院临床医学研究所完成。材料:昆明小鼠20只随机分为鼠尾胶包被组和不包被对照组,每组10只。方法:小鼠皮下注射重组人粒细胞集落刺激因子80μg/(kg·d)连续动员5d,最后一次注射后6h取外周血。肝素抗凝后,采用全血细胞分离培养,用含体积分数为0.15胎牛血清DMEM培养基,分别接种于包被和未包被鼠尾胶的12孔板,接种密度为1×105/孔,48h后半量换液以后每3天换液1次,培养10d。主要观察指标:①鼠尾胶包被的培养板对形成成纤维样细胞集落的影响。②成纤维样细胞集落中的间充质干细胞表面标记流式检测结果。③成纤维样细胞集落成骨、成脂肪诱导后嗜银法和油红O法染色鉴定。结果:①使用鼠尾胶包被的培养板可增加重组人粒细胞集落刺激因子动员后外周血成纤维样细胞集落出现的频率(P<0.05)。②经流式细胞术鉴定形成成纤维样细胞集落的细胞不表达CD34、CD133,表达CD90、CD105。③成骨、成脂肪诱导后细胞嗜银法和油红O法染色鉴定均呈阳性。结论:培养的细胞符合公认间充质干细胞的特征,鼠尾胶可增加培养皿的黏附性促进间充质干细胞分离。
- 刘岐焕陈龙程范军唐俊明王家宁高清平
- 关键词：间充质干细胞集落形成单位测定粒细胞集落刺激因子
- rhEPO和rhG-CSF对小鼠CD90^+细胞的动员作用
- 2009年
- 目的:探讨重组人促红细胞生成素(rhEPO)和重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)对小鼠外周血CD90+细胞的动员作用。方法:30只雄性昆明小鼠随机分为对照组、rhG-CSF组和rhEPO组。rhG-CSF 40μg.kg-1.d-1、rhEPO 250 IU.kg-1.d-1连续皮下注射5 d;对照组连续皮下注射生理盐水。每组均于最后一次注射后6 h收集外周血,计数有核细胞(ANC)和单个核细胞(MNC),流式细胞仪检测外周血ANC中CD90+、CD34+CD90+和CD90+CD34-细胞的比例。结果:应用rhG-CSF和rhEPO动员后,小鼠外周血中ANC和MNC的数量均较对照组增加(P<0.05),但rhG-CSF和rhEPO两组之间无差异(P>0.05)。流式细胞术检测显示rhEPO组外周血ANC中CD90+细胞比例为(56.49±9.06)%,较rhG-CSF组明显增加(P<0.05);而rhG-CSF组和对照组CD90+细胞占ANC的比例无明显差异(P>0.05)。rhEPO组的CD90+CD34-细胞比例增至(53.5±8.9)%,占CD90+细胞中绝大多数。结论:rhEPO和rhG-CSF均有较强的造血干细胞动员能力,但rhEPO对CD90+细胞的动员作用强于rhG-CSF,提示rhEPO对早期造血干细胞可能具有更强的动员作用。
- 郑芳陈龙程范军刘岐焕张有顺邹灿
- 关键词：促红细胞生成素粒细胞集落刺激因子
- 红细胞生成素对骨髓源间充质干细胞迁移的影响被引量：1
- 2008年
- 目的利用Transwell体外迁移体系初步探索EPO在骨髓源间充质干细胞（MSC）迁移中的作用及其信号传递机制。方法采用经典的全骨髓细胞贴壁法培养MSC，通过成骨、成脂肪等多向诱导分化以及流式细胞术分析其表面标志（CD133、CD34、CD90、CD105）等鉴定MSC特征；以第3代MSC为实验材料，利用Transwell体外迁移体系，先观察不同浓度的rhEPO对MSC迁移的影响，随后在50nm0L／L Wortmannin、50μmoL／LPD98059、10μmoL／LU73122、4μg／ml抗EPO—R IgG、30μmol/LSB203580、10mmol／L Straurosporine、6nmol/L G0697、50μmol/L Pseudo Z等不同的信号转导途径阻断剂的干预下观察EPO对迁移的影响。结果培养的MSC呈现出CD90、CD105强阳性，具有成骨、成脂肪等多向分化能力；MSC体外迁移能力随着rhEP0浓度（1、10、100、1000IU／ml）的递增而逐渐增强，并且rhEP0浓度在100U／ml时，MSC迁移到滤膜上的细胞数接近于峰值；Wortmannin、PD98059、抗EPO—RIgG、Straurosporine、G06976、Pseudoz对MSC迁移均有影响，其中U73122、抗EPO—RIgG、Straurosporine、PseudoZ对MSC迁移阻断的效应最显著。结论EPO—EPO—R所介导的MSC迁移与丝裂原活化蛋白激酶、磷脂酰肌醇特异性磷脂酶C和蛋白激酶C-ζ（PKC-ζ）等信号传递途径有关，且PKC-ζ途径可能处于中心环节。
- 陈龙程范军唐俊明张卫国刘歧焕曾琴兵孔霞郭凌郧王家宁
- 关键词：间充质干细胞迁移蛋白激酶C信号转导
- 自体造血干细胞移植治疗难治性类风湿关节炎1例被引量：1
- 2008年
- 刘岐焕程范军鱼强陈赵玲郑芳刘晓虹
- 关键词：关节炎类风湿造血干细胞移植
- 重组人红细胞生成素促进体外培养的人骨髓间充质干细胞增殖被引量：1
- 2008年
- 为了观察重组人红细胞生成素(rhEPO)对人骨髓间充质干细胞(MSCs)增殖活性的影响,抽取健康志愿者的骨髓液,贴壁培养获取第3代细胞,通过细胞形态特征、细胞表面抗原及诱导分化的方法进行MSCs鉴定;取经过鉴定的第3代MSC(P3-MSC)加入不同浓度rhEPO(0.5、1、5、10、50U/ml)后培养,应用细胞计数法及MTT法检测细胞增殖,用流式细胞术(FCM)分析细胞周期。结果发现:骨髓贴壁培养获取的第3代细胞同时表达CD105和CD90,不表达CD34和CD45,并可被诱导分化为脂肪、骨及软骨细胞,被鉴定为MSC。MTT结果显示EPO处理组的光密度值(OD)均高于对照组(p<0.05);50U/ml浓度EPO组作用最显著,细胞计数法获得的结果与其一致。FCM细胞周期分析表明,rhEPO能明显降低G0/G1期细胞比例,并提高S+G2/M期细胞比例,与对照组相比,差异均具有显著统计学意义(p<0.01)。结论:EPO能促进体外培养的人骨髓MSCs增殖,该效应与EPO调节其进入细胞增殖周期有关。
- 曾琴兵程范军张卫国唐俊明陈龙刘歧焕高清平王家宁
- 关键词：红细胞生成素间充质干细胞细胞周期
