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广西壮族自治区科学研究与技术开发计划(0537022-01)
作品数:
3
被引量:2
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相关作者:
房慧伶
魏凤
卢晟盛
陆阳清
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相关机构:
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孤雌激活
1篇
电激活
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早期发育
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体外成熟卵母...
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氨基酸
机构
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作者
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卢克焕
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兰宗宝
传媒
3篇
广西农业生物...
年份
3篇
2006
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不同化学激活方法和电激活参数对猪体外成熟卵母细胞早期孤雌发育的影响
被引量:2
2006年
本研究探讨了不同化学激活方法和不同电激活参数对猪体外成熟卵母细胞早期孤雌发育的影响。利用屠宰场猪卵巢卵母细胞,在体外成熟培养44~48h后,将核成熟卯母细胞分别用:(1)不同化学激活方法[①10%乙醇+10μg/mL放线菌酮;②2.5mmol/L氯化锶+10μg/mL放线菌酮;③5μmol/L离子霉素+2.5mmol/L 6-二甲氨基嘌呤(6-DMAP);④200μmol/L硫柳汞+8mmol/L二硫苏糖醇进行激活处理;⑤对照组——不用任何激活剂(试验1)];(2)用不同电场强度和脉冲时程进行电激活(试验2),之后放入胚胎培养液中进行体外培养7d。研究结果显示:(1)4种不同化学激活方法处理卵子的1原核形成率、2原核形成率和原核形成率都显著比对照组的高(P〈0.05),其中离子霉素+6-DMAP组的2原核形成率和总原核形成率最高,分别为(23.1±3.5)%和(65.2±3.5)%,显著比其他处理组的都高(P〈0.05);(2)4种不同化学激活方法处理组的囊胚率都比对照组的高(P〈0.01),其中离子霉素+6-DMAP组的卯裂率及囊胚率最高,分别为(46.6±18.5)9/5和(5.6±4.2)%;(3)本研究所用的4种不同化学激活方法对猪4-细胞孤雌胚SDS—PAGE电泳的蛋白质表达图谱没有显著影响;(4)电场强度为1.7kV/cm、脉冲时程为50和70μs时猪体外成熟卯母细胞激活效果最好,卵裂率、囊胚率、囊胚细胞数分别为:(77.4±9.7)%,(12.4±3.7)%,17.6±5.9和(75.1±10.6)%,(12.3±2.6)%,19.1±8.1。以上结果说明:(1)本研究所用的4种化学激活方法均能有效激活猪体外成熟卵母细胞,其中离子霉素+6-DMAP的激活效果最理想;(2)在本实验室条件下,采用1.7kV/cm的电场强度、50~70μs的脉冲时程均能有效的激活猪体外成熟卵母细胞;(3)本研究所用�
卢晟盛
魏凤
房慧伶
陆阳清
卢克焕
王爱德
关键词:
卵母细胞
体外成熟
孤雌发育
胚胎培养
乙二胺四乙酸钠、能量基质、氨基酸对猪卵母细胞的体外成熟和早期孤雌发育的影响
2006年
本研究探讨了:(1)成熟培养基中葡萄糖和丙酮酸钠剂量对猪卵母细胞体外成熟极体排放率的影响;(2)培养基中葡萄糖、谷氨酰胺、牛磺酸和亚牛磺酸的剂量对猪孤雌激活胚胎体外发育的影响,同时探讨不同浓度乙二胺四乙酸钠(EDTA—Na)对猪孤雌激活胚胎体外发育的影响。利用屠宰场猪卵巢卵母细胞,在含不同剂量葡萄糖十丙酮酸钠的成熟液中体外成熟44~48h,计算其极体排放率(试验1),进行化学法孤雌激活后,在含不同剂量的葡萄糖+谷氨酰胺+牛磺酸+亚牛磺酸与不同浓度的EDTA—Na的培养基中体外培养,计算孤雌激活胚的第48小时卵裂率和第168小时囊胚率(试验2)。结果表明:(1)葡萄糖+丙酮酸钠在l倍剂量(浓度分别为3.05mmol/L和0.91mmol/L)时,猪卵母细胞体外成熟的核成熟率为(59.3±5.0)%,当其剂量加倍时,猪卵母细胞体外成熟的核成熟率极显著下降(P〈0.01),为(51.0±4.4)%;(2)随着EDTA—Na添加浓度的增加,猪孤雌激活胚的的囊胚发育率不断上升,添加浓度达到50μmol/L时囊胚率最高(7.2±4.1)9/6,超过此浓度后囊胚率开始下降,培养基中添加适当浓度(25—100μmol/L)的EDTA—Na对猪孤雌激活胚的囊胚发育率具有有利作用(P〈0.05),添加浓度达到200μmol/L时其有利作用消失;(3)培养基中葡萄糖+氨基酸的剂量过高(葡萄糖、谷氨酰胺、牛磺酸、亚牛磺酸的浓度分别大于5.55,1.0,7.0,5.0mmol/L)对猪孤雌激活胚的卵裂率无显著影响(P〉0.05),但对其囊胚发育率有不利作用(P〈O.05)。本研究得出以下结论:(1)适当浓度(25~100μmol/L)的EDTA—Na对猪早期胚胎体外发育具有促进作用;(2)培养基中能量基质剂量过高会抑制猪卵母细胞体外成熟;(3)培养基中能量基质十
卢晟盛
魏凤
兰宗宝
房慧伶
陆阳清
卢克焕
王爱德
关键词:
氨基酸
卵母细胞
孤雌激活
乙二胺四乙酸钠对猪卵母细胞的体外成熟和孤雌激活后早期发育的影响
被引量:1
2006年
本研究探讨了乙二胺四乙酸钠(EDTA—Na)对猪卵母细胞的体外成熟和孤雌激活后早期发育的影响。利用屠宰场猪卵巢卵母细胞,在不添加或添加不同浓度EDTA—Na的成熟培养液中体外成熟44~48h,挑选核成熟卵母细胞进行孤雌激活,然后移到不添加或添加不同浓度EDTA—Na的胚胎培养液中进行体外培养168h。结果说明:(1)成熟液中添加适当浓度(25~100μmol/L)EDTA—Na对体外成熟猪卵母细胞孤雌激活后的早期发育具有促进作用,在EDTA—Na浓度为100μmol/L时,效果最佳;(2)胚胎培养液中添加适当浓度(25~100μmol/L)EDTA—Na,对体外成熟猪卵母细胞孤雌激活后的早期发育具有促进作用,在EDTA—Na浓度为100μmol/L时,效果最佳;(3)成熟液和胚胎培养液中同时添加100μmol/LEDTA—Na对体外成熟猪卵母细胞孤雌激活后的早期发育具有促进作用;(4)成熟液或/和胚胎培养液中添加不同浓度EDTA—Na,对体外成熟培养后的猪核成熟卵母细胞及孤雌激活后的4-细胞孤雌胚SDS—PAGE电泳的蛋白质表达图谱都无显著影响。
卢晟盛
魏凤
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陆阳清
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关键词:
卵母细胞
体外成熟
孤雌激活
胚胎培养
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