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基于超高效液相色谱-飞行时间质谱技术的肺炎支原体感染小鼠血清代谢组学研究被引量：19: 2017年; 采用超高效液相色谱与串联四级杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS)联用技术的代谢组学方法,分析肺炎支原体(MP)感染小鼠血清内源性代谢物的变化,筛选出与肺炎支原体肺炎(MPP)相关的潜在生物标记物,分析代谢通路,探讨MPP的致病机制。采用MP滴鼻感染的方法建立小鼠MPP模型,肺组织病理切片、IgM和支原体核酸的含量测定结果显示造模成功。利用UPLC-Q-TOF-MS方法分析MP感染小鼠的血清代谢轮廓,利用主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)方法进行数据处理。结果显示MP感染模型小鼠的血清代谢谱与正常小鼠有显著差别,经数据库检索、质谱信息匹配,筛选出包括鸟氨酸、皮质醇、维生素A、色氨酸等47种生物标志物,涉及视黄醇代谢、精氨酸与脯氨酸代谢、甾类激素合成等17条代谢通路。该文建立了基于UPLC-Q-TOF-MS技术的MP感染小鼠血清代谢组学研究方法,从整体水平反映了MP感染小鼠内源性小分子的代谢变化,为进一步在分子水平进行药物筛选与评价奠定了基础。; 魏文峰褚衍涛刘烨霍金海王伟明; 关键词：肺炎支原体代谢组学模式识别

芩百清肺浓缩丸对肺炎支原体感染大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞修复作用的研究被引量：10: 2016年; 通过对转化生长因子-β（TGF-β）和表面活性相关蛋白A（SP-A）给药前后的表达变化及分布,探讨芩百清肺浓缩丸对肺炎支原体（MP）感染大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞的修复作用机制。取60只Wistar大鼠,雌雄各半,体重80～100 g,随机分为6组,每组10只,分别为空白组,模型组,阳性对照组,芩百清肺浓缩丸高、中、低剂量组,采用滴鼻法造模;给药10 d后收集大鼠肺泡灌洗液、血清、左肺及右肺组织中叶,采用免疫组化法检测肺组织中TGF-β及SP-A的蛋白表达及分布;实时荧光定量PCR法测定肺组织中TGF-β,SP-A mRNA的表达;酶联免疫法测定血清及肺泡灌洗液（BALF）中SP-A的含量。通过数据分析可知,芩百清肺浓缩丸能够下调肺组织中TGF-β的表达,增加SP-A的表达,其中TGF-β主要分布于肺间质,SP-A主要分布于AEC-Ⅱ及部分肺泡巨噬细胞内;同时,能够降低血清中SP-A含量,增加BALF中SP-A含量。通过以上结果可知,芩百清肺浓缩丸通过降低TGF-β的表达抑制AEC-Ⅱ发生上皮间质转化,并增加SP-A的表达,恢复肺的正常形态与功能;同时,对MP引起的肺组织毛细血管损伤具有一定的修复作用。; 姚琳张俊威王博隋美娇王伟明; 关键词：肺炎支原体转化生长因子-Β

芩百清肺浓缩丸对肺炎支原体肺炎小鼠β-catenin、α-SMA表达影响被引量：9: 2019年; 目的:阐明芩百清肺浓缩丸治疗肺间质纤维化的机制。方法:使用Balb/c小鼠,通过鼻滴入20μL 10~6CCU肺炎支原体菌液3 d建立肺炎支原体肺炎模型。实验随机分为正常对照组、模型组、醋酸泼尼松(0.0039 g/kg)阳性对照组及芩百清肺浓缩丸高(4.6 g/kg)、中(2.3 g/kg)、低(1.15 g/kg)剂量组,利用HE染色观察各组肺组织结构,Masson染色观察各组纤维素沉积状况,Real-time PCR法检测各组肺组织β-catenin、α-SMA mRNA表达量,免疫组织化学法检测各组β-catenin、α-SMA蛋白表达量及蛋白表达位置。结果:与模型组比较,HE染色显示芩百清肺浓缩丸组肺组织结构明显改善,形态规整,结构清晰;Masson染色显示芩百清肺浓缩丸组纤维素沉积减少。与模型组比较,芩百清肺浓缩丸组肺组织β-catenin、α-SMA mRNA及蛋白表达降低。结论:芩百清肺浓缩丸能降低肺炎支原体肺炎的纤维化因子表达,进而起到抗纤维素沉积的作用。; 蒙艳丽徐慧星王晓溪宋亚娟董汶桥蔡萧君王伟明; 关键词：肺炎支原体平滑肌肌动蛋白

