国家自然科学基金(81272993) 作品数:13 被引量:38 H指数:2 相关作者: 何淑雅 马云 肖方竹 唐艳 李斌元 更多>> 相关机构: 南华大学 中南大学 长沙理工大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 湖南省研究生科研创新项目 湖南省研究生创新基金 更多>> 相关领域: 生物学 医药卫生 环境科学与工程 核科学技术 更多>>
RNA修复研究进展 2014年 机体DNA损伤修复的机制目前已研究得比较全面,而RNA损伤修复的研究却没有引起广泛的认识.主要由于人们长期以来认为损伤的RNA会被机体特异性降解而不是修复.近年来,随着多个RNA损伤修复系统的相继发现,揭示机体对损伤RNA可能优先选择进行修复.本文从噬菌体型RNA修复系统、细菌型RNA修复系统、酵母型RNA修复系统和人类的RNA损伤修复系统四个方面对目前RNA损伤修复研究的最新进展做一综述. 李伟 苏泽红 杨杰 何淑雅耐辐射奇球菌pprM基因回补株的构建与鉴定 被引量:1 2016年 目的 构建耐辐射奇球菌prM基因缺失回补菌株,为进一步研究PprM蛋白的功能奠定实验基础.方法 设计并合成HA-pprM基因(HA为流感病毒血凝素)全长的引物,以无突变的pGEX-6p-1-pprM载体为模板,PCR扩增出携带NdeⅠ酶切位点的HA-pprM基因全长,经NdeⅠ酶切后,与pRADK载体连接并转化大肠杆菌,经培养、提取质粒及纯化后,采用酶切鉴定以及基因测序方法确认插入序列的正确性;采用CaC12法将构建好的重组质粒pRADK-HA-pprM转化到耐辐射奇球菌pprM基因缺失的菌株中,通过Western blot验证HA-PprM融合蛋白的表达.结果 构建的重组质粒pRADK-HA-pprM经NdeⅠ酶切鉴定结果符合目的条带大小(438 bp),测序结果显示插入的寡核苷酸序列及方向与预期的一致,Western blot结果显示HA-PprM融合蛋白的相对分子质量约为13 000.结论 笔者成功构建了重组质粒pRADK-HA-pprM,为进一步研究与PprM蛋白相互作用的靶DNA的筛选奠定了良好的基础. 付亮 何淑雅 潘宝平 曾洋 肖方竹 田帅 卢先州 黄波 马云启动子分析方法的研究进展 被引量:18 2015年 启动子是基因表达调控的重要顺式元件,其结构与功能的研究是分子生物学的研究热点之一。对启动子与DNA结合蛋白的研究能从转录水平上阐明基因表达的调控机制,从而为更好地构建基因表达调控网络奠定基础,而且启动子与结合蛋白的研究能够帮助我们寻找新的蛋白质。近年来,启动子的研究方法日益增多,大多是借助于DNA和蛋白质相互作用的特性。本文从原核和真核启动子的基本结构、分类入手,对常用的和改进的几种启动子分析方法进行介绍。如生物信息学分析方法、酵母单杂交(Y1H)技术、瞬时转染法(Transient Transfection)、染色质免疫共沉淀(Ch IP)技术、凝胶阻滞分析(EMSA)试验和DNA足纹(DNase I footprinting)分析法等,从原理、优缺点和最新应用等方面的研究进展进行了综述。对近年来出现的新技术新方法的应用前景作了展望,为启动子的结构与功能研究提供借鉴。 王秋岩 何淑雅 马云 李俐娟 李斌元关键词:启动子 功能分析 酵母单杂交 EMSA 耐辐射奇球菌pprM DNA结合域基因敲除株的构建 目的 构建pprM DNA结合域敲除株DR1△CSP,并分析其在辐射及其他极端环境处理下的抗性变化,探讨pprM的DNA结合功能对于耐辐射奇球菌(DR)菌的辐射抗性作用。方法 (1)运用生物信息学方法对pprM基因、pp... 杨杰 苏泽红 李斌元 马云 肖潇 范美婷 李伟 王秋岩 何淑雅关键词:耐辐射球菌 基因敲除 DNA损伤修复 功能化磁性载体固定耐辐射奇球菌及其对铀的吸附行为与机理 被引量:13 2016年 为了解决耐辐射奇球菌(DR)容易以悬浮态生长,菌体与水的密度差较小,吸附铀后难以分离等问题,首先使用氯化亚砜对羧基化磁性纳米Fe_3O_4粒子进行酰氯功能化,以此作为DR菌固定载体,再与二乙烯三胺化学修饰的DR菌进行固定化,得到一种新型功能化磁性耐辐射奇球菌吸附剂NFGDR,并通过红外光谱仪和扫描电镜分别表征吸附剂NFGDR的结构。