教育部科学技术研究重点项目(01102)
- 作品数:13 被引量:276H指数:8
- 相关作者:汪铭书周毅程安春陈孝跃郭宇飞更多>>
- 相关机构:四川农业大学厦门大学四川省精华企业(集团)有限公司更多>>
- 发文基金:教育部科学技术研究重点项目四川省重点科学建设项目国家科技重大专项更多>>
- 相关领域:农业科学生物学医药卫生更多>>
- 细菌性条斑病侵染水稻抗性相关蛋白研究被引量:2
- 2010年
- 水稻细菌性条斑病由Xanthom onas oryzaepv.oryzicola引起,是目前威胁亚洲稻区水稻生产的重要病害之一。以水稻品种9311为研究对象,通过差异蛋白质组学方法,研究了病菌侵染48 h后水稻叶片的差异表达蛋白质,通过分析比对、质谱分析以及数据库检索,从中选择了7个上调表达的鉴定蛋白,包括4个水稻LRK类基因,2个NBS-LRR类基因和1个PR-10基因家族成员基因。并设计相应的PCR引物,从水稻cDNA中获得相关基因片段做探针进行Northern杂交分析,结果显示,上述基因在接种病原菌12 h或48 h后表达量增加,表明这些蛋白质参与了抗病反应。
- 李东霄张国广郭立佳李敏毛倩汪卫陈亮
- 关键词:细菌性条斑病水稻蛋白组学NORTHERN杂交
- 我国鸭疫里默氏杆菌血清型调查及新血清型的发现和病原特性被引量:203
- 2003年
- 从全国 2 9个省 (市、自治区 )不同代次 (原种、祖代、父母代和商品代 )的 5~ 90日龄患有典型鸭传染性浆膜炎的病死鸭分离到 184 2株鸭疫里默氏杆菌 ,血清型分布为 1(6 38株 )、2 (36 7株 )、3(10 2株 )、4 (14 6株 )、5 (89株 )、6 (4 9株 )、7(87株 )、8(6 8株 )、10 (4 3株 )、11(35株 )、13(5 6株 )、14 (6 1株 ) ,另有 10 1株不属于 1~ 2 1血清型 ,而分属于 4个相同的抗原型 ,被命名为 2 2 (2 1株 )、2 3(18株 )、2 4 (34株 )和 2 5 (2 8株 )血清型。
- 程安春汪铭书陈孝跃朱德康黄城刘菲周毅郭宇飞刘兆宇方鹏飞
- 关键词:鸭疫里默氏杆菌血清型病原特性免疫原性
- 鸭不同途径人工感染鸭疫里默氏杆菌病理学发展规律及其致病机理的初步研究
- 血清1型鸭疫里默氏杆菌人工感染25日龄樱桃谷商品肉鸭,皮下途径感染雏鸭的潜伏期(4h)比滴鼻途径的潜伏期(10h)短,但滴鼻途径感染雏鸭的死亡率(95.5%)比皮下途径感染的死亡率(63.6%)高。两种途径感染雏鸭的临床...
- 程安春汪铭书刘维平袁桂萍刘菲孟琼华韩晓英朱德康徐超廖永洪
- 关键词:鸭疫里默氏杆菌雏鸭病理学致病机理
- 文献传递
- 一个NBS-LRR蛋白质基因转化水稻及其超量表达被引量:1
- 2010年
- 水稻Osxoc1334是一个编码NBS-LRR类蛋白质的基因,通过构建该基因的超量表达载体,并在农杆菌EHA105介导下转化中花11号水稻,最终获得6株再生水稻植株.对抗性愈伤组织和再生植株用GUS组织化学染色检测,结果抗性愈伤组织和6株再生水稻植株均可染上蓝色,而野生型植株不变色,用潮霉素磷酸转移酶基因的特异引物进行PCR鉴定,再生植株均可扩增到目标条带而野生型植株则不能,表明Osxoc1334基因已随T-DNA整合到再生水稻植株基因组中.采用半定量和荧光定量PCR分析转基因水稻的Osxoc1334基因表达,结果其中3株转基因植株的Osxoc1334基因平均相对表达量明显增强,其中1株为野生型植株的23.5倍.这为进一步鉴定该基因功能奠定了基础.