芩百清肺浓缩丸对小鼠肺部慢性炎症合并肺炎支原体肺炎的疗效观察被引量：2: 2019年; 目的探讨芩百清肺浓缩丸对小鼠肺部慢性炎症合并肺炎支原体肺炎后纤维蛋白分泌的抑制作用。方法利用Real-time PCR、免疫组织化学、HE和Masson方法检测肺部慢性炎症合并肺炎支原体肺炎小鼠Wnt5a、α-SMA的m RNA、蛋白水平的影响。结果芩百清肺浓缩丸治疗组Masson染色显示纤维素沉积减少,Real-time PCR和免疫组织化学检测显示细胞因子Wnt5a及α-SMA表达降低。结论芩百清肺浓缩丸可抑制肺部慢性炎症合并肺炎支原体肺炎小鼠纤维素沉积,药物作用的靶点为Wnt5a及α-SMA。; 蒙艳丽王晓溪徐慧星王欣王博宋亚娟王伟明; 关键词：肺炎支原体 WNT/Β-CATENIN通路

地龙对肺纤维化小鼠肺组织中纤维化因子TGF-β1及α-SMA表达的影响被引量：35: 2019年; 探究地龙对博来霉素诱导的肺纤维化小鼠纤维化因子TGF-β1及α-SMA表达的影响。通过Biacore技术初步检测地龙与纤维化因子TGF-β1的结合力,并采用体内药效学加以验证。将60只雌雄各半的C57小鼠随机分为空白组,模型组,地龙高、中、低剂量组,醋酸泼尼松组;除空白组外(予以气管内注射0.08 m L·kg^-1氯化钠注射液),其余5组予以气管内注射博来霉素4 mg·kg^-1来复制肺纤维化模型。药物治疗14 d后,采用Masson染色、免疫组化、RT-PCR技术检测TGF-β1及α-SMA的表达。Biacore实验结果显示,地龙提取液在体外与TGF-β1蛋白有较好的结合,结合值达到619.3;Masson结果显示,与模型组相比,地龙高、中、低剂量组纤维素沉积均有不同程度减轻;RT-PCR结果显示,不同剂量的地龙提取液在一定程度上均能降低TGF-β1和α-SMA蛋白及mRNA的表达,且呈现一定的剂量依赖性。综上所述,地龙可通过与靶蛋白TGF-β1结合从而抑制α-SMA的表达来延缓肺纤维化进程。; 王慧慧蒙艳丽杨志敏王晓溪徐慧星王伟明; 关键词：地龙肺纤维化 TGF-Β1 Α-SMA

黄芩药理作用研究概况被引量：13: 2015年; 黄芩是我国的传统中药,具有多种药理活性和广泛的临床应用价值。本文在广泛查阅文献的基础上,对黄芩的药理作用进行综述,为黄芩的进一步研究提供科学资料。; 杨阳蒙艳丽王伟明; 关键词：黄芩药理作用

