国家自然科学基金(30530530)
- 作品数：7 被引量：54H指数：4
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- 相关机构：南京农业大学中国农业大学更多>>
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- 小菜蛾烟碱型乙酰胆碱受体α亚基cDNA的克隆、序列分析与不同发育阶段表达分析被引量：7
- 2009年
- 烟碱型乙酰胆碱受体（nAChR）介导昆虫中枢神经系统中胆碱能突触兴奋性神经递质的快速传递，也是新烟碱类杀虫剂和多杀菌素的作用靶标。本研究利用RT-PCR和RACE技术，克隆了小菜蛾Plutella xylostella nAChRα亚基的一个新基因（Pxx8）的全长cDNA（GenBank登录号为EU914853）。Pxα8的cDNA序列全长1744bp，开放阅读框为1602bp，编码534个氨基酸，具有nAChRd亚基的典型特征，与其他昆虫nAChRα8亚基具有77％～96％的相似性，与果蝇nAChR132亚基具有76％的相似性。既胡的开放阅读框存在单核苷酸多态性位点，导致多个位点氨基酸的替换。雌性4龄幼虫的多态性位点多于雄性4龄幼虫，而且雌、雄4龄幼虫的多态性位点均不相同。半定量RT—PCR研究结果表明，Pxcα8mRNA在成虫期表达量高于蛹期和4龄幼虫期。本研究结果为进一步研究小菜蛾nAChR亚基的多样性和对多杀菌素的靶标抗性机制提供重要基础。
- 赵宇杨亦桦武淑文吴益东
- 关键词：小菜蛾烟碱型乙酰胆碱受体Α亚基CDNA克隆半定量RT-PCR
- 甜菜夜蛾烟碱型乙酰胆碱受体β1亚基基因的克隆与序列分析(英文)被引量：1
- 2009年
- 烟碱型乙酰胆碱受体是昆虫体内重要的神经受体,同时也是杀虫剂作用靶标。从甜菜夜蛾Spodoptera exigua3龄幼虫体内提取总的RNA,经过反转录,利用RT-PCR获得了烟碱型乙酰胆碱受体6个α和1个β亚基基因的cD-NA序列片段,并利用cDNA末端快速扩增技术(RACE)获得了β亚基基因的cDNA序列全长。该基因命名为SenAChRβ1,其长度为2231个碱基,含有一个1575个碱基的开放读码框,开放读码框编码524个氨基酸残基,预测的分子量为60 kDa。推导得到的氨基酸序列与其它昆虫特别是鳞翅目昆虫的烟碱型乙酰胆碱受体β亚基具有高度的同源性,并具有典型的烟碱型乙酰胆碱受体β亚基特征化位点。
- 尚庆利梁沛高希武
- 关键词：甜菜夜蛾烟碱型乙酰胆碱受体基因克隆
- 小菜蛾对多杀菌素的抗性筛选及遗传方式分析被引量：11
- 2007年
- 通过室内筛选试验,评估了小菜蛾对多杀菌素的抗性风险,并对抗性遗传和交互抗性进行初步研究。以采自广东深圳小菜蛾为起始种群(SZ),在室内筛选26代,获得1个中等抗性水平的品系(SZ-Sp in)。该品系与SZ品系相比,抗性提高到22.4倍,与PH I-S敏感品系相比抗性达到60.7倍。在筛选过程中,小菜蛾对多杀菌素平均抗性现实遗传力较低(0.09),表明小菜蛾对多杀菌素产生抗性的速度较慢。SZ-Sp in抗性品系与PH I-S敏感品系正、反交试验结果表明,小菜蛾对多杀菌素的抗性为不完全隐性、常染色体遗传。SZ-Sp in抗性品系对阿维菌素、氟虫腈、杀虫单没有交互抗性。
- 朱剑翔武淑文杨亦桦吴益东
- 关键词：小菜蛾多杀菌素抗性遗传交互抗性
- 麦长管蚜烟碱型乙酰胆碱受体基因的克隆和序列分析被引量：3
- 2007年
