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RYBP基因稳定沉默的HL-60细胞系的构建被引量：2: 2012年; 目的利用慢病毒介导的RNA干扰（RNAi）技术，建立RYBP基因稳定沉默的HL．60细胞系。方法设计针对RYBP基因的5条短发夹状RNA（shRNA）序列，构建RYBPshRNA慢病毒重组载体，分别包装成慢病毒颗粒，直接感染HL-60细胞，同时设空载体和阴性对照shRNA慢病毒对照组。通过观察绿色荧光蛋白表达以监测感染效率，经嘌呤霉素（终质量浓度8μg／ml）筛选出稳定感染细胞。Westernblot实验初步鉴定出蛋白水平最低的RYBPshRNA组，用实时定量聚合酶链反应（PCR）进一步检测该组细胞mRNA表达水平。结果慢病毒感染的HL-60细胞经嘌呤霉素筛选成功，与对照组比较，5条RYBPshRNA组细胞RYBP表达均有不同程度减低（P〈0．01），其中以shRNA2沉默效果最佳，且shRNA2组的RYBP基因mRNA水平降低了95％以上（P〈0．05）。结论慢病毒介导的shRNA2能高效、稳定地沉默RYBP基因的表达，成功构建了RYBP基因稳定沉默的HL-60细胞系。; 周家砚邓晖王春丽张玉平应逸许艳丽王顺清; 关键词：短发夹状RNA HL-60细胞慢病毒属 RNA干扰

shRNA沉默RYBP基因表达对HL-60细胞增殖和凋亡的影响被引量：1: 2012年; Ring和YY1结合蛋白（RYBP）是生物进化过程中高度保守的转录抑制因子，目前认为是多梳（Polycombgroup，PcG）蛋白家族成员，与白血病、淋巴瘤、宫颈癌等肿瘤的发生、发展和预后密切相关。我们在前期实验中发现白血病患者骨髓单个核细胞（MNC）和白血病细胞系HL-60、SHI．1和K562细胞明显地高表达RYBP，且慢性髓性白血病（CML）患者治疗达到完全缓解时骨髓MNCRYBP表达量明显下降，复发时再升高。说明RYBP基因的表达异常与白血病的发生、预后等有关。我们试图通过慢病毒介导的RNA干扰技术沉默HL-60细胞RYBP表达，观察HL-60细胞增殖与凋亡，进一步探讨RYBP在白血病发生发展中的作用。; 王春丽邓晖张玉平应逸许艳丽王顺清; 关键词：HL-60细胞增殖 RNA沉默基因表达细胞系HL-60 慢性髓性白血病

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广东省科技计划工业攻关项目(20118031800289)