河南省基础与前沿技术研究计划项目(11230040093)
- 作品数：3 被引量：19H指数：2
- 相关作者：张红敏刘素素王丽娅谢艳亭李金更多>>
- 相关机构：郑州大学河南省眼科研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金河南省基础与前沿技术研究计划项目河南省高等学校创新人才培养工程更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 双氯芬酸钠对小鼠真菌性角膜炎抗真菌疗效的影响被引量：3
- 2014年
- 目的观察抗真菌药物联合双氯芬酸钠对真菌性角膜炎的治疗效果。方法选取C57BL/6J小鼠为实验动物,以腐皮镰孢菌性角膜炎为模型。实验分为4组:手术对照组(不进行菌丝接种)、模型组、酮康唑组(单纯酮康唑治疗)和双氯芬酸钠组(酮康唑联合双氯芬酸钠治疗)。每组于造模后1 d、2 d、3 d、4 d和5 d分别进行裂隙灯观察和活体共焦显微镜检查。裂隙灯下进行角膜病变严重程度临床评分;对活体共焦显微镜图片进行菌丝定量和炎症细胞计数。手术对照组和双氯芬酸钠组于手术后5 d进行角膜HE染色病理学检查。结果模型组、酮康唑组和双氯芬酸钠组与手术对照组相比,各时间点角膜临床评分均有显著性增加(均为P<0.01);双氯芬酸钠组5 d与模型组相比,临床评分显著增加(P<0.01);双氯芬酸钠与酮康唑组相比,3 d、4 d和5 d的角膜临床评分显著增加(均为P<0.01)。模型组、酮康唑组和双氯芬酸钠组3 d后角膜内菌丝消失;双氯芬酸钠组与模型组和酮康唑组相比,角膜内菌丝面积无明显变化(均为P>0.05)。模型组、酮康唑组和双氯芬酸钠组与手术对照组相比,各时间点角膜炎症细胞数均有显著增多(均为P<0.01);酮康唑组与模型组比较,各时间点炎症细胞数无显著性差异(均为P>0.05);双氯芬酸钠组与模型组和酮康唑组相比,炎症细胞数目4-5 d均有显著性增多(均为P<0.01)。双氯芬酸钠组角膜内炎症细胞浸润与角膜临床评分的Pearson相关分析显示,二者呈明显正相关(r=0.860,P=0.000)。造模后5 d,手术对照组和双氯芬酸钠组HE病理学检查结果显示:手术对照组角膜基质内细胞很少;双氯芬酸钠组基质增厚,基质内细胞增多,基质内细胞分类计数显示,可以确认的中性粒细胞占基质所有细胞总数的72.67%。结论小鼠真菌性角膜炎进行抗真菌药物治疗的同时局部应用双氯芬酸钠,不但不能减轻角膜病变的严重程�
- 张红敏刘素素李金柳慧谢艳亭王丽娅
- 关键词：真菌性角膜炎双氯芬酸钠酮康唑中性粒细胞
- 小鼠真菌性角膜炎中主要免疫细胞的作用被引量：15
- 2012年
- 背景在中国，感染性角膜病变是引起角膜盲的主要原因之一，而其中真菌性角膜炎的发病率高、危害大，是角膜盲防治工作的重点。研究表明，真菌性角膜炎后局部的免疫状态在疾病的发生发展过程中起着至关重要的作用，但其免疫机制尚待进一步研究。目的研究真菌性角膜炎发生发展过程中局部免疫细胞的作用及其机制。方法共选用SPF级12周龄雄性C57BL／6J小鼠48只，按照随机数字表法将小鼠随机分为对照组和模型组，每组24只小鼠，然后根据检测的时间点将成模的小鼠随机亚分为临床评分组，6、9、12、24、72和120h组，每组3只小鼠。模型组小鼠用角膜划痕和带有真菌的竹签涂抹法接种腐皮镰孢菌以建立真菌性角膜炎模型，对照组仅用无菌刀片划痕而不接种任何真菌。