- 昆虫烟碱型乙酰胆碱受体(nicotinic acetylcholine receptor,nAChR)是杀虫剂的重要作用靶标之一。本研究利用简并引物PCR和半巢式PCR技术从麦长管蚜Sitobion avenae(Fabricius)中克隆nAChR基因,成功地获得了5个α型nAChR亚基的cDNA片段。根据5个α亚基片段设计特异引物,结合快速扩增cDNA末端(RACE)技术,成功克隆了5个α型亚基的全长,并发现α5亚基有两种存在形式,它们仅在胞外区有一段175bp的片段有差异。序列分析发现,这些基因均具有nAChR基因家族的典型特征,并与已报道的其他昆虫的烟碱型乙酰胆碱受体的相应亚基具有很高的同源性。该研究为进一步利用基因表达技术研究昆虫nAChR的天然亚基组成,以及分析麦长管蚜对新烟碱类杀虫剂的靶标抗性,奠定了基础。
- 邱高辉韩召军
- 关键词：麦长管蚜乙酰胆碱受体基因克隆
- 烟粉虱烟碱型乙酰胆碱受体α亚基Btα4基因的克隆和序列分析被引量：3
- 2008年
- 利用RT-PCR和RACE技术,对烟粉虱烟碱型乙酰胆碱受体(nAChR)α亚基的1个基因进行了克隆和序列分析。获得的烟粉虱nAChRα亚基基因的全长cDNA序列含有2 090 bp,其开放阅读框编码564个氨基酸。根据该基因编码的氨基酸序列与其他昆虫乙酰胆碱受体α亚基氨基酸序列之间的相似性,将该基因命名为Btα4(GenBank注册号为EF590120)。Btα4编码的α亚基含有2个结构域:N端的胞外结构域和C端的跨膜结构域,N端的胞外结构域含有2个相邻的半胱氨酸(α亚基特征序列)、15个氨基酸构成的半胱氨酸环和乙酰胆碱结合区。研究结果对于揭示烟粉虱潜在的对新烟碱类杀虫剂靶标抗性的分子机制具有重要意义。
- 姚明德杨亦桦武淑文吴益东
- 关键词：烟粉虱烟碱型乙酰胆碱受体Α亚基新烟碱类杀虫剂
- 麦长管蚜对吡虫啉的抗性机理研究被引量：25
- 2008年
- 通过室内筛选获得了麦长管蚜对吡虫啉的抗性品系(25.22倍),并利用增效试验和解毒酶活力测定,对其抗性机理进行了研究。增效试验结果表明:顺丁烯二酸二乙酯在抗、感品系中对吡虫啉都没有明显的增效作用,但氧化胡椒基丁醚和磷酸三苯酯在2个品系均有增效作用,而且在抗性品系中的增效比(3.49和2.62)显著大于敏感品系(1.59和1.29)。解毒酶活力测定发现,抗、感品系的谷胱甘肽S-转移酶比活力没有显著差异,但抗性品系中羧酸酯酶的比活力是敏感品系的1.53倍(P<0.05)。综合分析认为,多功能氧化酶和羧酸酯酶活力增强在该麦长管蚜品系对吡虫啉的抗性中起重要作用。
- 邱高辉姚远韩召军
- 关键词：麦长管蚜吡虫啉抗性机理解毒酶
- 斜纹夜蛾抗溴氰菊酯品系的相对适合度和抗性遗传方式研究被引量：6
- 2007年
- 通过构建种群生命表,观察比较了斜纹夜蛾Spodoptera litura(Fab.)对溴氰菊酯抗性品系(R)和敏感性品系(S)的一系列生长发育和繁殖特征,以种群数量趋势指数来确定各个品系的生物适合度;并采用剂量对数-死亡机率值回归线(LD-P线)分析法,研究了斜纹夜蛾对溴氰菊酯的抗性遗传规律。结果表明,抗性品系(R)在产卵量、孵化率、幼虫历期和蛹重等方面与敏感品系(S)相比,表现出一定程度的生长发育和繁殖上的不利性,抗性品系的相对适合度是敏感品系的0.58。斜纹夜蛾对溴氰菊酯的抗性为常染色体多基因遗传;正、反交后代的显性度分别为0.47和0.45,抗性遗传为不完全显性。
- 黄水金江金林韩召军
- 关键词：斜纹夜蛾溴氰菊酯相对适合度遗传学
