中国博士后科学基金(200801438)
- 作品数：6 被引量：14H指数：3
- 相关作者：华进联张姗姗曹晖梁倩石玉更多>>
- 相关机构：西北农林科技大学更多>>
- 发文基金：中国博士后科学基金教育部科学技术研究重点项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 成年昆明小鼠雄性生殖干细胞的分离培养及其多能性研究被引量：4
- 2010年
- 【目的】从成年昆明小鼠睾丸组织中分离具有多能性的雄性生殖干细胞(Male germline stem cells,mGSCs)。【方法】采用机械法和2步酶消化法分离出成年昆明小鼠的精原细胞,经差速贴壁后,培养在小鼠胎儿成纤维细胞(MEF)饲养层上,2周后得到类胚胎干细胞(ESCs)样mGSCs。对得到的mGSCs进行碱性磷酸酶(AP)染色、免疫荧光染色、RT-PCR、体内分化等检测。【结果】mGSCs具有类似ESCs的形态和多能性,AP染色呈阳性,免疫荧光Oct4、Vasa染色呈阳性,RT-PCR检测其表达Oct4、Nanog、Sox2等多能性基因和Vasa、C-kit等生殖细胞的标记基因,在免疫缺陷鼠体内能形成畸胎瘤,组织学检测其可形成包括3个胚层在内的多种类型细胞。【结论】从成年昆明小鼠睾丸分离的精原细胞,在体外培养去分化形成了具有类ESCs生物学特性的mGSCs,mGSCs既具有多能性,也具有生殖细胞的基本生物学特性。
- 潘少辉胡玥张姗姗王静李飞飞高志敏杨春荣华进联
- 关键词：精原细胞多能性
- 维生素A类化合物与生殖细胞发育被引量：1
- 2011年
- 维生素A（VA）是生命有机体内细胞增长、分化、增殖和程序性凋亡的关键调节因子，其参与胚胎发育、组织分化、肿瘤细胞生长等重要过程，对视力、上皮组织及骨骼发育、配子生成及胎儿的生长发育等所必需。视黄酸（RA）是维生素A的生物活性代谢所产生的一种脂溶性的小分子物质，主要由环乙烯、侧链和极性基团组成。根据其双键构型的不同，可分为反式视黄酸和顺式视黄酸。
- 曹晖华进联
- 关键词：维生素A类化合物肿瘤细胞生长组织分化小分子物质视黄酸
- 关中奶山羊Prm1基因的克隆及真核表达
- 2012年
- 【目的】研究雄性奶山羊Prm1基因的表达规律并克隆该基因,为奶山羊精子发生过程的研究提供分子基础。【方法】利用PCR技术从关中奶山羊睾丸组织中扩增出Prm1基因的全CDS序列,对其进行同源性比较和进化比较。同时用PCR、western blotting及免疫组化技术检测Prm1在不同年龄雄性关中奶山羊睾丸中的表达。将克隆出的奶山羊Prm1基因与pIRES-GFP载体连接构建重组真核表达载体,转染GC1细胞和人的脐带基质细胞检测Prm1基因的超表达情况。【结果】Prm1基因在成年奶山羊睾丸组织中的表达量很高,且只定位于精子头部,在其它时期的睾丸组织中基本不表达。同时扩增得到了关中奶山羊Prm1基因CDS序列,与其它物种比对,发现其与许多物种具有较高的同源性,与牛的同源性高达97.4%,最后在GC1细胞和人的脐带基质细胞中进行了超表达。【结论】得到了关中奶山羊Prm1基因的表达规律及完整的CDS序列。
- 李明昭刘超孙军伟朱海鲸曹晖吕晓仇普斌华进联
- 关键词：关中奶山羊基因克隆
- 梗阻性无精子症患者睾丸精子左旋肉碱培养后关键基因表达量的变化研究被引量：6
- 2010年
- 目的:探讨肉碱对人精子活力的影响及其对男性不育的治疗作用。方法:以梗阻性无精子症患者睾丸穿刺取得的精子为研究对象,通过普通培养液、培养液中添加100mmol/L及250mmol/L肉碱进行培养,比较培养前后精子活动率的变化,以及用RT-PCR检测男性生殖细胞特异性基因Vasa、Dazl、Acr、Prm1及ATPase6.0表达量的变化,探讨左旋肉碱与有关精子发生和成熟过程的重要功能基因表达的关系。结果:培养24～72h,添加100mmol/L的左旋肉碱培养液运动精子数明显较未添加和添加250mmol/L组高(P<0.01);100mmol/L左旋肉碱培养液组中典型的快速前向运动精子数明显较多,巴氏染色法观察其具有正常的精子结构,RT-PCR检测表明100mmol/L的肉碱可提高精子中Acr、Prm1、Dazl及ATPase6.0基因的表达量,而250mmol/L的肉碱组Dazl、Acr、Prm1基因的表达减少。结论:合适浓度的左旋肉碱可通过上调一些生殖相关基因的表达使得睾丸精子培养后活力增强,有利于对睾丸穿刺患者行单精子注射时精子的选择。如培养液中肉碱浓度过高,可能由于肉碱的毒性作用,反而使得这些基因的表达量减少。
- 师娟子张姗姗张洲梁倩石玉华进联孙婷
- 关键词：左旋肉碱精子活力梗阻性无精子症
- miRNAs与哺乳动物生殖细胞发生被引量：3
- 2010年
- 随着小RNA组学的兴起，越来越多不曾被关注的小RNA分子，如siRNAs，miRNAs，rasiRNAs和piRNAs等先后被发现。研究显示，相对于基因、蛋白质等具有复杂结构的生物大分子而言，这些结构非常简单的微型RNA对动物正常机能的维持、细胞增殖、分化、凋亡、器官形成、肿瘤形成等各种生命现象都具有极其重要的影响。
- 华进联张姗姗
- 关键词：MIRNAS哺乳动物细胞发生SIRNASRNA分子
- 诱导型细胞的研究进展
- 2012年
- 胚胎干细胞(ES细胞)和诱导型多能干细胞(iPS细胞)的研究进展为生物学基础研究注入了新的活力,然而免疫排斥、致瘤性以及诱导效率低等缺陷制约其进一步快速发展和临床应用.最近,科学家借鉴iPS细胞诱导技术和传统的诱导体系,将终末分化细胞直接诱导为功能性细胞,如心肌细胞、神经细胞和肝脏细胞,称为诱导型细胞.这些研究进展极大地促进了细胞分化、重编程和表观遗传学的研究,也为人类再生医学的研究提供了新的途径.
- 王龙华进联
- 关键词：胚胎干细胞转分化
