国家教育部博士点基金(20114404130002)
- 作品数:15 被引量:87H指数:6
- 相关作者:雷红涛孙远明刘英菊徐振林王弘更多>>
- 相关机构:华南农业大学广州万联生物科技有限公司广东农工商职业技术学院更多>>
- 发文基金:国家教育部博士点基金广州市科技计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:轻工技术与工程理学农业科学环境科学与工程更多>>
- 雌二醇间接竞争酶联免疫吸附方法的建立被引量:7
- 2012年
- 建立食品中雌二醇免疫分析方法。将雌二醇进行结构改造合成半抗原并经过核磁氢谱和红外光谱验证,再采用活泼酯法与载体BSA和OVA偶联制备人工抗原,免疫兔子制备多克隆抗体,经过反应条件优化建立间接竞争酶联免疫吸附检测方法。结果表明:IC50为3.9ng/mL,检测限为0.3ng/mL,交叉反应率均小于1.21%。检测方法具有高灵敏度和特异性,可应用于食品中雌二醇检测试剂盒的研制。
- 刘珒雷红涛孙远明李振峰杨金易沈玉栋王弘曾道平
- 关键词:雌二醇抗体
- 丝网印刷生物传感器在食品分析中的应用被引量:3
- 2013年
- 丝网印刷生物传感器因其成本低,耗时短,微型化等优点,近年来在食品分析领域得到广泛应用。本文对丝网印刷电极的原理、制作过程进行了介绍,并综述了丝网印刷生物传感器在食品分析领域的研究进展,探讨了其在食品分析领域的应用前景。
- 臧帅刘珒卢蓝蓝孙远明刘英菊雷红涛
- 关键词:生物传感器食品分析
- 手性药物与生物大分子相互作用中对映选择性的表征方法研究进展
- 2016年
- 手性药物在临床上有着重要的影响,已成为人们关注的一个重点问题。本文对手性药物小分子与生物大分子间相互作用中对映选择性分析方法的研究进展作了概述,重点介绍了分子光谱分析法、等温滴定量热法、手性传感器、原子力显微镜、分子对接模拟等方法在手性药物小分子与生物大分子间对映选择性相互作用表征方法中的应用与进展。
- 卢蓝蓝陈佳虹刘英菊肖治理张炽坚Sergei A Eremin孙远明雷红涛
- 关键词:手性药物生物大分子对映选择性
- 荧光偏振免疫分析法检测沙丁胺醇被引量:10
- 2013年
- 利用沙丁胺醇半琥珀酸与异硫氢酸荧光素己二胺衍生物反应合成荧光示踪物SAL-HDF,通过优化示踪物和抗体的最适工作质量浓度,建立一种检测沙丁胺醇的荧光偏振免疫分析方法。结果表明:该方法的检出限为72.36ng/mL,半抑制质量浓度(IC50)为975.18ng/mL,检测范围(IC20~IC80)为178.08~4871.15ng/mL。
- 袁利鹏杨金易徐振林孙远明吴翠华雷红涛
- 关键词:荧光偏振免疫分析沙丁胺醇
- 基于洛美沙星免疫原的喹诺酮药物广谱特异性抗体制备的研究被引量:4
- 2012年
- 以洛美沙星为半抗原,采用碳二亚胺法和活泼脂法将洛美沙星分别偶联于牛血清白蛋白(BSA)和卵清白蛋白(OVA)制备出免疫原和包被抗原,免疫新西兰大白兔获得了抗体。经间接竞争酶联免疫吸附分析方法(icELISA)鉴定,首次基于洛美沙星一种半抗原获得了能够识别至少11种喹诺酮药物的抗体,且检测限低于10ng/mL,灵敏度满足相关标准检测要求。这对进一步开发喹诺酮类药物多残留检测试剂盒具有重要意义。
- Uwamahoro Emmanuella吕书为唐秋实王弘沈玉栋徐振林孙远明杨金易雷红涛
- 关键词:洛美沙星抗体
- 三聚氰胺单试剂荧光偏振免疫分析法被引量:2
- 2013年
- 用三聚氰胺半抗原(MEL)与异硫氰酸荧光素乙二胺(EDF)反应合成了荧光示踪物MEL-EDF,示踪物与三聚氰胺抗体反应得到稳定的单试剂免疫复合物,考察了其结合动力学和置换动力学过程,建立了一种三聚氰胺单试剂荧光偏振免疫分析方法(SR-FPIA).该方法的检出限(LOD)为3.2 ng/mL,半抑制浓度(IC50)为157.1 ng/mL,检测范围(IC20~IC80)为12.2~1012.4 ng/mL,能够满足国家标准和国际食品法典委员会(CAC)对于食品中三聚氰胺最高残留限量的检测要求.整个检测过程在15 min内完成,并且单试剂免疫复合物在4℃下至少可稳定保存30 d以上.本研究对开发三聚氰胺新型免疫检测方法具有重要意义.