- 郭立佳毛倩汪卫李敏彭西英陈亮
- 关键词:抗病基因细菌性条斑病菌转基因水稻荧光定量PCR
- 间接免疫组化检测鸭疫里默氏杆菌感染和抗原定位的研究
- 应用鸭源血清1型鸭疫里默氏杆菌(RA)作为抗原免疫兔制备兔抗RA的IgG,建立了检测雏鸭感染鸭疫里默氏杆菌的间接免疫酶组织化学法,该法与大肠杆菌(O1、O8、O79、O138)、鸭沙门氏菌、多杀性巴氏杆菌(5:A)感染发...
- 刘维平程安春汪铭书陈孝跃周毅朱德康刘菲孟琼华黄诚宋涌
- 关键词:免疫组化鸭疫里默氏杆菌雏鸭
- 文献传递
- 间接免疫组化法检测鸭疫里默氏杆菌感染和抗原定位被引量:31
- 2005年
- 应用鸭源血清1型鸭疫里默氏杆菌(RA)作为抗原,免疫兔制备兔抗RA的IgG,建立了检测雏鸭感染鸭疫里默氏杆菌的间接免疫酶组织化学法。该法检测大肠杆菌(O1、O8、O79、O138)、鸭沙门氏菌、多杀性巴氏杆菌(5∶A)感染发病死亡雏鸭组织,不出现阳性反应,而检测RA感染发病死亡雏鸭组织出现特异性阳性反应;检测RA人工发病死亡雏鸭,可在心脏、肝脏、肺脏、肾脏、十二指肠、盲肠、直肠、脾脏、法氏囊、胸腺、胰脏、脑和腺胃检测到RA抗原,RA抗原分布于细胞浆、组织间隙和血液;检测RA人工感染病例与RA肝脏分离符合率为100%,检测临床可疑病例的血清1型RA的阳性率(92.96%)比细菌分离率(75.12%)高。该法具有特异、直观和敏感的特点,可用于雏鸭RA人工感染和临床感染的诊断、检测及RA抗原定位和RA致病机理的研究。
- 刘维平程安春汪铭书陈孝跃周毅朱德康刘菲孟琼华黄诚宋涌
- 关键词:免疫组化法鸭疫里默氏杆菌雏鸭
- 水稻XIOsPR10基因表达调控的初步研究被引量:3
- 2010年
- 为探索水稻PR10蛋白在水稻抗细菌性条斑病中的作用,构建了XIOsPR10基因的植物过量表达载体p1301-XIOsPR10及RNAi表达载体pDS1301-XIOsPR10,通过农杆菌介导分别转化水稻愈伤组织,获得了相应的再生植株。经GUS检测和PCR分析,证实XIOsPR10基因以及RNAi片段分别整合到水稻再生植株基因组中;半定量RT-PCR分析显示,过量表达植株中XIOsPR10基因的表达量高于对照,而RNAi转基因植株中XIO-sPR10基因的表达被抑制。
- 郭迟鸣毛倩杨晓坡郭立佳王丽娟陈亮
- 关键词:水稻
- 鸭疫里默氏菌铝胶佐剂与铝胶复合佐剂4价灭活疫苗的比较被引量:9
- 2005年
- 以血清 1、2、4、5型鸭疫里默氏菌 (Riemerella anatipestifer,RA)制备 4价铝胶佐剂和铝胶复合佐剂 2种灭活苗 ,经过无菌及安全检查合格后 ,对 3日龄樱桃谷鸭颈背部皮下注射 0 .5 m L/只。(1 )免疫后 1 0、1 3、1 6 d对同源 RA的攻击 ,铝胶佐剂苗表现出 5 %~ 2 0 %、75 %~ 90 %、1 0 0 %免疫保护 ,2 3~ 30 d免疫保护力开始下降 ;铝胶复合佐剂苗表现出1 0 %~ 35 %、80 %~ 1 0 0 %、1 0 0 %免疫保护 ,5 1~ 6 5 d免疫保护力开始下降。