国家自然科学基金(31272424) 作品数:8 被引量:14 H指数:2 相关作者: 徐宁迎 周辉云 王云霞 王琪 王颖 更多>> 相关机构: 浙江大学 太原理工大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家高技术研究发展计划 国家科技支撑计划 更多>> 相关领域: 农业科学 哲学宗教 更多>>
甲状腺素对猪小肠上皮细胞miR-let-7a基因表达及细胞增殖的影响 被引量:1 2018年 miR-let-7a在动物细胞的分化、增殖与凋亡等方面发挥越来越重要的作用。甲状腺激素(TH)作用非常广泛,机体的每个细胞几乎都是TH作用的靶细胞,其可以促进组织分化、生长和成熟。本实验用甲状腺素(T4)浓度分别为(0、0.02、0.03、0.05、0.075、0.1、0.2μmol/L)在体外培养猪的小肠上皮细胞。结果表明:T4处理组的细胞体积形态相对于空白对照组没有明显变化;当T4添加浓度为0.03μmol/L时,细胞的增殖率显著低于其他组(P<0.05);当T4浓度为0~0.03μmol/L时,let-7a的表达随着添加剂量的增加而升高,浓度从0.03~0.2μmol/L变化时,let-7a的表达呈现降低趋势,浓度为0.03μmol/L时表达量极显著高于其他组(P<0.01)。let-7a的表达量与细胞增殖呈负相关。 高慧珍 陈理星 黄敏婕 徐宁迎关键词:小肠上皮细胞 甲状腺素 基因表达量 miR-let-7基因家族在金华猪和长白猪中的组织表达分析 被引量:2 2017年 mi R-let-7基因广泛参与动物组织器官的发育调控,其表达具有组织特异性。本研究选用70 d的金华猪和长白猪公猪(各3头),采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)技术检测了let-7基因家族6个成员(let-7a、let-7c、let-7d-3p、let-7e、let-7f、let-7g)在心脏、肝、脾、肺、肾、小肠中的表达量,分析它们在组织间及品种间的表达差异,重点分析了在小肠中的表达差异。结果表明:let-7基因家族在长白猪肝组织中表达量显著高于其他组织(P<0.05),在金华猪小肠和心脏中显著高于其他组织(P<0.05);在小肠中,金华猪let-7a和let-7c基因表达量极显著高于其他成员(P<0.01),长白猪let-7a基因表达量极显著高于其他成员(P<0.01),let-7在小肠的表达存在品种间差异,金华猪的let-7a和let-7d-3p基因表达量极显著高于长白猪(P<0.01),let-7c基因显著高于长白猪(P<0.05),而let-7e基因却显著低于长白猪(P<0.05)。本研究结果为探究mi R-let-7基因在金华猪和长白猪生长和脂肪形成方面的分子作用机制提供了参考。 高慧珍 陈理星 董定娟 高甜甜 黄敏婕 徐宁迎猪miR-let-7i的组织表达谱分析 被引量:1 2015年 Let-7是最早发现的miRNA之一,参与动物多个器官发育的调控过程,也在多种癌症发生中发挥抑癌作用。本研究采用Rt-qPCR(PCR)方法首先检测金华猪不同发育时期肝脏组织中let-7家族成员之一的miR-let-7i的表达变化,同时比较金华猪和大约克猪心、肝、脾、肺、肾、胰脏、小肠和皮脂中miR-let-7i的表达差异。结果表明:miR-let-7i在金华猪肝脏发育过程中表达总体趋势为胚胎期低于生长阶段,幼年期低于成年期;比较不同猪种间组织表达差异发现,在胚胎80d时,miR-let-7i在小肠中的表达量最高,在心、肝、脾、肺、小肠、皮脂中,金华猪的相对表达量极显著高于大约克(P<0.01),而在肾和胰脏中的表达却极显著低于大约克(P<0.01)。在出生后90日龄时,miR-let-7i在金华猪的心、肺和小肠中表达较高,在约克猪的胰、心和脾脏中表达较高;金华猪的肝、脾、胰脏中miR-let-7i的表达量极显著低于大约克(P<0.01),而在肺、肾、小肠、皮脂中极显著高于大约克(P<0.01)。本研究为探究miR-let-7i在动物发育过程的功能和分子机制奠定了基础。 赵俊生 李艳华 周辉云 徐宁迎长白猪和金华猪肝脏组织mRNA、microRNA和circRNA的比较研究 环状RNA(circular RNA,circRNA)是一类没有5'末端帽子与3'末端polyA尾巴结构的闭合环状非编码RNA分子,可作为内源性竞争RNA(ceRNA)且能够顺式调控亲本基因的表达。研究发现肝脏脂质代谢受... 黄敏婕关键词:长白猪 金华猪 肝脏组织 非编码RNA 代谢调控 ssc-let-7c对猪甲状腺细胞体外培养增殖研究 2016年 Mi R-let-7c是let-7家族的主要成员之一,在甲状腺的生长发育过程中起着重要的作用。本实验通过体外转染mi R-let-7c类似物探索其对猪甲状腺细胞体外培养增殖的影响。观察猪甲状腺细胞在3D条件下的生长状况和猪甲状腺原代及传代细胞的形态变化,并计算细胞生长速度;通过实时荧光定量(q PCR)、MTT技术检测3组体外培养猪甲状腺细胞中mi R-let-7c的表达量和细胞增殖情况;利用在线预测软件mi RWalk2.0对mi R-let-7c的靶基因及其功能进行预测。结果表明:传代2代后的甲状腺细胞生长缓慢,且形态由圆逐渐变长。细胞免疫荧光鉴定结果发现有明显的绿色荧光,表明猪甲状腺细胞功能正常。荧光定量PCR结果显示管家基因Met-t RNA表达稳定,转染mimics组mi R-let-7c表达量明显高于其他2组。利用MTT法的细胞增殖实验中转染mimics组的OD值显著小于其他2组(P<0.05)。利用在线预测软件发现mi R-let-7c的靶基因主要聚集在与胰岛素及癌症等相关的通路。本研究揭示了mi R-let-7c在甲状腺细胞生长过程中的重要作用,为研究mi R-let-7家族在调控猪生长发育过程中的作用提供了有益参考。 陈理星 黄敏婕 梁晶婕 徐宁迎