- 王强黄启欣孙远明刘英菊徐振林雷红涛
- 关键词:三聚氰胺
- 基于QuEChERS前处理技术的水产品中喹诺酮类药物多残留ELISA检测方法的建立被引量:23
- 2015年
- 建立了水产品中3种喹诺酮类(恩诺沙星、环丙沙星、氧氟沙星)兽药多残留的新型Qu ECh ERS前处理技术结合酶联免疫快速检测的分析方法。基本流程为样品经90%乙腈(1%乙酸)均质提取离心后,上清液依次用C18净化、静置沉淀蛋白后用于测定,该前处理方法灵敏、快速、经济、实用性强。测试曲线线性范围为0.107~177.896ng/m L,检出限为0.0087μg/kg,IC50值为4.34ng/m L。样品批内和批间平均回收率分别为94.10%、93.70%,批内变异系数为4.09%~8.41%,批间变异系数2.78%~7.99%。检测结果与HPLC的相关系数R2=0.9897,表明酶联免疫检测方法及样品前处理方法适合喹诺酮类药物多残留检测。
- 杨金易张燕曾道平王弘徐振林沈玉栋雷红涛孙远明
- 关键词:QU多残留喹诺酮水产品
- 二乙氧基硫代磷酸酯类有机磷农药单链抗体的制备及广谱特异性被引量:7
- 2012年
- 从分泌抗二乙氧基硫代磷酸酯类有机磷农药(DPPs)单克隆抗体(MAb)的杂交瘤细胞系(12C2)中提取了总RNA,经RT-PCR反转录成cDNA,设计带linker引物,采用重叠延伸PCR制备单链抗体(scFv)基因,将其克隆到噬菌体载体p3MH中,构建成噬菌体单链抗体表达载体,转化大肠杆菌表达出噬菌体表面展示scFv,对经过Phage-ELISA鉴定的阳性克隆进行噬菌体外壳蛋白基因geneⅢ的去除,用IPTG诱导其可溶性表达,对表达产物进行SDS-PAGE,Western-Blot及ELISA鉴定,并与亲本MAb进行性能对比.结果表明,可溶性表达的scFv分子量为27000;scFv与DPPs的交叉反应率比其亲本MAb提高了1.3~3.5倍,表明其广谱特异性有所提高.由于scFv与MAb相比具有诸多优点,因此本研究为有机磷农药多残留检测方法的建立提供了一种更广谱、更灵敏的新型识别分子.
- 周丽君黄启欣雷红涛王欲晓王强徐振林王弘孙远明
- 关键词:单链抗体噬菌体展示
- 碱性橙与蛋白间的特异性与非特异性作用荧光光谱比较被引量:1
- 2012年
- 将碱性橙与抗体的作用、碱性橙与牛血清白蛋白(BSA)间的作用分别作为特异性作用和非特异性作用模型,采用荧光光谱法固定激发波长为280 nm,扫描不同温度下碱性橙与抗体和牛血清白蛋白两种相互作用,在300~600 nm的发射波长,比较了两种相互作用的差异。结果表明,碱性橙与抗体结合为单一的静态猝灭过程,二者之间的作用力主要为静电作用力;在溶液中,二者以摩尔比1∶1结合,结合常数为3.88×104L/mol(25#C),3.73×104L/mol(37#C)和2.35×104L/mol(45#C);碱性橙距抗体分子色氨酸残基最短距离(r)为5.52 nm。碱性橙与BSA的结合也为静态猝灭,作用力为静电作用力。但碱性橙与抗体作用过程中形成了激基复合物,与BSA则不形成激基复合物。
- 雷红涛唐秋实黄文凯Chen Situ刘英菊孙远明
- 关键词:碱性橙相互作用荧光光谱
- 手性农药兽药免疫分析研究进展被引量:4
- 2014年
- 手性药物对映异构体在生物体内的代谢转化和毒性作用等具有立体选择性差异,因此从对映体形态水平上加强手性农药兽药的分析研究十分必要。免疫分析法简单快捷、特异性高、灵敏度高,因而成为手性农药兽药分析研究的热点。本文介绍了近年来免疫分析法在手性农药兽药分析检测方面的应用情况,综述了抗体立体选择识别性、分子模拟技术及定量构效关系等在手性药物免疫识别机制研究中应用,并展望手性免疫分析技术的研究和应用发展趋势。
- 曾皓鹏雷红涛张炽坚孙远明徐振林杨金易
- 关键词:手性农药兽药免疫分析