(2 ) 2种疫苗 1次免疫后 2 3d抗体水平均达高峰 ,至 93日龄时仍能检出抗体的存在 ,1 0日龄进行第 2次免疫后可产生更高的抗体水平 ,到 6 5 d时仍能保持较高抗体水平 ;其中 1 6~ 6 5 d进行 2次免疫的铝胶复合佐剂苗产生的抗体水平显著 (P<0 .0 5 )或极显著 (P<0 .0 1 )地高于铝胶佐剂苗。 (3) 2种疫苗免疫雏鸭后能够显著 (P<0 .0 5 )或极显著 (P<0 .0 1 )地增强 T细胞的免疫力 ,时间达 2周。对攻毒保护试验、抗体消长规律和细胞免疫测定结果综合分析表明 ,RA4价铝胶佐剂和铝胶复合佐剂 2种灭活苗免疫雏鸭后 ,免疫保护的形成是体液免疫与细胞免疫协同作用的结果。经实验室攻毒保护试验、EL ISA抗体消长规律测定、T细胞免疫水平测定和田间试验表明 ,研制的
- 程安春汪铭书郭宇飞方鹏飞刘兆宇陈孝跃周毅
- 关键词:鸭疫里默氏菌灭活疫苗免疫保护力免疫增强剂
- 水稻XIOsPR10蛋白的原核表达及其RNase活性研究
- 2010年
- PR10(病程相关蛋白10)类蛋白与植物的抵御外来病害及系统获得性抗性(SAR)有着紧密联系,而且许多PR10类蛋白都具有RNase活性,并通过这种活性抵抗外源病害。根据获得的XIOsPR10基因,将其构建到pET28a中,通过原核表达及磁珠纯化获得目的蛋白,通过RNA消化实验证实XIOsPR10重组蛋白具有RNase活性,进一步揭示了XIOsPR10蛋白的功能。
- 郭迟鸣毛倩王丽娟李东霄杨晓坡郭立佳汪卫李敏郝国静陈亮
- 关键词:防御
- 间接免疫酶组织化学法检测雏鹅感染鸭疫里默氏杆菌的研究被引量:13
- 2004年
- 应用鹅源血清 1型鸭疫里默氏杆菌 (RA)作为抗原免疫兔制备兔抗 RA的 Ig G,建立了检测雏鹅感染鸭疫里默氏杆菌的间接免疫酶组织化学法 (Indirect Immunoperoxidase Staining,IIS) ,该法与大肠杆菌 (O1 、O8、O79、O1 38)、鸭沙门氏菌、多杀性巴氏杆菌 (5∶ A)感染发病和死亡雏鹅组织不出现阳性反应而与 RA感染发病死亡雏鹅组织出现特异性阳性反应。 RA人工发病死亡雏鹅可在心脏、肝脏、脾脏、肾脏、回肠、直肠、肺脏、十二指肠、空肠和盲肠检测到 RA抗原 ,RA抗原分布于细胞胞浆、组织间隙和血液 ,检测 RA人工感染病例与 RA肝脏分离符合率为 10 0 % ,检测临床可疑病例的血清 1型 RA的阳性率 (92 .96 % )比细菌分离率 (75 .12 % )高。该法具有特异、直观和敏感的特点 ,可用于雏鹅 RA人工感染和临床感染的诊断、检测及 RA感染雏鹅后抗原定位和
- 孟琼华程安春汪铭书陈孝跃周毅刘维平朱德康刘菲黄诚宋涌
- 关键词:雏鹅鸭疫里默氏杆菌间接免疫酶组织化学