考察溶液pH值、吸附时间、铀初始浓度和吸附剂投加量等因素对吸附剂NFGDR吸附铀的影响,对吸附动力学模型和吸附等温模型进行分析。结果表明:吸附剂NFGDR表面具有大量吸附铀的基团,吸附铀后表面形态发生变化;吸附铀的最佳条件是pH值为5、吸附时间为80 min、铀初始浓度为10 mg/L和吸附剂投加量为5 mg。吸附剂NFGDR对铀的吸附动力学过程符合准二级动力学模型,吸附等温线符合Langmuir等温线模型,说明该吸附体系是一个单层吸附过程。同时,使用3种不同的解析剂对吸附剂NFGDR解析再生6次后,其对铀的吸附率均在80%以上,说明其具有良好的再生性能。 肖方竹 何淑雅 彭国文 唐艳 戴益民关键词:功能化 磁性载体 耐辐射奇球菌 铀 辐射防护基因治疗现状与展望 2017年 放射治疗是恶性肿瘤的主要治疗手段之一,超过50%的肿瘤患者在病程的不同阶段都需要接受放疗.尽管影像引导靶向治疗技术不断发展,使患者受到的辐射剂量大大降低,但仍然存在严重的不良反应——正常组织细胞的辐射损伤.为了减少正常组织损伤,研究人员一直在寻找辐射防护的新方法.目前的辐射防护方法多是采用化学合成小分子物质及天然植物提取物作为辐射防护剂使用,但疗效并不十分理想,研究人员迫切想找到一种高效可行的辐射防护新方法.基因治疗以其靶向明确、细胞毒性小、不良反应少等优点在增强细胞和组织相关性能上具有很大优势,使其成为极好的辐射防护新方法.笔者对辐射防护的基因治疗研究及其未来的改进方向做一综述. 马云 肖方竹 何淑雅关键词:辐射防护 基因治疗 耐辐射奇球菌pprI和pprA基因在真核细胞293T中的表达 被引量:2 2016年 以pGADT-7-pprA、pet28a-pprI载体为模板,构建pEGFP-N1-pprA、pDsRed1-N1-flag-pprI真核表达载体,脂质体2000介导将两个重组载体共转入293T细胞。双酶切及琼脂糖凝胶电泳显示在4700、1000 bp处与4800、1100 bp处出现目的条带。测序结果显示构建序列与模板序列一致,氨基酸序列100%正确。荧光显微镜下见到红色和绿色荧光;Western blot结果显示在不同检测水平65 kDa及60 kDa大小处有融合蛋白表达。结果提示pEGFP-N1-pprA、pDsRed1-N1-flag-pprI真核表达载体构建成功,并在离体293T细胞中共同表达蛋白。证明原核基因pprI、pprA能够在真核细胞中共表达,为后续实验验证DR菌高抗性基因pprA、pprI及其产物在辐射调控网络中的相互作用和协同作用、提高真核细胞的辐射抗性提供了研究基础。 肖潇 马云 肖方竹 唐艳 杨奇 黄波 唐旻 何淑雅关键词:耐辐射奇球菌 PPRI 真核细胞 耐辐射奇球菌辐射抗性机制及其双组份系统的研究 2017年 耐辐射奇球菌拥有极强的辐射抗性能力并能在多种极端环境下存活。其特有的一些辐射抗性基因在其抗性机制中发挥重要作用。双组份系统是广泛存在于细菌中的一种信号转导系统,它能协助细菌应对外界环境的变化,对维持各种生命活动至关重要。双组份系统作为一种应激响应机制在耐辐射奇球菌中有重要作用。笔者就耐辐射奇球菌的抗性机制及其双组份系统的研究进行综述。 曾洋 黄波 阳志 何淑雅关键词:辐射耐受性 耐福射奇球菌铀胁迫应激及dsrA基因转化对其铀还原富集性能的影响 随着核电项目的陆续重启和国家加快推进核电“走出去”战略,天然铀资源供应仍面临巨大压力。在铀资源开采、加工和生产应用过程中产生的含铀废水,若不及时有效处理,将会对周边区域的土壤、水等生态环境造成放射性污染,甚至会对人类生存... 肖方竹关键词:耐辐射奇球菌 DSRA 生物还原 文献传递 脆性X相关蛋白1与双特异性磷酸酶6的作用机制研究 目的:脆性X综合征(Fragile X syndrome,FXS)是常见的单基因X连锁显性遗传病,其主要发病机制是由于脆性X智力低下基因(Fragile X mental retardation 1,FMR1)的突变甚至... 李婉睿文献传递