中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(YQ2013003)
- 作品数：4 被引量：17H指数：3
- 相关作者：李玉红陈鹏秦亚光胡亮亮程智慧更多>>
- 相关机构：西北农林科技大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项国际科技合作与交流专项项目更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 黄瓜CsERECTA基因的原核表达及其多克隆抗体制备被引量：5
- 2016年
- ERECTA基因编码一个富含亮氨酸重复序列结构的丝/苏氨酸类受体蛋白激酶,参与调控植物器官的形态建成,在株型控制及抗逆方面也有重要作用。该研究通过构建带有maltose binding protein(MBP)标签的pET21a-CsERECTA融合蛋白原核表达载体,实现了在大肠杆菌(E.coli)BL21(DE3)中的高效表达,并对诱导表达的温度、时间和IPTG浓度进行了优化。利用镍离子螯合层析纯化得到MBP-CsERECTA融合蛋白,再用rTEV蛋白酶对其进行酶切,得到CsERECTA蛋白并制备了该蛋白的多克隆抗体。结果表明,黄瓜CsERECTA蛋白以可溶和包涵体2种形式表达,低温有助于蛋白以可溶性形式大量存在。最佳诱导温度为23℃,诱导时间为6h,IPTG浓度为0.5mmol·L^(-1)。通过Western blot可检测到黄瓜内源的CsERECTA蛋白,说明制备的多可隆抗体具有较好的特异性。多克隆抗体的成功制备为进一步研究CsERECTA的功能奠定了基础。
- 王琪琦李玉红胡亮亮秦亚光赵子瑶陈鹏
- 关键词：黄瓜原核表达多克隆抗体
- 黄瓜过敏性诱导反应蛋白基因(CsHIR1)原核表达及其多克隆抗体制备被引量：5
- 2014年
- 该试验用黄瓜霜霉菌侵染黄瓜幼苗,并通过PCR方法克隆其过敏性诱导反应蛋白(HIR)的基因CsHIR1,构建原核表达载体pET28a-CsHIR1,实现在大肠杆菌(E.coli)BL21(DE3)中的高效表达;对诱导表达的时间和IPTG的浓度进行了优化;利用钴离子螯合层析纯化了重组蛋白并制备高效价多克隆抗血清。结果表明:该黄瓜过敏性反应诱导蛋白以包涵体的形式表达,最佳诱导时间和IPTG浓度分别为4h和0.5mmol·L-1;经纯化,得到高纯度的分子量为34kD重组蛋白CsHIR1。Western blotting显示CsHIR1的抗体具有较好的特异性。原核表达体系的建立和多克隆抗体的制备为进一步研究CsHIR1基因在黄瓜中的功能奠定了基础。
- 毛双双李玉红周旋李万青陈菲帆程智慧陈鹏
- 关键词：黄瓜原核表达多克隆抗体
- 抗白粉病黄瓜叶微卷突变体的叶片结构分析被引量：4
- 2017年
- 为了探讨黄瓜卷叶突变体的叶片结构与白粉病的抗性相关性,从植物抗性组织结构角度,分别对突变体和野生型材料的叶片、栅栏组织、海绵组织、上下表皮的厚度、表皮毛密度及叶片蜡质含量进行了显微形态观察与检测。结果表明,突变体的叶片形态结构发生了显著变化,叶片上、下表皮细胞增厚、栅栏组织变窄、海绵组织加厚且排列紧密;突变体表皮毛形态、数量无显著差异;突变体叶片蜡质含量显著高于野生型。叶片蜡质含量显著增高可能是突变体对白粉病抗性增强的原因之一。
- 戎福喜秦亚光陈菲帆张朝文赵子瑶胡亮亮李玉红
- 关键词：黄瓜突变体白粉病抗性