基于UPLC-Q-TOF-MS技术的广地龙血清药物化学初步研究被引量：4: 2017年; 目的:对广地龙的血清药物化学进行初步研究。方法:应用超高液相色谱-串联四级杆飞行时间质谱技术(UPLC-Q-TOF-MS)建立广地龙及其含药血清样品的分析方法;比较体外样品、空白血清及含药血清分析结果,结合Peakview 2.0和Metabolite Pilot 1.5数据分析软件鉴定和表征广地龙血中移行成分。结果:从大鼠含药血清中发现了13个移行成分,包括10个原型成分和3个代谢产物。结论:初步确定了广地龙的血中原型成分及代谢产物,有助于阐明其药效物质基础和作用机理。; 张玉魏文峰霍金海王伟明; 关键词：广地龙血清药物化学

黄芩苷抗肺炎支原体研究被引量：19: 2020年; 目的芩百清肺浓缩丸是国家食品药品监督管理局批准的第一个用于临床治疗小儿支原体肺炎的中药,黄芩苷是芩百清肺浓缩丸的主要单体,实验使用肺炎支原体实验株、阐明芩百清肺浓缩丸单体黄芩苷抗肺炎支原体作用。方法肺炎支原体感染细胞和小鼠给予低剂量和高剂量的黄芩苷后,利用Real-time PCR、荧光染色和MTT等方法测定药物对感染肺炎支原体的实验模型的治疗作用。结果与空白组比较,黄芩苷高剂量组和低剂量组都降低肺炎支原体浓度,但高剂量组作用更加显著。结论黄芩苷能抑制感染实验模型的肺炎支原体数量,阐明黄芩苷具有体内外抗肺炎支原体作用。; 蒙艳丽徐佳莹王晓溪徐慧星王欣蔡萧君王伟明; 关键词：肺炎支原体黄芩苷

黄芩苷对肺炎支原体感染肺上皮细胞增殖的影响被引量：8: 2021年; 目的:探讨黄芩苷对肺炎支原体感染A549上皮细胞增殖和细胞形态的影响。方法:采用MTT法、划痕实验、细胞克隆技术和免疫细胞化学染色等方法测定黄芩苷对感染肺炎支原体A549上皮细胞增殖作用,HE染色观察细胞形态变化。结果:黄芩苷在4~512 mg/L浓度范围内无细胞毒性。与模型对照组相比,黄芩苷各给药组存活细胞数增多,细胞增殖率显著升高(P<0.05),划痕长度缩短,细胞集落形成率升高(P<0.05),PCNA蛋白表达量增多(P<0.05)。HE染色见细胞结构形态较好,细胞膜清晰完整,细胞密度大,凋亡细胞减少。结论:黄芩苷对肺炎支原体感染肺上皮细胞具有细胞增殖促进作用。; 王博王晓溪徐慧星王欣蒙艳丽王伟明; 关键词：肺炎支原体肺炎黄芩苷肺上皮细胞细胞形态体外实验

基于代谢组学的芩百清肺浓缩丸治疗支原体肺炎小鼠的作用机制研究被引量：5: 2017年; 目的研究芩百清肺浓缩丸治疗支原体肺炎的作用机制。方法采用超高效液相色谱与串联四级杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS)联用技术的代谢组学方法,分析肺炎支原体感染小鼠肺组织中内源性化合物的变化。采用Progenisis QI软件进行色谱峰识别及匹配,并采用主成分分析(PCA)和偏最小二乘-判别分析(PLS-DA)对获得数据进行降维,通过分析对不同组间分离贡献度较大(VIP>1,P<0.05)化合物的串联质谱数据,经HMDB等数据库检索,确定潜在生物标志物。结果从肺组织中共鉴定出视黄醛、全反式维甲酸、焦谷氨酸、白三烯C4、维生素A、花生四烯酸、前列腺素I2等20个潜在生物标志物。与模型组比较,芩百清肺浓缩丸对20个潜在生物标志物均具有回调作用。结论芩百清肺浓缩丸通过影响视黄醇代谢、亚油酸代谢、花生四烯酸代谢等通路发挥治疗支原体肺炎的作用。; 魏文峰刘烨霍金海王伟明; 关键词：肺炎支原体代谢组学主成分分析

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