各组小鼠分别于上述时间点进行裂隙灯显微镜检查，采用改良标准对炎症程度进行临床评分。其余组按照时间点处死小鼠，采用免疫荧光标记法对炎症局部中性粒细胞和T淋巴细胞进行鉴定，计数炎性细胞数量。实验动物的使用遵循ARVO声明，研究过程经郑州大学实验动物伦理委员会和河南省眼科研究所生命科学实验管理与伦理审查委员会批准。结果造模成功后24h模型组小鼠出现角膜混浊，72h时病变最为严重，此后病变逐渐减轻，而对照组24h后上皮愈合。造模后24～72h，模型组眼部炎症反应评分逐渐达峰值，与造模后6h相比差异均有统计学意义（P〈0．01）；造模后6、9、12h模型组与对照组比较，角膜炎症反应评分均明显升高，差异均有统计学意义（P〈0．05）。造模后9h和12h模型组小鼠中性粒细胞角膜浸润数量增加，与对照组相比差异均有统计学意义（P〈0．05），与24、72、120h比较差异亦有统计学意义（P=0．000）。模型组造模后12、24、72h角膜中性粒细胞与6h比较差异均有
- 张红敏刘素素许中中马聪慧谢艳亭吴细丕王丽娅
- 关键词：角膜中性粒细胞T淋巴细胞
- 中性粒细胞在不同品系正常小鼠角膜的分布及其与角膜创伤修复的关系被引量：2
- 2014年
- 背景 以往人们通常认为角膜无血管、无髓系来源的免疫细胞存在.C57BL/6J小鼠、BALB/c小鼠和裸鼠是眼科免疫学基础研究的常用模型,这些小鼠的角膜是否存在天然免疫的关键细胞——中性粒细胞是值得关注的问题. 目的 研究实验室常用的C57BL/6J鼠、BALB/c鼠和裸鼠正常角膜的中性粒细胞分布特征及其与角膜创伤修复的关系,为相关研究提供依据. 方法 选取角膜正常、10 ～ 12周龄的SPF级雄性C57BL/6J鼠、BALB/c鼠和BALB/c背景的裸鼠各16只,取3种小鼠各8只制备成中央区相连的4瓣角膜铺片,并以角膜周边血管缘为界向内以3个同心圆分区.分别用Gr-1-FITC抗体和CD31/PECAM-1-PE抗体对角膜中性粒细胞和血管进行免疫荧光染色,用免疫荧光显微镜和AR软件测量角膜血管面积并计数中性粒细胞.选取3种小鼠各8只制备角膜创伤模型,用无菌手术刀片以角膜中央为中心做十字划痕,深度至角膜前弹力层.创伤后即刻（0 h）、12h、24 h用2 g/L荧光素钠点眼,荧光显微镜下以AR软件计算不同时间点的创伤面积.于划痕后24 h取小鼠角膜制备铺片,用Gr-1-FITC抗体和CD31/PECAM-1-PE抗体行荧光染色,比较3种创伤小鼠角膜的血管分布、中性粒细胞的数量和分布情况.实验动物的饲养与使用均遵循美国视觉与眼科研究协会制定的科研动物使用规范. 结果 正常C57BL/6J小鼠、BALB/c小鼠和裸鼠角膜中性粒细胞总数分别为（1 733±237）、（353±96）和（1 601 ±223）个/角膜,BALB/c小鼠角膜中性粒细胞数明显少于C57BL/6J小鼠和裸鼠,差异均有统计学意义（P＜0.01）.3种正常小鼠角膜缘均可见血管分布,BALB/c小鼠角膜缘血管面积明显小于C57BL/6J小鼠和裸鼠,C57BL/6J小鼠角膜缘血管面积明显大于裸鼠,差异均有统计学意义（P＜0.01）.3种正常小鼠中性粒细胞的数量与血管面积均呈明显正相关（C57BL/6J：r=0.936,P=0.001;BALB/c：r =0.939,P=0.001;
- 张红敏刘素素陈国铭柳慧窦新岩王素娟李金王丽娅
- 关键词：角膜中性粒细胞疾病模型C57BLBALB
